论文摘要
目的筛选适用于不同生长年限和不同部位的栽培远志实时荧光定量PCR分析（quantitative realtimePCR,qRT-PCR）的稳定内参基因,为远志体内各个基因表达分析提供合适内参基因。并对4个细胞色素P450单加氧酶（cytochromeP450monooxygenase,P450s）基因在上述远志样品中的差异表达进行分析,明确4个P450s基因在栽培远志中的时空表达分布。方法通过qRT-PCR获取Tubulin 1、Tubulin 2、Elongation 1、Elongation 2、Actin 1、Actin 2、GAPDH和cdc-42 8个候选内参基因在上述远志样品中的熔解曲线与Ct值;利用软件geNorm和Norm Finder对候选内参基因的表达稳定性进行评价;通过qRT-PCR分析4个P450s基因CYP709B2、CYP71AP39、CYP88A85、CYP714E38在上述远志样品中的相对表达情况。结果 geNorm分析结果表明,在远志（1～3年生）根、茎、叶、花中稳定表达的为Tubulin 2与Elongation 1;Norm Finder结果显示,Elongation1是最稳定的内参。CYP709B2、CYP71AP39基因在远志茎、叶（1～3年生）中的m RNA表达量最高,在根与花中的表达量则较少。而CYP88A85、CYP714E38基因则在远志根（1～3年生）中的m RNA表达水平较高。结论 Elongation 1适合作为栽培远志体内基因表达分析的内参基因。栽培远志中的P450s基因在远志根、茎、叶、花中的表达趋势不一致。
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文章来源
类型: 期刊论文
作者: 李娟,孔冉冉,梅月菊,张福生,田洪岭,秦雪梅,杜晨晖,马存根
关键词: 远志,实时荧光定量,内参基因,细胞色素单加氧酶,时空表达
来源: 中草药 2019年24期
年度: 2019
分类: 医药卫生科技,农业科技
专业: 农作物
单位: 山西药科职业学院药学系,山西大学中医药现代研究中心,山西大学化学化工学院,山西省农业科学院经济作物研究所,山西中医药大学
基金: 山西省重点研究开发计划(201603D3111003),国家中药标准化项目(ZYBZH-Y-JIN-34),地产中药功效物质研究与利用山西省重点实验室项目(201605D111004),山西省科技创新重点团队(201605D131045-18),山西省中药现代化振东专项-远志品种选育及配套适应性高产栽培技术研究(2016ZD0106)
分类号: S567.239
页码: 6084-6090
总页数: 7
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标签：远志论文; 实时荧光定量论文; 内参基因论文; 细胞色素单加氧酶论文; 时空表达论文;