汪际云[1]2004年在《皮质类固醇激素对鼻息肉组织MUC8表达的影响》文中研究说明杯状细胞和黏膜腺体细胞分泌粘液是鼻腔和鼻窦防御机制的重要组成部分。黏膜上皮表面形成的粘液毯可以俘获外来物质、防止机械损伤、维持黏膜表面的流动性。但是，在慢性鼻窦炎和鼻息肉时，由于粘液分泌过度，粘液的理化特性发生改变，粘性和弹性明显高于正常。这种粘液不适于粘液纤毛系统的传输，造成局部粘液的淤积，为细菌感染创造了条件。 已有研究证明，粘液的粘性和弹性主要取决于粘蛋白含量。Kim等研究鼻息肉上皮细胞粘蛋白成分的变化，发现MUC8 mRNA水平显着增高。Ishinaga等在体外培养的鼻息肉上皮细胞研究发现，地塞米松抑制由细菌内毒素诱导的MUC8基因表达。但是，皮质类固醇激素在人体内是否有相同的作用还未见研究报告。本文研究皮质类固醇激素对人体鼻息肉组织MUC8基因表达的影响。 一、材料和方法 1．实验材料 收集浙江大学医学院附属二院耳鼻咽喉科2002年6月～2003年1月期间住院手术的部分慢性鼻窦炎鼻息肉病例35例。其中，术前地塞米松治疗病例17例，男性12例，女性5例，年龄16～60岁，平均38.9±14.5岁。根据中华医学会耳鼻咽喉科学分会和中华耳鼻咽喉科杂志编辑委员会1997年在海口组织的鼻科学会议制定的慢性鼻窦炎鼻息肉临床分型分期及内窥镜鼻窦手术疗效评定标准，Ⅱ型2期8例，Ⅱ型3期8例，Ⅲ型1例。全身应用地塞米松4～7天，平均4.7±1.4天，其中10例同时给予鼻腔浙江大学硕士学位论文局部皮质类固醇激素喷剂。另18例术前一个月无类固醉激素用药史(包括鼻腔局部喷用和全身应用)，作为对照，男性14例，女性4例，年龄14~58岁，平均年龄36.3士15.2岁。临床分期，n型1期4例，n型2期9例，11型3期4例，m型1例。两组病例均在鼻内镜手术时，取鼻息肉标本，经生理盐水漂洗，去除血迹后，立即装入Eppendof管，置于一80℃冰箱贮藏备测。2.实验方法RNA提取:冰冻鼻息肉组织约50一100mg液氮中碾碎后与lml Trizo!试剂混匀，加0.2ml氯仿，用力振荡，4℃1 2000 rpm离心15分钟。再加异丙醇沉淀RNA。75%乙醇漂洗，OEPC水溶解。 cDNA的合成:取8 09总RNA样品，70℃水浴smin，立即冰浴冷却，依次加入5X逆转录反应缓冲液5协l，10mM dNTps 1.25pl，sopmololigdT引物lpl，Zoou/。-逆转录酶(Moloney murine leukemiavirus，M一MLv)一p一，4oU/p一Rnasin 0.65“一。最后加DEPC水至总体积25 pl。42oC温浴60min，95℃水浴smin灭活M一MLV酶，得到cDNA。 聚合酶链反应(Po一ymerase ehain reaction，PeR) MUCS cDNA扩增:以上述cONA为模板，用MUCS引物进行PCR，循环35个周期。引物根据基因库报导MUCS mRNA序列(Genebank aceession numbe:u一4353)设计如下:上游链5’一ACAGGGTTTCTCCTCATTG一3’;下游链5’一CGTTTATTCCAGCACTGTTC一3’。 内参照p一肌动蛋白(p一actin) cDNA扩增:同样以上述cONA为模板，以p一actin引物进行PCR。引物序列:上游链5’一TTCCAGCCTTCCTTCCTGGG一3’;下游链5一TTGCGCTCAGGAGGAGCAAI，一3’。PCR反应条件均为94oC预变性5 min，94oC变性305，55oC退火305，72oC延伸30s，循环35个周期。然后72oC延伸1 0 min。PCR产物定量取10叫PCR产物，2%琼脂糖凝胶电泳，用数字成像系统进行阳性条带的密度扫描，记录扫描值。根据扫描值计算mRNA指数(RI):RI=MUCS mRNART一PCR产物扫描值/p一actin mRNART一PCR产物扫描值RI代表组织中MUCS mRNA相对水平。浙江大学硕士学位论文二、结果 ‘矛 总RNA的提取 将提取的总RNA在紫外分光度仪260nm/2 80nm波长下测定吸光度(A)，各样品的A 260/A 280均为1.8以上。经RNA电泳，可见明显的185和285两条带，说明提取的RNA纯度符合要求并且没有降解。 RT一PCR Mucs基因扩增片段长度为239bP，在电泳图中可见扩增产物的条带位置落在25obp的Marker(分子量标记)条带稍前方，与预期目的片段大小相符，特异性高。鼻息肉组织术前用药组和对照组样本均有MUCS表达。作为内参照标准的p一actin(223bp)在两组样本表达恒定，见附图。附图鼻息肉组织中MUCS mRNA和p一actin mRNART一PCR电泳图A为MUCS;B为p一aetin。M为oNA分子量标记物;l~4为术前用药组病例标本，5~8为对照组病例标本。术前用药组病例鼻息肉组织MUCS mRNA指数平均为0.71士0.34;对照组病例鼻息肉组织RI值平均为1.12士0.26。前者较后者为低。两组间的差异经I检验，有统计学上的显着意义(P<0.01)，见附表。浙江大学硕士学位论文附表两组鼻息肉组织MUCS mRNA指数分组例数Rl值(又士50)术前用药组 对照组l7180 .71士0.341 .12士0.26叁、讨论和结论 粘蛋白是鼻腔和鼻窦粘膜分泌的粘液中的主要大分子成分，是高度糖基化的蛋白质，决定粘液的粘弹性。至今已确认13种人类粘蛋白基因，包括MUCI一4，MUCSAC，MUCSB，MUC6-9，MUCll一13。这些基因编码呼吸道、胃肠道及泌尿生殖道粘蛋白的核心蛋白。其中，Mue5AC、Mue5B和MUCS主要表达
吴曙辉, 万珍玲, 陈翔, 龚齐, 支纪治[2]2014年在《糖皮质激素对鼻息肉组织中黏蛋白MUC4基因表达的影响》文中进行了进一步梳理目的探讨糖皮质激素对鼻息肉组织中黏蛋白MUC4表达的影响。方法 2009年12月至2011年12月在我院行鼻内镜手术患者85例,随机分为两组,对照组43例,治疗组42例。对照组术前未予处理,治疗组术前2周予辅舒良。免疫组织化学SP法检测鼻息肉黏膜组织中MUC4蛋白的表达情况。结果对照组鼻息肉组织中MUC4的阳性表达率为37.2%,而治疗组MUC4的阳性表达率为7.1%,两组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 MUC4基因在鼻息肉组织中存在表达,糖皮质激素可下调黏蛋白MUC4基因表达,这可能是它抑制鼻息肉黏液过度分泌的途径之一。
马瑞颖[3]2010年在《上颌窦脊索癌的临床病理分析》文中研究表明鼻窦炎是鼻窦黏膜的一种炎症症状,因其常与鼻炎并发,故现广泛认为“鼻鼻窦炎”的名称更为合适。鼻鼻窦炎以包括鼻塞、嗅觉丧失、流涕及面部压迫感在内的临床常见症状为特征。其病因复杂,临床上的综合治疗是十分必要的。糠酸莫米松作为一种具有局部抗炎作用的糖皮质激素,最初用于治疗皮肤疾患和哮喘;而近年来,它的鼻喷剂型(内舒拿)被越来越多的用于变应性鼻炎。此药物具有对持续性哮喘疗效显着,且耐受性良好,可以在提高肺功能的同时减弱过敏源引起的速发性和迟发性哮喘反应,降低气道高反应性及过敏源引起的痰液嗜酸粒细胞增多。近来有研究显示,糠酸莫米松局部应用(糠酸莫米松鼻喷剂),可以提高粘膜纤毛系统的功能,同时影响局部及全身免疫,并能促进内镜术后气道粘膜的恢复。应用糖皮质激素时,不仅要看重它的效能,安全性也不应忽视。对于局部应用的糖皮质激素,局部的高抗炎作用应与低全身暴露相一致。因此,从局部到全身的延迟再分布和快速完全的肝脏代谢——且代谢产物无活性,是很有利的。对糠酸莫米松而言,已有相关报道称,它具有极低全身生物利用度,并对人糖皮质激素受体有极高亲和力。但同时,糠酸莫米松不良的全身副反应,如下丘脑-垂体-肾上腺轴抑制,也提上日程。无论如何,所有的研究结果都不能盖棺定论,尚需进一步研究。本文汇集多方论点进行综述,以期对进一步的临床工作有所助益。
李秀国[4]2005年在《叁种神经肽在复发性鼻息肉形成初期的表达及其意义》文中研究说明目的:探讨P物质(Substance P,SP)、降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)和血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)在复发性鼻息肉形成初期的表达及其意义。 方法:实验组鼻粘膜标本来源于因慢性鼻窦炎鼻息肉而行鼻内镜手术(nasal endoscopic surgery,NES)并且坚持门诊复诊(4～12周)的30例患者,根据其是否合并变应性疾病(变应性鼻炎、哮喘等)进一步分为变应组和非变应组,每组15例;对照组为9例近叁个月来鼻腔粘膜无急、慢性炎症,且无变应性鼻炎、哮喘等特异性病变的正常下鼻甲粘膜。采用放射免疫测定法(Radioimmunoassay,RIA)(定量分析)、免疫组织化学染色法(immunohistochemistry)(定性、半定量分析)比较SP、CGRP、VIP在实验组和对照组粘膜中的表达、分布和组织含量间的差异,并且讨论其意义。 结果: 1.放射免疫测定的结果表明,变应组SP、CGRP、VIP的组织含量(依次为2.27±1.14、5.62+0.30、8.68±1.83pg/mg)和非变应组SP、CGRP、VIP的组织含量(依次为2.47±1.48、6.55±2.78、8.18±2.29 pg/mg)均明显高于对照组(依次为1.04±0.38、2.95±1.03、5.51±0.74 pg/mg),并且差异具有显着性(p<0.05)。但是变应组和非变应组间的差异均无显着性(p>0.05)。 2.免疫组织化学染色显示复发性鼻息肉基底部的腺体细胞内存在大量阳性颗粒、扩张的血管和腺腔周围存在着色的神经纤维末梢和阳性细胞;SP、CGRP、VIP阳性物质的平均积分光密度在变应组(依次为2124.89±315.59、
参考文献：
[1]. 皮质类固醇激素对鼻息肉组织MUC8表达的影响[D]. 汪际云. 浙江大学. 2004
[2]. 糖皮质激素对鼻息肉组织中黏蛋白MUC4基因表达的影响[J]. 吴曙辉, 万珍玲, 陈翔, 龚齐, 支纪治. 中国医药指南. 2014
[3]. 上颌窦脊索癌的临床病理分析[D]. 马瑞颖. 河北医科大学. 2010
[4]. 叁种神经肽在复发性鼻息肉形成初期的表达及其意义[D]. 李秀国. 山东大学. 2005
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