论文摘要
试验旨在研究肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae）外膜蛋白OmpK17基因序列特征及其免疫原性。参照GenBank中肺炎克雷伯菌外膜蛋白OmpK17基因序列（登录号:U52843.1）设计1对特异性引物,应用PCR技术扩增获得了肺炎克雷伯菌榆中分离株（YZ株）OmpK17基因CDS序列,应用相关软件及程序对OmpK17基因核苷酸序列及其推导的氨基酸序列进行生物信息学分析,构建其原核表达载体pET-OmpK17,并在大肠杆菌BL21（DE3）中进行了表达。表达产物纯化后免疫新西兰兔制备多抗血清,应用ELISA和Western blotting分析了重组蛋白的免疫原性。结果显示,肺炎克雷伯菌YZ株外膜蛋白OmpK17基因高度保守,其CDS序列全长513 bp,编码170个氨基酸,与GenBank中其他肺炎克雷伯菌OmpK17基因序列同源性均高于99.6%;OmpK17蛋白分子质量约为18.5 ku,具有较强的亲水性,含有1个信号肽、1个跨膜区和6个抗原决定簇区域,是一种具有桶状三维结构的跨膜蛋白。SDS-PAGE结果显示,OmpK17基因在大肠杆菌中获得表达且表达产物主要以包涵体形式存在。ELISA及Western blotting结果表明,肺炎克雷伯菌OmpK17蛋白具有良好的免疫原性。本研究克隆和表达了肺炎克雷伯菌OmpK17基因及其编码蛋白,并证实该蛋白具有良好的免疫原性,为OmpK17基因的生物学特性研究和肺炎克雷伯菌检测方法的建立奠定了基础,为肺炎克雷伯菌基因工程疫苗的研发提供了理论依据。
论文目录
文章来源
类型: 期刊论文
作者: 程家海,殷娟斌,白珊泽,田泽暘,庞红红,包世俊
关键词: 肺炎克雷伯菌,基因,克隆,生物信息学,原核表达,免疫原性
来源: 中国畜牧兽医 2019年05期
年度: 2019
分类: 农业科技,基础科学
专业: 生物学,畜牧与动物医学
单位: 甘肃农业大学动物医学院
基金: 甘肃农业大学省级大学生创新创业训练计划(201710733016),国家自然科学基金(31360620)
分类号: S852.61
DOI: 10.16431/j.cnki.1671-7236.2019.05.024
页码: 1456-1465
总页数: 10
文件大小: 1237K
下载量: 209
相关论文文献
- [1].高毒力肺炎克雷伯菌血清型、毒力基因分布及分子标志物探索[J]. 微生物与感染 2019(06)
- [2].人肠道来源样品中肺炎克雷伯菌的分离及特征研究[J]. 贵州医科大学学报 2019(12)
- [3].呼吸系统感染高毒力肺炎克雷伯菌的分子基因特点[J]. 中华医院感染学杂志 2020(01)
- [4].高毒力肺炎克雷伯菌耐药情况和分子特征研究[J]. 临床医学工程 2020(04)
- [5].肺炎克雷伯菌肝脓肿侵袭性综合征10例临床分析[J]. 临床急诊杂志 2020(06)
- [6].重症患者耐碳氢酶烯肺炎克雷伯菌感染的临床特征及预后分析[J]. 中国社区医师 2020(16)
- [7].猪源性肺炎克雷伯菌的分离鉴定[J]. 当代畜牧 2020(02)
- [8].2016—2019年我院肺炎克雷伯菌感染的流行病学及临床特征分析[J]. 临床医学研究与实践 2020(23)
- [9].肺炎克雷伯菌毒力因子的研究进展[J]. 现代实用医学 2020(08)
- [10].高毒力肺炎克雷伯菌致病机制中铁载体毒力基因的作用[J]. 华西医学 2020(08)
- [11].沧州地区猪源肺炎克雷伯菌分离菌株、耐药性及耐药基因检测[J]. 中国兽医杂志 2020(04)
- [12].3例高毒力肺炎克雷伯菌致肝脓肿侵袭综合征患者抗感染治疗的药学服务实践[J]. 中南药学 2020(10)
- [13].呼吸机相关性肺炎死亡与高黏液表型肺炎克雷伯菌感染相关性巢式病例对照研究[J]. 西北国防医学杂志 2019(01)
- [14].猪源肺炎克雷伯菌的分离鉴定及生物学分析[J]. 河南科技学院学报(自然科学版) 2018(03)
- [15].肺炎克雷伯菌的分布与耐药率研究[J]. 实用医技杂志 2018(07)
- [16].2011～2015年某院肺炎克雷伯菌的分布特点及耐药性分析[J]. 国际检验医学杂志 2016(23)
- [17].耐亚胺培南肺炎克雷伯菌耐药基因的检测分析[J]. 临床检验杂志(电子版) 2017(01)
- [18].替加环素治疗耐药肺炎克雷伯菌肺部感染的疗效评价[J]. 北方药学 2016(05)
- [19].双黄连逆转肺炎克雷伯菌耐药的体内效果初探[J]. 赣南医学院学报 2016(02)
- [20].泉州市儿童肺炎克雷伯菌与成人肺炎克雷伯菌的耐药性变迁分析[J]. 河北医学 2015(02)
- [21].儿童肺炎克雷伯菌感染情况调查及耐药分析[J]. 临床儿科杂志 2015(01)
- [22].老年人肺炎克雷伯菌分离株氨基糖苷类修饰酶基因研究[J]. 河北医科大学学报 2010(02)
- [23].黄芩素对肺炎克雷伯菌生长及生物膜形成能力影响的研究[J]. 检验医学与临床 2013(20)
- [24].不同人群肠道肺炎克雷伯菌毒力及耐药情况分析[J]. 临床合理用药杂志 2020(15)
- [25].高毒力肺炎克雷伯菌的毒力因子和耐药机制研究进展[J]. 华夏医学 2020(02)
- [26].1697株肺炎克雷伯菌的分布情况及耐药现状分析[J]. 中国药物与临床 2019(06)
- [27].肺炎克雷伯菌的临床特征及耐药性研究[J]. 实用临床医药杂志 2019(07)
- [28].肺炎克雷伯菌的分布及耐药性分析[J]. 中国卫生检验杂志 2019(06)
- [29].2016—2018年蚌埠市第一人民医院肺炎克雷伯菌的分布及耐药性分析[J]. 现代药物与临床 2019(06)
- [30].包头市肺炎克雷伯菌耐药情况分析[J]. 心理月刊 2019(12)