导读:本文包含了苹果属小金海棠论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:小金,海棠,苹果,基因,转录,因子,砧木。
苹果属小金海棠论文文献综述
张兆源[1]（2019）在《苹果属小金海棠WRKY55与WRKY64基因的克隆与功能分析》一文中研究指出本研究以小金海棠(Malus xiaojinensis Cheng et Jiang)为试材,克隆得到MxWRKY55和MxWRKY64基因,通过序列分析、亚细胞定位分析、组织特异性表达分析和转基因拟南芥抗性鉴定等方法,初步研究了小金海棠MxWRKY55和MxWRKY64基因的功能。根据已知的金冠苹果部分序列设计特异性引物,以小金海棠cDNA为模板,通过PCR扩增得到小金海棠MxWRKY55和MxWRKY64基因。MxWRKY55基因和MxWRKY64基因的开放阅读框分别为984bp和1116 bp。亚细胞定位结果显示MxWRKY55和MxWRKY64蛋白均定位在细胞核中。半定量PCR结果显示,MxWRKY55和MxWRKY64基因的表达具有组织特异性:在正常Hoagland营养液培养时(0 h),MxWRKY55基因和MxWRKY64基因在所有检测部位中都表达,其中MxWRKY55基因在新叶和茎尖中的表达量较高,MxWRKY64基因只在新叶中的表达量较高。在盐胁迫(200 mM NaCl),低温胁迫(2℃),高铁胁迫(160μM Fe-EDTA)和低铁胁迫(4μM Fe-EDTA)下,MxWRKY55和MxWRKY64基因的表达量随处理时间的增加呈先上升后下降的趋势。荧光定量PCR的结果显示,在盐胁迫、低温胁迫、高铁胁迫和低铁胁迫下,MxWRKY55和MxWRKY64基因的表达量在24 h内呈先升后降的趋势:新根中MxWRKY55和MxWRKY64基因表达量达到峰值的时间分别为6 h/9 h、9 h/6 h、9 h/9 h、6 h/9 h,而新叶中MxWRKY55和MxWRKY64基因表达量达到峰值的时间则为9 h/12 h、6 h/3 h、12 h/12 h、12 h/12 h。分别构建了MxWRKY55和MxWRKY64过表达载体,并通过农杆菌侵染的方法转化拟南芥,得到MxWRKY55和MxWRKY64的过表达植株。分别对野生型拟南芥和转基因拟南芥进行2周的低铁胁迫、高铁胁迫和正常铁浓度的处理。低铁胁迫下,野生型拟南芥黄化严重,植株鲜重和主根长度下降明显,而MxWRKY55和MxWRKY64过表达植株仅少数叶片变黄,各项生理指标均显着优于野生型拟南芥。高铁胁迫下,野生型拟南芥叶片黄化甚至变紫,根系生长严重受阻,植株趋于死亡,而MxWRKY55和MxWRKY64过表达植株仅老叶颜色发生改变,大部分新叶仍呈绿色,且各项生理指标均明显优于野生型拟南芥。盐胁迫下,野生型拟南芥叶片黄化萎蔫,而MxWRKY55和MxWRKY64过表达植株的大部分叶片仍呈绿色,其各项测定指标均显着优于野生型拟南芥;停止处理7天后,MxWRKY55和MxWRKY64过表达植株的存活率远高于野生型植株。综上所述,过表达MxWRKY55和MxWRKY64基因能增强拟南芥对高铁胁迫、低铁胁迫和盐胁迫的耐受力。(本文来源于《东北农业大学》期刊2019-06-01）
柴丽静[2]（2019）在《苹果属小金海棠MxWRKY106基因的克隆与功能分析》一文中研究指出本研究以苹果铁高效砧木小金海棠(Malus xiaojinensis Cheng et Jiang)为试材,利用同源克隆的方法设计特异性引物,以克隆得到的WRKY转录因子为研究对象,提取小金海棠的RNA并将其逆转录为单链的cDNA,通过PCR扩增得到MxWRKY106基因。MxWRKY106基因开放阅读框长度为1059 bp,编码351个氨基酸,仅含有1个WRKY结构域,且锌指结构为C_2H_2型,说明其归属于WRKY家族的第Ⅱ类。利用软件MEGA 7构建MxWRKY106基因与其它物种里同源基因的系统进化树,显示MxWRKY106与苹果(Malus domestica)MdWRKY53的同源性最高。对其进行亚细胞定位后,结果显示MxWRKY106蛋白定位在细胞核中。半定量RT-PCR的结果表明,MxWRKY106基因在小金海棠不同部位中的表达具有组织特异性。在正常的Hoagland营养液培养时(0 h),MxWRKY106基因在所提取的器官中均有表达,并且在新叶和根中的表达量最大。在低温(2℃)、高盐(200 mM NaCl)、缺铁(4μM FeNa-EDTA)和铁过量(160μM FeNa-EDTA)处理下,MxWRKY106基因的表达量随处理时间的增加呈现先上升后下降的趋势。实时荧光定量PCR结果显示,在正常的Hoagland营养液培养条件下(0 h),MxWRKY106基因在不同部位的表达情况为:新叶中的表达量最高,根次之,老叶略高于韧皮。低温(2℃)、高盐(200 mM NaCl)、缺铁(4μM FeNa-EDTA)和铁过量(160μM FeNa-EDTA)处理下,在小金海棠的新叶中,MxWRKY106基因的表达量在处理后第1 h到第24 h呈现出先升高后降低的趋势,分别在低温处理3 h、高盐处理6 h、缺铁处理9 h和铁过量处理9 h时达到峰值。在小金海棠的根中,MxWRKY106基因的表达同样呈现先升后降的趋势,低温、高盐、缺铁和铁过量分别在9 h、3 h、6 h、6 h达到峰值。表达量的趋势与半定量RT-PCR的结果一致。利用农杆菌介导法将小金海棠MxWRKY106基因在拟南芥中过表达,筛选得到3个转基因株系,经盐处理7天后,野生型植株与转基因型相比表现出极为明显的黄化现象;经缺铁处理14天后,野生型拟南芥黄化矮小,根系较少,而转基因型植株生长发育正常仅少数叶片变黄;经铁过量处理14天后,野生型拟南芥叶片卷缩,叶色发紫,而转基因型植株仅老叶变黄,新叶生长正常。测定的与植物抗性相关的各项生理指标显示,在转MxWRKY106基因的拟南芥各株系中CAT、SOD、POD的活性以及脯氨酸含量较对照组均升高,MDA含量较未处理组变化不大,叶绿素含量下降,与对照组的差异显着。说明经高盐、缺铁和过量铁处理后转MxWRKY106基因拟南芥植株的受损程度减轻,对高盐、缺铁和铁过量胁迫的抗性增强。综上所述,过表达MxWRKY106基因可以增强拟南芥对高盐、缺铁和铁过量胁迫的耐受性。(本文来源于《东北农业大学》期刊2019-06-01）
孙春玉,王忆,孔瑾,许雪锋,李天忠[3]（2009）在《苹果属小金海棠MxIrt1基因特异性片段的原核表达及多克隆抗体的制备》一文中研究指出MxIrt1是从苹果属植物小金海棠中克隆出的二价阳离子转运膜蛋白基因。为进一步研究该基因的功能,利用MxIrt1基因位于第3和第4跨膜区之间的162bp片段,构建了原核表达载体pGEX-MxIrt1,经原核表达、亲和层析、获得GST-MxIRT1融合蛋白,以融合蛋白为抗原,制备多克隆抗体,ELISA方法检测抗体效价阳性,蛋白质印迹检测植物体内总蛋白,获得与预期大小一致的特异性条带。上述结果表明,表达的目的蛋白可用于免疫组织化学、蛋白质印迹检测。(本文来源于《园艺学报》期刊2009年10期）
曹冬梅,许雪峰,韩振海[4]（2006）在《苹果属小金海棠转录因子MxMYB1基因的克隆及其原核表达》一文中研究指出MxMYB1是苹果属小金海棠MYB类转录因子。MxMYB1含1个重复序列及MYB蛋白特有的氨基酸组成。酶切、PCR扩增及测序分析表明构建的原核表达载体结构正确,未出现碱基突变及移码现象。1mmol/LIPTG诱导2h后,在预期的蛋白分子量38kD处出现1条表达加强的蛋白条带,而未经诱导的转化子没有此蛋白条带。为进一步目的蛋白的纯化和鉴定提供试验基础。(本文来源于《园艺学报》期刊2006年04期）
沈杰[5]（2005）在《苹果属小金海棠转录因子MxMYB1基因功能的初步分析》一文中研究指出目前在模式植物上已克隆到许多与吸收利用铁相关的基因,大多数为功能基因,调控基因很少。MxMYB1是从小金海棠中利用探针筛库的方法克隆到的一个MYB类转录因子,MxMYB1基因全长1134bp,5’非翻译区116bp,3’非翻译区112bp,ORF含302个氨基酸,MxMYB1蛋白只含有一个MYB重复区。利用生物信息学方法在TAIR数据库中检索,找到Atlg70000基因与MxMYB1的同源性较高,氨基酸比对同源性达37%。通过构建35S::MxMYB1基因的超表达载体和其反义载体,以及分析Atlg70000的叁个T-DNA插入突变体(salk_143055,salk_045905,salk_025577)的表型来初步分析MxMYB1基因在植物体内的功能。 结果表明,salk_143055,salk_045905,salk_025577突变体在缺铁培养基上都出现了明显的黄化现象,表明Atlg70000基因对铁的吸收利用有一定的调控作用。转化35S::反义表达载体的拟南芥在缺铁条件下与野生型植株无明显差异,有可能是小金海棠的MxMYB1基因在拟南芥中没有将其同源基因抑制掉或抑制不完全,使得反义转化植株没有什么明显的表型。 综上所述,小金海棠MxMYB1在拟南芥中的同源基因Atlg70000对植物铁营养的吸收和利用具有一定的调控作用。Atlg70000基因的T-DNA插入突变可能导致植物吸收或利用铁的能力下降,出现黄化表型。初步分析得出MxMYB1及其同源的Atlg70000基因编码的产物可能是与植物铁吸收利用有关的调控蛋白。(本文来源于《中国农业大学》期刊2005-05-01）
曹冬梅,韩振海,许雪峰[6]（2004）在《苹果属小金海棠Fe(Ⅱ)转运蛋白基因的克隆和序列分析》一文中研究指出1986年,Romheld和Marschner首先提出高等植物在长期适应缺铁胁迫过程中逐渐形成的两种适应性机理[1]。在缺铁胁迫的条件下,机理Ⅰ植物通过激活一种特异的H+-ATPase而使土壤酸化[2],并通过一种特异的根部还原酶将Fe(Ⅲ)还原成Fe((本文来源于《农业生物技术学报》期刊2004年03期）
曹冬梅[7]（2003）在《苹果属小金海棠缺铁胁迫相关基因的克隆和表达分析》一文中研究指出苹果是我国栽培面积最大的经济树种，但缺铁黄叶病严重地限制了苹果的大规模生产和其经济产量。因而研究和克隆缺铁胁迫相关基因不仅为进一步研究苹果吸收、转运铁的分子机制提供基础。其次，在提高植物对铁胁迫抗性的遗传育种中，可以利用基因工程技术，将铁胁迫相关基因整合到作物染色体基因组中，从而达到有效控制铁营养的目的。 本试验以苹果属小金海棠(Malus xiaojinensis Cheng et Jiang)为试材，利用玉米Fe(Ⅱ)转运蛋白基因片段以及小麦金属反应元件结合蛋白TaMRE-BP cDNA为探针，筛选小金海棠缺铁根cDNA表达文库，目的在于克隆苹果铁高效基因型小金海棠的Fe(Ⅱ)转运蛋白基因以及与缺铁胁迫相关的结合蛋白基因。主要结果如下： 1、用标记的玉米Fe(Ⅱ)转运蛋白基因片段为探针，对约120000Pfu的文库进行筛选，经过叁轮筛选，最后获得4个单一的阳性克隆cDNA，分别命名为pTF1、pTF2、pTF3和pTF4。选其中两个有代表性的克隆进行测序分析。 2、根据测序的结果，将所得序列在GenBank中进行同源性比较，结果如下：pTF1长为494bp，pTF2长为763bp，分别编码88个和172个氨基酸，属于小金海棠Fe(Ⅱ)转运蛋白基因的两个不同长度的基因片段，是同一个基因。 3、Southern杂交分析表明：Fe(Ⅱ)转运蛋白基因在小金海棠基因组中可能是单拷贝；同时证明山定子和珠眉海棠基因组DNA中也存在类似基因。 4、Northern杂交分析结果表明：Fe(Ⅱ)转运蛋白基因在缺铁和正常供铁的小金海棠根系中均表达，且随缺铁处理表达量加强，特别是缺铁6天的根系RNA杂交信号最强，由此也可以推测，小金海棠Fe(Ⅱ)转运蛋白基因对缺铁胁迫响应。 5、用小麦金属反应元件TaMRE-BP cDNA作探针，筛选小金海棠缺铁根cDNA表达文库，通过对约120000Pfu的文库进行叁轮筛选，共获得10个阳性克隆。选其中片段较长的两个克隆进行5’端测序，结果表明：两个克隆所编码的蛋白均与拟南芥的一个MYB蛋白具有高度同源性，从中选择片段最长的一个克隆(定名为MxMyb1)进行全序列测定。 6、测序结果表明，MxMyb1全长1134bp，5’非翻译区116bp，3’非翻译区112bp，ORF含302个氨基酸，推测其分子量为33二KD，是一个具有完整阅读框的全长的MYB类转录因子基因。＊XM如1仅有一个＊＊B重复区：与拟南芥以响b蛋白的IR序列的同源性最高，达86。9％，与马铃薯 StMyb的 IR序列的同源性达 77．0％，所有这些 NnrB蛋白除了瓜区具有较高的同源性外，其 C端和 N端几乎没有同源性。MWYB蛋白的 C一端还含有一个富含脯氨酸区，这样的结构基序可能具有激活转录的功能。 7、虽然 MYB基因是一个转录因于大家族，但我们通过 Soutnern杂交验证：MxMyb基因在小金海棠基因组DNA中是单拷贝。实验中为了避免由于保守的MYB结构域而造成该基因和同类转录因于的杂交，所用探针仅用MxMybl基因C一端的特异性片段。 8、NOrthCm杂交结合RTpCR的方法对MxMybl基因在小金海棠中的表达模式进行了分析，结果如下：MxMyb在根系和叶片中均表达，缺铁处理可以加强MxMybl在根系中的表达，尤其是缺铁3天的根系表达量最强。 9、对转录因子 Mttiyb基因进行原核表达载体的构建及其蛋白的原核表达。构建的原核表达载体结构正确，未出现碱基突变及移码现象；lmmoffe IPTG诱导 Zh后，在预期的蛋白分子量约38kDa处出现一条表达加强的蛋白带。为进一步目的蛋白的纯化和鉴定提供试验基础。(本文来源于《中国农业大学》期刊2003-05-01）
李英慧,韩振海,许雪峰,鲁韧强,亓丽萍[8]（2002）在《苹果属小金海棠种的遗传一致性研究》一文中研究指出应用AFLP技术 ,用 8对引物对 2 0株小金海棠家植实生群体进行遗传一致性分析。结果表明 ,小金海棠实生群体内具有高度的遗传一致性 ,遗传相似系数为 98.92 % ;1.0 8%的遗传差异可能是由于有性杂交的基因重组导致差异片段出现所造成的。(本文来源于《园艺学报》期刊2002年06期）
周志钦,成明昊,宋洪元,李晓林,杨天秀[9]（2001）在《苹果属小金海棠的遗传多样性初步研究》一文中研究指出用RAPD技术建立了苹果属小金海棠 (Malusxiaojinensis) 2个自然分布区的 3个群体内随机选取的 30株树(10株 /每群体 )及其相应的子代实生苗共 6个群体、6 0个样本植株的分子标记。通过对 15个随机引物产生的 81条RAPD带的统计 ,计算了不同群体RAPD多态性带的数目。用TREECON软件分析了不同群体及所有个体间的遗传关系 ,并用AMOVA技术分析了物种的遗传变异。结果是 15个引物在全部分析个体中产生了 5 8条多态性带 ,平均每引物 3.8条。现有分布 3个群体及其相应的子代实生苗群体的平均多态性带的数目都为 1.5条左右。其中平均多态性带的数目最低的群体仅有 0 .7条 ,最高的群体也只有 2 .5条。遗传关系分析表明 ,2个自然分布区的不同群体间存在遗传分化现象。AMOVA分析显示小金海棠的遗传变异有相当一部分来源于群体间(本文来源于《生物多样性》期刊2001年02期）
成明昊,杨晓红,曾维光,施强[10]（1987）在《苹果属新种——小金海棠的研究》一文中研究指出中国是苹果属植物的主要起源中心,П.М.ЖУковский认为"苹果野生类型的基因中心在中国的中部和南部",其种类繁多,资源极其丰富。苹果属植物资源的研究,对苹果品种和砧木的育种具有极为重要的意义,为了开发和利用苹果砧木资源,我们对小金海棠(Malus xiaojinensis Cheng Ming-haoet Jiang Ning-gong)的生态分布进行了调查;观察了花粉形态;对无融合生殖特性、压条生根能力、嫁接亲和性及矮化效应等进行了试验研究,为苹果砧木的利用提供了依据。此项研究已获1986年农牧渔业部(本文来源于《农业科技通讯》期刊1987年09期）
苹果属小金海棠论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本研究以苹果铁高效砧木小金海棠(Malus xiaojinensis Cheng et Jiang)为试材,利用同源克隆的方法设计特异性引物,以克隆得到的WRKY转录因子为研究对象,提取小金海棠的RNA并将其逆转录为单链的cDNA,通过PCR扩增得到MxWRKY106基因。MxWRKY106基因开放阅读框长度为1059 bp,编码351个氨基酸,仅含有1个WRKY结构域,且锌指结构为C_2H_2型,说明其归属于WRKY家族的第Ⅱ类。利用软件MEGA 7构建MxWRKY106基因与其它物种里同源基因的系统进化树,显示MxWRKY106与苹果(Malus domestica)MdWRKY53的同源性最高。对其进行亚细胞定位后,结果显示MxWRKY106蛋白定位在细胞核中。半定量RT-PCR的结果表明,MxWRKY106基因在小金海棠不同部位中的表达具有组织特异性。在正常的Hoagland营养液培养时(0 h),MxWRKY106基因在所提取的器官中均有表达,并且在新叶和根中的表达量最大。在低温(2℃)、高盐(200 mM NaCl)、缺铁(4μM FeNa-EDTA)和铁过量(160μM FeNa-EDTA)处理下,MxWRKY106基因的表达量随处理时间的增加呈现先上升后下降的趋势。实时荧光定量PCR结果显示,在正常的Hoagland营养液培养条件下(0 h),MxWRKY106基因在不同部位的表达情况为:新叶中的表达量最高,根次之,老叶略高于韧皮。低温(2℃)、高盐(200 mM NaCl)、缺铁(4μM FeNa-EDTA)和铁过量(160μM FeNa-EDTA)处理下,在小金海棠的新叶中,MxWRKY106基因的表达量在处理后第1 h到第24 h呈现出先升高后降低的趋势,分别在低温处理3 h、高盐处理6 h、缺铁处理9 h和铁过量处理9 h时达到峰值。在小金海棠的根中,MxWRKY106基因的表达同样呈现先升后降的趋势,低温、高盐、缺铁和铁过量分别在9 h、3 h、6 h、6 h达到峰值。表达量的趋势与半定量RT-PCR的结果一致。利用农杆菌介导法将小金海棠MxWRKY106基因在拟南芥中过表达,筛选得到3个转基因株系,经盐处理7天后,野生型植株与转基因型相比表现出极为明显的黄化现象;经缺铁处理14天后,野生型拟南芥黄化矮小,根系较少,而转基因型植株生长发育正常仅少数叶片变黄;经铁过量处理14天后,野生型拟南芥叶片卷缩,叶色发紫,而转基因型植株仅老叶变黄,新叶生长正常。测定的与植物抗性相关的各项生理指标显示,在转MxWRKY106基因的拟南芥各株系中CAT、SOD、POD的活性以及脯氨酸含量较对照组均升高,MDA含量较未处理组变化不大,叶绿素含量下降,与对照组的差异显着。说明经高盐、缺铁和过量铁处理后转MxWRKY106基因拟南芥植株的受损程度减轻,对高盐、缺铁和铁过量胁迫的抗性增强。综上所述,过表达MxWRKY106基因可以增强拟南芥对高盐、缺铁和铁过量胁迫的耐受性。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
苹果属小金海棠论文参考文献
[1].张兆源.苹果属小金海棠WRKY55与WRKY64基因的克隆与功能分析[D].东北农业大学.2019
[2].柴丽静.苹果属小金海棠MxWRKY106基因的克隆与功能分析[D].东北农业大学.2019
[3].孙春玉,王忆,孔瑾,许雪锋,李天忠.苹果属小金海棠MxIrt1基因特异性片段的原核表达及多克隆抗体的制备[J].园艺学报.2009
[4].曹冬梅,许雪峰,韩振海.苹果属小金海棠转录因子MxMYB1基因的克隆及其原核表达[J].园艺学报.2006
[5].沈杰.苹果属小金海棠转录因子MxMYB1基因功能的初步分析[D].中国农业大学.2005
[6].曹冬梅,韩振海,许雪峰.苹果属小金海棠Fe(Ⅱ)转运蛋白基因的克隆和序列分析[J].农业生物技术学报.2004
[7].曹冬梅.苹果属小金海棠缺铁胁迫相关基因的克隆和表达分析[D].中国农业大学.2003
[8].李英慧,韩振海,许雪峰,鲁韧强,亓丽萍.苹果属小金海棠种的遗传一致性研究[J].园艺学报.2002
[9].周志钦,成明昊,宋洪元,李晓林,杨天秀.苹果属小金海棠的遗传多样性初步研究[J].生物多样性.2001
[10].成明昊,杨晓红,曾维光,施强.苹果属新种——小金海棠的研究[J].农业科技通讯.1987
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