导读:本文包含了结构蛋白基因克隆论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:蛋白,基因,结构,酪氨酸,白水,信息学,家蚕。
结构蛋白基因克隆论文文献综述
马瑶,何向东,夏忆,陈莹,字向东[1](2019)在《牦牛死亡结构域蛋白(FADD)基因克隆与生物信息学分析》一文中研究指出死亡结构域蛋白(FADD)是在生物细胞里起到信号转导作用的一种蛋白,在胚胎发育、细胞凋亡过程中发挥重要的生物学活性。实验以成年母牦牛的卵巢RNA为模板,利用RT-PCR技术克隆牦牛FADD基因,并进行了生物信息学分析。结果表明:牦牛FADD基因CDS区长度630 bp,编码209个氨基酸,蛋白分子式C996H1632N300O307S7,整个蛋白质带负电荷,总共原子数量3 242;分子质量23.0 ku,半衰期30 h;理论等电点6.11;消光系数18 240;不稳定指数49.08,属于不稳定蛋白;脂肪系数104.64,平均亲水系数-0.168,预测FADD蛋白为亲水蛋白。系统进化树表明,牦牛与哺乳动物亲缘关系近,与鱼亲缘关系最远,符合物种进化规律。FADD蛋白质的二级结构α螺旋、自由卷曲、β-转角和延伸链,占靶蛋白的比例分别为71.29%、22.97%、3.83%和1.91%,与叁级结构相符。牦牛FADD蛋白有13.0%位于细胞核、52.2%位于细胞质、8.7%位于细胞外、13.0%位于线粒体、4.3%位于高尔基体和8.7%位于细胞骨架。该研究成功克隆出牦牛FADD基因CDS区,为进一步研究其功能提供了一定理论依据。(本文来源于《中国草食动物科学》期刊2019年06期)
何华伟,王叶菁,宋凯,王姣,位曙光[2](2017)在《家蚕蛋白酪氨酸磷酸酶基因克隆、表达纯化与结构分析》一文中研究指出蛋白酪氨酸磷酸酶(Protein tyrosine phosphatase,PTP,EC 3.1.3.48)特异性地催化去除磷酸化修饰的酪氨酸残基上的磷酸基团,导致蛋白去磷酸化,从而调控了细胞生长、增殖、分化和免疫等生命活动。家蚕Bombyx mori蛋白酪氨酸磷酸酶h(BmPTP-h)参与了核型多角体病毒(Nucleopolyhedrovirus,NPV)在家蚕体内的复制过程,但目前对于BmPTP-h结构和性质的了解并不多。本文从家蚕中肠克隆了BmPTP-h基因编码序列,分析了BmPTP-h的基因组结构、mRNA结构、序列特征、二级结构和溶液中的状态。同源氨基酸序列比对分析表明BmPTP-h与多种昆虫NPV的PTP序列具有高相似度,暗示了它们可能具有共同的起源和相似的功能。文中构建了原核表达载体,通过大肠杆菌在25℃下表达获得了可溶性的重组BmPTP-h,利用Ni-NTA亲和层析纯化了BmPTP-h。凝胶过滤分析显示BmPTP-h在溶液中可以形成聚集体和单体。圆二色光谱分析显示重组的BmPTP-h包含α螺旋结构,升高温度导致BmPTP-h的α螺旋结构去折叠,α螺旋结构含量下降。这些研究为深入研究BmPTP-h的结构和调控机理提供了基础。(本文来源于《生物工程学报》期刊2017年11期)
唐霞[3](2017)在《Rab3A与突触结合蛋白Ⅰ-C2A结构域的基因克隆、表达和互作机制研究》一文中研究指出神经递质释放的调节涉及多种蛋白质及蛋白质之间的相互作用,因此,主要通过研究蛋白质间相互作用的分子机制来揭示神经递质释放过程。尽管许多蛋白都参与调节神经递质的释放,但有研究证实Rab3蛋白和突触结合蛋白在调节中起关键作用。虽然人们对Rab3A和突触结合蛋白的研究已经取得了一定进展,但到目前为止,关于它们的相互关系和如何协同调控实现突触囊泡的胞吐作用的分子机制一直没有研究清楚。突触结合蛋白Ⅰ是突触结合蛋白家族中含量最丰富的亚型,在突触囊泡膜融合和胞吐过程中起着Ca2+感受器的作用。突触结合蛋白Ⅰ通过C2结构域与其他分子相互作用从而调节细胞活动和神经递质释放过程。Rab3A属于小G蛋白超家族中Rab家族中的一种亚型蛋白,位于大脑神经元细胞的突触小泡上,由220个氨基酸组成,对神经递质释放和膜转运过程起着关键作用。我们的前期研究证明,Rab3A在没有Ca2+存在时能与突触结合蛋白Ⅰ的C2A和C2B结构域结合。C2B结构域中的KKKK模体是与Rab3A结合的关键位点,Rab3A可能和t-SNARE复合体中的syntaxin竞争性与C2B结合,从而调节Ca2+依赖型的神经递质释放,但Rab3A与C2A结构域相互作用的分子机制尚不清楚。为了寻找到突触结合蛋白Ⅰ中的C2A结构域与Rab3A相互作用的功能位点和调控机制。在本研究中,通过分子克隆技术将突触结合蛋白Ⅰ C2A结构域及其两个截短突变体C2A(143-206)、C2A(207-244)和叁个双点突变体 C2A(R199Q/K200Q)、C2A((R233Q/K236Q)、C2A(M173Q/F234Q)分别构建在表达载体pGEX4T-1上,得到带GST标签的融合蛋白,另将Rab3A构建到pET28a载体上,获得His标签的融合蛋白。通过GST pull down实验,结果显示截短突变体C2A(143-206)与 C2A(207-244)相比,C2A(143-206)结合 Rab3A 能力较强,表明Rab3A与C2A的结合位点可能位于C2A的N端。进一步实验结果证明,突变体C2A(R199Q/K200Q)和野生型C2A相比,其与Rab3A相互作用明显减弱,而突变体C2A(R233Q/K236Q)和C2A(M173Q/F234Q)与Rab3A结合能力不变。综合分析,Rab3A与C2A相互作用的关键结合位点位于C2A结构域突环2中的R199K200,该位点与已知的大多数其他功能位点不相重迭。例如,C2A结构域中钙离子结合位点是由天冬氨酸残基簇决定的;YVK模体是突触结合蛋白Ⅰ与突触融合蛋白及磷脂相互作用的关键位点;疏水性氨基酸M173/F234是C2A定位在细胞膜表面的关键位点。我们推测,突触结合蛋白Ⅰ-C2A结构域和Rab3A的互作并不完全基于静电作用,有报道C2A结构域中第199位是C2A与磷脂结合的关键位点。Rab3A可能通过影响C2A与磷脂的结合从而调控C2A介导的突触囊泡膜融合过程。本论文为阐明Rab3与突触结合蛋白的相互作用及其调节神经递质释放的分子机制积累了新的实验数据。(本文来源于《湖南师范大学》期刊2017-05-01)
孙艳[4](2016)在《小尾寒羊叁个慢型骨骼肌肌钙蛋白的基因克隆、结构特征及组织表达分析》一文中研究指出慢型骨骼肌肌钙蛋白基因主要包括肌钙蛋白C 1基因(Troponin C type 1,TNNC1)、肌钙蛋白I 1基因(Troponin I type 1,TNNI1)和肌钙蛋白T 1基因(Troponin T type 1,TNNT1),它们对骨骼肌的收缩、骨骼肌肌肉纤维特性及多种疾病的发生有密切关系。目前,有关绵羊的TNNC1、TNNI1和TNNT1基因的全长核酸序列未见报道。本试验采用RT-PCR、RACE、生物信息学分析、荧光定量PCR等技术方法,克隆了小尾寒羊TNNC1、TNNI1和TNNT1基因的全长序列,预测分析了其对应蛋白的序列和特性,构建了其在小尾寒羊和杜泊羊多种组织的表达谱,从分子水平上探索了小尾寒羊叁个基因的主要结构和表达特性。主要结果如下:(1)克隆测序得到了小尾寒羊TNNC1、TNNI1和TNNT1基因的cDNA序列,其中TNNI1包含两个5′端有区别的序列,并分别命名为TNNI1a和TNNI1b。得到的TNNC1、TNNI1a和TNNT1基因的全长cDNA序列及TNNI1b基因的部分cDNA序列已提交至GenBank,并分别获得登录号为KR153938、KT218688、KT218689及KT218690。相应的编码氨基酸长度分别为161、187、194和263个氨基酸。(2)cTnC蛋白为偏酸性蛋白,且结构比较稳定,亲水性比较好,流动性比较大;ssTnI蛋白两种亚型均为偏碱性蛋白,且结构相对不稳定,亲水性比较好;ssTnT蛋白为偏酸性蛋白,流动性一般,结构不是很稳定,但亲水性比较好,流动性比较大。cTnC、ssTnI和ssTnT蛋白均没有跨膜结构域,含有多个磷酸化位点,无任何N-糖基化位点,预测为非分泌性蛋白质。二级结构主要以α-螺旋和无规则卷曲为主。(3)多物种氨基酸序列比对结果显示:cTnC蛋白的氨基酸序列在本试验分析的物种中高度保守。ssTnI两亚型蛋白和ssTnT蛋白的氨基酸序列均与试验中其它哺乳动物的保守性比较高,而与试验中其它的非哺乳动物的保守性相对较差。系统进化树结果显示:绵羊的cTnC蛋白最先与野猪、家牛和山羊聚到一类;绵羊的ssTnI蛋白最先与山羊和家牛聚到一类;绵羊的ssTnT蛋白最先与野猪和家牛聚到一类。上述结果表明小尾寒羊中的cTnC、ssTn I和ssTnT蛋白均与试验中的其它哺乳动物的关系比较近。(4)TNNC1、TNNI1和TNNT1基因在小尾寒羊和杜泊羊的多种组织中的表达情况不同,然而,这几个基因的表达模式却存在一定的共性。TNNC1、TNNI1和TNNT1基因均在肋间肌、股二头肌和背最长肌中高表达,且其表达量均为肋间肌>股二头肌>背最长肌。小尾寒羊和杜泊羊中TNNI1a基因在每个组织中的表达量都高于TNNI1b基因在各组织中的表达量。此外,TNNC1、TNNI1和TNNT1基因在小尾寒羊和杜泊羊两品种羊中的表达量也存在明显的区别。特别的,TNNI1a在小尾寒羊肋间肌中的表达量显着高于其在杜泊羊中的表达量(p<0.05)。叁个基因对应的蛋白均在背最长肌、肋间肌、股二头肌中存在表达,此外,在两品种羊的心肌中,cTnC蛋白也存在表达,而ssTn I和ssTnT蛋白则不存在表达。综上所述,本试验成功克隆了小尾寒羊的TNNC1、TNNI1和TNNT1基因,并对其展开了较为系统的研究。从分子水平探索上述基因的特性及功能,为后续基因功能的研究和分子育种提供基本的理论依据。(本文来源于《山东农业大学》期刊2016-04-28)
辛可行,廖芳蕾,陈文荣,郭卫东[5](2015)在《NtGNL2基因克隆及蛋白结构分析》一文中研究指出ARF-GEFs家族基因是近年来极性生长研究的热点。该家族有多个亚家族,而在植物中以GBF亚家族为典型代表。NtGNL2(Nicotiana tabacum GNOM-Like2)是通过同源克隆,并结合3'Race技术在烟草中克隆获得的GBF家族成员,在植物上报道的GBF家族成员并不多,然而,该亚家族成员的蛋白序列及功能都高度保守。为了验证新获得的Nt GNL2基因的保守性,通过同源比对和系统发生关系分析了NtGNL2与其他多个植物GBF家族成员的亲缘关系;同时对NtGNL2基因各个保守结构域进行了蛋白序列的分析。结果表明,NtGNL2与其他植物GBF成员高度保守。(本文来源于《山西农业科学》期刊2015年09期)
毛福英,赵云生,万德光,陈新,邹玲[6](2015)在《基于基因克隆的远志鲨烯环氧酶(SE)蛋白结构及进化分析》一文中研究指出目的基于基因克隆对远志鲨烯环氧酶(SE)进行蛋白结构及进化分析。方法克隆远志鲨烯环氧酶基因(SE)DNA片段,将已克隆SE基因翻译成氨基酸序列,进行蛋白结构及进化分析。结果已克隆远志鲨烯环氧酶基因DNA片段长517bp,具有170个氨基酸,有叁个特征位点:Protein kinase C phosphorylation site、N-myristoylation site与Tyrosine kinase phosphorylation site,远志SE基因与Medicago sativa和Medicago truncatula的SE基因亲缘关系较为接近。结论已克隆远志SE基因DNA片段能够推测远志鲨烯环氧酶部分特征位点,可以进行远志SE蛋白进化分析。(本文来源于《时珍国医国药》期刊2015年07期)
尹立伟,杨春成,朱玉,伦志明,张静[7](2015)在《紫孢侧耳Ps-mnp1基因克隆与蛋白结构预测》一文中研究指出克隆紫孢侧耳PS1菌株锰过氧化物酶基因Ps-mnp1,具有生物降解木质素的活性,可用于分析锰过氧化物酶的蛋白功能与结构,并对深入了解紫孢侧耳Ps-mnp1基因功能和转录调控具有重要意义。基于ITS序列分析,明确了该菌株的分类地位。根据Gen Bank中白腐菌Mn Ps保守序列设计引物,采用染色体步移法和逆转录PCR法获得Ps-mnp1基因,Gen Bank登录号为(KP189358.1)。在克隆Ps-mnp1基因并分析蛋白结构时,采用多种现代生物信息学技术,经染色体步移法克隆的DNA全长序列后,利用contigexpress拼接软件预测Psmnp1基因的c DNA全长序列;使用Bio Edit分析软件对DNA和c DNA核苷酸序列比对;通过Augustus网站预测RNA的剪接位点并在NCBI上进行同源序列比对校正;采用基因结构软件对比了解白腐菌Mn Ps基因的内含子/外显子的组成。序列分析表明Ps-mnp1的DNA全长序列1 854 bp,具有外显子14条和内含子13条。从Ps-mnp1与其它白腐菌Mn Ps基因的内含子/外显子组成分析来看,紫孢侧耳和糙皮侧耳同属于侧耳属,但它们之间的Mn Ps基因结构完全不同。Ps-mnp1开放阅读框为1 095 bp,起始密码子ATG,终止密码子TAA,编码364 aa,含有20 aa残基构成的信号肽序列。采用MEGA 5.1软件构建的蛋白系统进化树表明Ps-mnp1与6株白腐菌蛋白聚类在短枝Mn Ps,区分了含有5个二硫键组成的长枝Mn Ps组群;此外,构建的蛋白同源模型表明,与刺芹侧耳多功能过氧化物酶相似度为72.51%,蛋白配体中结合位点有1个含铁血红素、2个钙离子、1个锰离子等,这些结合位点为不守恒。该研究为紫孢侧耳锰过氧化物酶的结构,蛋白功能Ps-mnp1奠定了基础,并进一步为Ps-mnp1的蛋白质工程改造提供借鉴作用。(本文来源于《广西植物》期刊2015年03期)
耿鹏,周倩,安利佳,OLLE,Terenius,李文利[8](2014)在《柞蚕传染性软腐病病毒(Iflavirus)功能蛋白的基因克隆和结构分析》一文中研究指出从患柞蚕吐白水软化病的病蚕体内分离到一株传染性软腐病病毒属(Iflavirus)病毒。研究柞蚕传染性软腐病病毒基因组结构及主要功能蛋白的结构域,为确定该病毒株的分类学地位和阐释其侵染机制提供基础信息。克隆了编码柞蚕传染性软腐病病毒功能蛋白的RNA解旋酶基因(423 bp)、3C半胱氨酸蛋白酶基因(405 bp)以及RNA依赖性的RNA聚合酶基因(882 bp)。通过同源模建方法,构建了柞蚕传染性软腐病病毒3个功能蛋白的叁维结构模型,并采用拉氏图和Profile 3D等方法验证了模型的可靠性。将柞蚕传染性软腐病病毒中RNA依赖性的RNA聚合酶序列与另外16个小RNA病毒同源序列进行比对并构建系统发育树,显示柞蚕传染性软腐病病毒与蜜蜂残翅病病毒和蜜蜂瓦螨虫病毒的亲缘关系十分相近。(本文来源于《蚕业科学》期刊2014年05期)
汪菊,韩珊,理永霞,邓勋,张星耀[9](2014)在《松材线虫类甜蛋白(TLP-1)基因克隆及蛋白质结构预测》一文中研究指出【目的】对松材线虫类甜蛋白(TLP-1)结构进行分析,进一步为其功能研究奠定基础。【方法】通过对松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)类甜蛋白(TLP-1)设计特异性引物,运用RT-PCR技术克隆该基因全长cDNA序列。运用相关生物学软件进行分析及叁维结构构建。【结果】该基因全长为441bp,编码146个氨基酸。NCBI比对发现该基因属于TLP超基因家族。PROCHECK分析显示蛋白结构建合理。【结论】该蛋白不论从序列分析以及蛋白构建结果显示,相对于动物源类甜蛋白,其与植物更为相似。(本文来源于《四川农业大学学报》期刊2014年03期)
杨晓[10](2014)在《牙鲆(Paralichthys olivaceus)冷诱导RNA结合蛋白(CIRP)基因克隆、表达分析及3D结构预测》一文中研究指出冷诱导RNA结合蛋白(Cold-inducible RNA-binding protein,CIRP)是富含甘氨酸(Gly)的RNA结合蛋白家族成员之一,是一类重要的mRNA分子伴侣蛋白。冷诱导RNA结合蛋白是第一个从哺乳动物中分离得到的冷休克蛋白。该蛋白在冷休克或冷诱导过程中对细胞具有重要的生理作用。自从冷诱导RNA结合蛋白基因在哺乳动物中被克隆得到以后,学者们在哺乳动物和两栖类中对其进行了广泛的研究。随着研究的深入,研究结果表明该蛋白在许多生理过程中起重要作用。例如,冷诱导RNA结合蛋白对两栖类的冬眠、生物节律性周期的维持以及正常胚胎发育均具有重要作用。目前,关于冷诱导RNA结合蛋白对鱼类正常条件下的生理及胁迫条件下的相关作用研究相对较少。对鲤鱼生长相关EST-SSRs标记的分析及大菱鲆性别相关基因研究分别发现冷诱导RNA结合蛋白与生长和性别相关。因此,本研究中对牙鲆冷诱导RNA结合蛋白基因进行克隆和表达分析,并初步探索其表达调控机制及其发挥功能的机制。本研究中,首先通过同源克隆和RACE技术克隆得到牙鲆CIRP基因cDNA全长序列。该基因cDNA全长1596bp,其中ORF长597bp,编码的蛋白由198个氨基酸残基组成。预测发现该蛋白序列N端包含RRM结构域,C端富含甘氨酸(Gly)并且存在Arg-Gly-Gly(RGG)重复序列。通过PCR扩增得到了牙鲆CIRP基因全长序列。通过分析可知,该基因包含7个外显子和6个内含子,并且所有的内含子均符合GT-AG规则。利用染色体步移法克隆得到了4K长的该基因的5'侧翼序列,并在启动子区域鉴定出了许多转录因子结合位点。除了HSF、SRY等转录因子结合位点外,在外显子1区域附近预测到一个CpGs位点。通过对不同性别个体、不同组织该区域DNA甲基化水平研究发现该区域甲基化水平较低。通过荧光实时定量PCR分析发现CIRP基因在牙鲆成体各个组织中广泛表达,并且在卵巢中表达量最高,在其他组织中表达水平较低。对牙鲆不同发育时期胚胎的定量PCR分析发现,在牙鲆卵细胞中CIRP基因具有表达且表达的mRNA是母源性的。同时研究发现该基因的表达在囊胚期和神经胚期间上调并且达到峰值后逐渐下降。为了获得冷诱导RNA结合蛋白与mRNA相互作用的信息,对牙鲆CIRP蛋白的3D模型结构进行了预测。预测结果显示在该蛋白分子表面具有一个裂缝结构。这暗示了其与mRNA分子的作用机制。为了进一步研究该蛋白与mRNA的研究机制而构建了表达载体,为进一步得到该蛋白奠定基础。总之,本研究的结果显示在牙鲆中CIRP是一个多功能的蛋白分子,而且对其叁维结构的预测为理解蛋白功能实现的机制提供了非常重要的信息。(本文来源于《中国海洋大学》期刊2014-05-30)
结构蛋白基因克隆论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
蛋白酪氨酸磷酸酶(Protein tyrosine phosphatase,PTP,EC 3.1.3.48)特异性地催化去除磷酸化修饰的酪氨酸残基上的磷酸基团,导致蛋白去磷酸化,从而调控了细胞生长、增殖、分化和免疫等生命活动。家蚕Bombyx mori蛋白酪氨酸磷酸酶h(BmPTP-h)参与了核型多角体病毒(Nucleopolyhedrovirus,NPV)在家蚕体内的复制过程,但目前对于BmPTP-h结构和性质的了解并不多。本文从家蚕中肠克隆了BmPTP-h基因编码序列,分析了BmPTP-h的基因组结构、mRNA结构、序列特征、二级结构和溶液中的状态。同源氨基酸序列比对分析表明BmPTP-h与多种昆虫NPV的PTP序列具有高相似度,暗示了它们可能具有共同的起源和相似的功能。文中构建了原核表达载体,通过大肠杆菌在25℃下表达获得了可溶性的重组BmPTP-h,利用Ni-NTA亲和层析纯化了BmPTP-h。凝胶过滤分析显示BmPTP-h在溶液中可以形成聚集体和单体。圆二色光谱分析显示重组的BmPTP-h包含α螺旋结构,升高温度导致BmPTP-h的α螺旋结构去折叠,α螺旋结构含量下降。这些研究为深入研究BmPTP-h的结构和调控机理提供了基础。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
结构蛋白基因克隆论文参考文献
[1].马瑶,何向东,夏忆,陈莹,字向东.牦牛死亡结构域蛋白(FADD)基因克隆与生物信息学分析[J].中国草食动物科学.2019
[2].何华伟,王叶菁,宋凯,王姣,位曙光.家蚕蛋白酪氨酸磷酸酶基因克隆、表达纯化与结构分析[J].生物工程学报.2017
[3].唐霞.Rab3A与突触结合蛋白Ⅰ-C2A结构域的基因克隆、表达和互作机制研究[D].湖南师范大学.2017
[4].孙艳.小尾寒羊叁个慢型骨骼肌肌钙蛋白的基因克隆、结构特征及组织表达分析[D].山东农业大学.2016
[5].辛可行,廖芳蕾,陈文荣,郭卫东.NtGNL2基因克隆及蛋白结构分析[J].山西农业科学.2015
[6].毛福英,赵云生,万德光,陈新,邹玲.基于基因克隆的远志鲨烯环氧酶(SE)蛋白结构及进化分析[J].时珍国医国药.2015
[7].尹立伟,杨春成,朱玉,伦志明,张静.紫孢侧耳Ps-mnp1基因克隆与蛋白结构预测[J].广西植物.2015
[8].耿鹏,周倩,安利佳,OLLE,Terenius,李文利.柞蚕传染性软腐病病毒(Iflavirus)功能蛋白的基因克隆和结构分析[J].蚕业科学.2014
[9].汪菊,韩珊,理永霞,邓勋,张星耀.松材线虫类甜蛋白(TLP-1)基因克隆及蛋白质结构预测[J].四川农业大学学报.2014
[10].杨晓.牙鲆(Paralichthysolivaceus)冷诱导RNA结合蛋白(CIRP)基因克隆、表达分析及3D结构预测[D].中国海洋大学.2014