头顶一颗珠水煎液对四氯化碳致急性肝损伤小鼠的保护作用
覃亚云（咸丰县甲马池镇中心卫生院杨洞分院湖北咸丰445605）
【中图分类号】R285.6【文献标识码】B【文章编号】1672-5085(2009)06-0214-02
【摘要】目的观察头顶一颗珠对四氯化碳(CCl4)诱导的小鼠急性肝损伤的影响。方法用头顶一颗珠水煎液(10ml/kg、20ml/kg、30ml/kg)连续给小鼠灌胃4周后，用腹腔注射CCl4致小鼠急性肝损伤模型，测定不同剂量的头顶一颗珠对肝损伤血清丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)活性、肝中超氧化物歧化酶(SOD)活性、肝中丙二醛(MDA)含量的影响。结果头顶一颗珠能明显降低CCl4致小鼠肝损伤血清ALT、AST值升高，降低肝组织匀浆中MDA的含量，增强SOD的活性。结论头顶一颗珠对CCl4致小鼠急性肝损伤具有一定的保护作用。
【关键词】头顶一颗珠四氯化碳肝损伤
ThetherapeuticeffectsofTrilliumTschnoskiiMaximonhepaticinjuryinducedbyCCl4amongmice
QINYa-yun
(TheCentralHosspitalofJiamachiHubeiXianfeng445605)
【Abstract】ObjectiveToinvestigatethetherapeuticeffectsofTrilliumTschnoskiiMaximonhepaticinjuryinducedbyCCl4amongmice.MethodsFirst,respectivelypouredTrilliumTschnoskiiMaxim(10、20、30ml/kg)intostomachofmicefor4weeks,then,theacutehepaticinjurymodelwaspreparedbyCCl4injectedintraperitoneally.ThetherapeuticeffectsofTrilliumTschnoskiiMaximonthemodelwereevaluatedbytheactivitydeterminationofserumalanineaminotransferase(ALTandAST)，superoxidedismutase(SOD)andthecontentofmalondialdehyde(MDA)inliver.ResultsTheactivitiesofALTandASTandtheMDAcontentinliverwassignificantlyincreasedandtheactivityofSODwaslargelyinhibitedintheanimalsofmodelinggroup.FollowingthetreatmentwithTrilliumTschnoskiiMaxim,ALTandASTactivitiesandMDAcontentweresignificantlyreducedandSODactivitywasobviouslyincreasedinthemiceoftreatinggroup.ConclusionTrilliumTschnoskiiMaximholdspotectiveeffectsontheacutehepaticinjuryinducedbyCCl4inmice.
【Keywords】TrilliumTschnoskiiMaxim;CCl4;hepaticinjury
头顶一颗株又称延龄草(TrilliumTschnoskiiMaxim)，为百合科延龄草属植物，以根入药，含有薯蓣皂甙、甾醇、甾酮等化学成分。主要分布在湖北神农架，恩施自治州、郧阳、四川中南部、甘肃东南部、云南北部山区亦有分布，多为野生。用于治疗眩晕头痛、高血压、神经衰弱、跌打损伤、腰腿痛、脑震荡后遗症等[1、2]。中医临床应用较广,且疗效显著。有很大的应用价值，但现代药效学研究报道较少，为此，我们探讨头顶一颗珠对四氯化碳(CCl4)诱导的小鼠急性肝损伤的影响。
1材料与方法
1.1动物
取健康昆明种小鼠50只，由同济医科大学实验动物中心提供，♀♂各半，体重(19.9±4.2)g。
1.2仪器与药品
TG328A型电子分析天平；GL-20G高速冷冻离心机，756MC型紫外可见分光光度计（上海分析仪器总厂）；谷丙转氨酶(ALT)临床诊断试剂盒、谷草转氨酶临床诊断(AST)试剂盒(赖氏法)、超氧化物歧化酶（SOD）测定试剂盒、丙二醛（MDA）测定试剂盒均为南京建成生物研究所产品；头顶一颗珠根状茎及根水煎液：取头顶一颗珠根状茎及根，用水煎煮3次，过滤后，浓缩成1g·ml-1的溶液，即得水煎液。
1.3实验方法
取50只明种小鼠，随机分成5组，每组10只，分别为正常对照组、四氯化碳损伤模型组、头顶一颗珠(高剂组30ml/kg、中剂组20ml/kg、低剂组10ml/kg)。各给药组每天灌胃给药1次，正
注射CCl4植物油溶液是目前国际上常用的肝炎模型。CCl4进入体内后，在肝脏内经肝细胞色素P450激活，生成活泼的三氯甲基自由基和氯自由基。这些自由基可与细胞内和细胞膜的大分子发生共价结合，使酶的功能丧失，细胞膜脂质过氧化，导致肝细胞损伤坏死，胞浆内转氨酶渗入血液，使血清中该酶的活性升高[3]。
CCl4通过肝脏代谢产生大量自由基，自由基诱发脂质过氧化，产生大量脂质过氧化物(LPO)，而LPO的终产物(MDA)是一种双功能基化合物，它可使含氨基的蛋白质、核酸、脑磷脂发生交联而丧失活性。因此，MDA含量的上升是肝脏受到损伤的一个重要标志；SOD是一种有效清除自由基的酶，从而起到解毒作用。所以，血清中SOD活力下降和MDA含量的升高在一定程度上表明了与CCl4损伤的关联性[4]。
许多研究表明:头顶一颗珠有增强记忆、抗炎及免疫调节作用[5、6]:头顶一颗珠有较强的抗炎作用，包括巴豆油和角叉菜胶引起的急性炎症及无菌棉球所致的亚急性炎症，能明显抑制[2，4]二硝基氯苯引起的小鼠迟发型超敏反应；头顶一颗珠能维持实验大鼠学习记忆能力，显著提高实验大鼠肝、肾、海马、脑皮质SOD，GSH-Px表达量，具有上调抗氧化酶表达、改善记忆抗衰老的作用。
本实验结果表明：头顶一颗珠水煎液能够明显降低CCl4致小鼠肝损伤ALT、AST增高，降低肝中MDA生成量，提高了SOD活力。表明头顶一颗珠水煎液对CCl4所致肝损伤具有一定的保护作用，其作用机理可能头顶一颗珠提高了肝细胞抗氧化能力，对抗Cl4引起的膜脂质过氧化，保护肝细胞膜结构及功能的完整，从而拮抗CCl4对肝细胞膜的损害作用，而更深入的机理探讨需进一步研究。湖北头顶一颗珠资源极为丰富，为珍贵的药用植物，产量较高，其经济价值不断有新的发现，有待于进一步研究开发。
参考文献
[1]刘金龙．头顶一颗珠地下根茎无性繁殖研究[J]．时珍国医国药，1998，9（6）：568-569.
[2]谢宗万，范崔生，朱兆仪，等．全国中草药汇编，第2版[M]．北京：人民卫生出版社，1996：225.
[3]NeilKaplowitz．Mechanismsoflivercellinjury[J]．JournalofHepatology，2000，32(suppl1):39-47.
[4]方伟，陈彦，孙玉军．茶多糖对四氯化碳致小鼠肝损伤的保护作用[J]．茶叶科学，2008，28（1）：67-71.
[5]艾明仙．头顶一颗株对大鼠学习记忆及抗氧化酶的影响[J]．时珍国医国药，2007，18（3）：624-625.
[6]肖本见，陈国栋，谭志鑫．头顶一棵珠抗炎和免疫作用的实验研究[J]．安徽医药，2005，9（4）：246-248.
常对照组及四氯化碳模型组给予同量的灭菌生理盐水，各组连续灌胃给药4周，于最末次给药后1h，除正常对照ip0.9％NaC120m1／kg外，其余各组均ip0.1％CCl4花生油溶液20m1/kg，染毒16h后，所有小鼠采用眼眶放血法采血，分离血清，测定ALT和AST的活性。取血后每只小鼠立即剖腹，取相同部位的1小块肝组织，用生理盐水制备成10％的肝匀浆，测定每克肝组织中MDA的含量和超氧化物歧化酶(SOD)的活力。
1.4统计学分析
用SPSS软件对实验数据进行t检验。结果以±s表示。
2结果
2.1头顶一颗珠对小鼠血清生化指标的影响
由表1可见，模型组血清中ALT、AST的含量明显高于正常组(P<0.01)，说明本次实验的小鼠急性肝损伤造模成功。头顶一颗珠能剂量依赖性降低小鼠血清ALT、AST水平。
表1头顶一颗珠对小鼠血清ALT和AST的影响（±s）
组别剂量（ml/kg·d）ALT（kU·L-1）AST（kU·L-1）
正常组-73.6±7.079.2±12.3
模型组-192.7±14.1209.3±20.7
头顶一颗珠水煎液低剂组10179.6±13.7*184.5±13.2**
头顶一颗珠水煎液中剂组20155.1±17.1**177.3±12.6**
头顶一颗珠水煎液高剂组30116.6±16.6**145.8±14.9**
注：与模型组比较*P<0.05，**P<0.01，