赵成日[1]2004年在《应用AFLP标记构建珲春桃×正满早生遗传连锁图谱》文中研究指明本研究应用优化后的AFLP标记技术，利用32个F_1代群体，构建了珲春桃×正满早生遗传连锁图谱。其主要结论如下： 桃AFLP技术体系的建立。完全酶切体系：25μl反应体积中，含500ng桃DNA、5U EcoR Ⅰ和5U Mse Ⅰ限制性内切酶、2.5μl 10×One-Plus All Buffer、37℃酶切3～12h：连接接头体系：50μl反应体积中，含25μl完全酶切产物、2.5μl 10×Buffer、30ng EcoR Ⅰ和30ng Mse Ⅰ adapter、1～3U T_4 DNA ligase，37℃连接3h；预扩增体系：50μl反应体积中，含5μl稀释10倍的连接接头产物、5μl 10×PCR buffer、1.75mM MgCl_2、0.25mM dNTP、30ng E+1和30ngM+1 Primer、1U Taq DNA聚合酶，94℃预变性5min后，94℃ 30s、56℃ 1min、72℃ 1min的PCR条件30个循环；选择性扩增体系：20μl反应体积中，含5μl稀释10倍的预扩增产物、2μl 10×PCR buffer、1.5mM MgCl_2、0.2mM dNTP、15ng E+3 Primer和30ng M+3 Primer、0.4U Taq DNA聚合酶，94℃预变性5min后，94℃ 30s、65℃ 1min(-0.7℃／Cycles)、72℃ 1min的PCR条件13个循环，接着在94℃ 30s、56℃ 30s、72℃ 1min的PCR条件33个循环。 本研究中选用扩增带型清晰、多态性丰富的16对引物组合，在两亲本及其F_1群体中共扩增出750条带，平均每对引物产生46.88条带：多态性带共扩增出172条，平均每对引物产生10.75条多态性带。平均每对引物组合多态性位点检出率为22.94％。 AFLP标记在珲春桃×正满早生杂种F_1代分离方式主要有叁种：①孟德尔分离方式。占总标记位点的11.07％，占多态性分离位点的48.26％；②偏分离方式。占总标记位点的11.87％，占多态性分离位点的51.74％；③异常分离。占总标记位点的3.86％。因此，用此群体构建珲春桃饱和遗传图谱是可行的。 应用AFLP标记构建珲春桃×正满早生遗传连锁图谱。共有12个连锁群，包含28个偏分离标记利38个孟德尔分离标记，长度358.17cM，标记间平均距离5.43cM。其中最长的连锁群包括13个偏分离标记和20个孟德尔分离标记，86.48cM长，标记间平均距离是2.62cM；最短的连锁群只有2个孟德尔分离标记，6.26cM长，标记间平均距离是3.13cM。连锁群中标记间最大的遗传距离是28.46cM，最小的遗传距离是0.01cM。
王成, 曹后男, 赵成日, 赵凯, 庄得凤[2]2006年在《AFLP标记在珲春桃×正满早生杂种F_1的分离方式》文中进行了进一步梳理以珲春桃、正满早生及其F1为试材,利用16对引物组合对AFLP标记的多态性和分离方式进行分析.结果表明:AFLP标记在F1呈3种分离方式:孟德尔分离、偏离孟德尔分离、异常分离.3种分离位点出现的频率和数量分别为:11.07%、83,11.87%、89,3.86%、29.本试验对偏离孟德尔分离比例和异常分离的AFLP标记进行了分析,为该群体是否适合构建遗传连锁图谱进行评价及进一步利用该群体提供理论依据.
宗成文[3]2003年在《RAPD标记在桃属种质资源分类及抗寒桃育种中的应用研究》文中认为本研究以珲春桃、山桃等42个桃属种质资源及珲春桃为母本的F_1代杂种群体为试材，应用RAPD技术，对桃属种质资源进行分类，探讨了珲春桃在桃属中的分类地位，初步探讨了RAPD标记在抗寒桃育种中应用的可行性。主要研究结果如下： 采用经优化的反应体系，用筛选的20个引物扩增得到的RAPD指纹图谱可将42个桃品种(种)全部区分开，并且找到了其中部分品种(种)的特征标记，可用于对这些桃品种(种)的识别和鉴定。 用UPGMA法对42个样品进行聚类，以遗传距离0.14为接合线，将供试所有类型划分为四类：山桃单独聚为一类；珲春桃及其杂种延农一号聚为一类；第叁类包括新疆油桃，晚红蜜和昌黎雪桃；其余共36个品种类型聚为一类。在遗传距离0.10处可将水蜜桃、黄肉桃、油桃区分开，认为RAPD标记可用于分析桃品种间亲缘关系。 根据聚类结果和遗传距离，并结合前人研究结果，认为珲春桃不是桃×山桃后代，而应为普通桃的一个变种[Prunus persica(L.)var.Hunchuntao]。 RAPD标记在珲春桃×有明杂种F_1的分离方式可分为3类：孟德尔分离、偏离孟德尔分离和异常分离，以孟德尔分离为主。在符合1：1和3：1分离的RAPD标记中，珲春桃特有标记和有明特有标记分别可用于构建两亲本的遗传连锁图谱，双亲共有标记可用于构建双亲的遗传连锁图，并可用于判断双亲间的同源连锁群。 利用筛选的两个引物，在珲春桃×正满早生F_1杂种抗寒基因池比不抗寒基因池多扩增出叁个RAPD标记。
参考文献：
[1]. 应用AFLP标记构建珲春桃×正满早生遗传连锁图谱[D]. 赵成日. 延边大学. 2004
[2]. AFLP标记在珲春桃×正满早生杂种F_1的分离方式[J]. 王成, 曹后男, 赵成日, 赵凯, 庄得凤. 延边大学农学学报. 2006
[3]. RAPD标记在桃属种质资源分类及抗寒桃育种中的应用研究[D]. 宗成文. 延边大学. 2003