猪链球菌微滴数字PCR定量检测方法的建立

论文摘要

根据猪链球菌（Streptococcus suis,SS）gdh基因的保守序列设计特异性引物和Taq Man探针,通过反应条件优化和特异性、敏感性、重复性试验以及临床样品的检测,建立可对其准确定量的微滴数字PCR（droplet digital PCR,dd PCR）检测方法,并与实时荧光定量PCR（Quantitative real-time PCR,qPCR）检测方法进行比较分析。结果表明,该方法特异性良好,与猪传染性胸膜肺炎放线杆菌、副猪嗜血杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、猪圆环病毒2型和伪狂犬病毒无交叉反应;灵敏度优于qPCR,线性相关系数（R2）为0.991,呈良好线性关系,最低可检测到2.692 copies/μL的阳性质粒;稳定性好,变异系数为1.66%。临床样品定量检测结果表明,dd PCR具有敏感性高、特异性好等优点,能对qPCR检测的可疑样品进行精确定量。本研究建立的dd PCR能够准确定量检测SS,将为SS相关研究提供有益参考。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 石磊,温雯,陈洵,叶蕾,常彦磊,李丽丽

关键词: 猪链球菌,微滴数字,检测方法

来源: 现代食品科技 2019年01期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑,基础科学,农业科技

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 暨南大学食品安全与营养研究院

基金: 国家重点研发计划项目(2016YFD0500600),广东省科技计划项目(2017B020207004),中央高校基本科研业务费项目(2017MS104,21618309)

分类号: S852.611

DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2019.1.033

页码: 233-238

总页数: 6

文件大小: 1589K

下载量: 220

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