导读:本文包含了小鼠细胞期受精卵论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:受精卵,小鼠,激酶,蛋白,有丝分裂,因子,腺苷酸。
小鼠细胞期受精卵论文文献综述
李森,王洋,郑晓娇,刘玲玲,冯晨[1]（2018）在《肌醇多磷酸5磷酸酶PIPP在小鼠受精卵内对细胞周期蛋白Cdc2的影响》一文中研究指出目的研究脯氨酸丰富的肌醇多磷酸5磷酸酶(PIPP)在小鼠1-细胞期胚胎中的定位以及它对Cdc2在Tyr15位点磷酸化的调节作用。方法提取质粒、酶切鉴定并转染PEFBOS PIPP质粒以及空载体PEFBOS vector到小鼠受精卵,用免疫荧光染色检测PIPP的定位,Western blot检测PIPP对Cdc2在Tyr15位点磷酸化的影响。结果PIPP的定位在小鼠受精卵有丝分裂过程中不断变化,并且PIPP在小鼠受精卵中的过度表达增加了Cdc2在Tyr15位点的磷酸化。结论 PIPP存在于小鼠受精卵中并通过调节Cdc2的磷酸化参与小鼠受精卵的有丝分裂过程。(本文来源于《解剖科学进展》期刊2018年04期）
任丽莉,刘超,刘乙蒙,张苎兮,肖建英[2]（2017）在《双丁酰环腺苷酸通过蛋白激酶Wee1B调控小鼠1-细胞期受精卵的发育研究》一文中研究指出目的 探讨蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)激活剂双丁酰环腺苷酸(dual dibutyryl cyclic AMP,dbc AMP)调控蛋白激酶Wee1B蛋白对小鼠1-细胞期受精卵发育的影响,为进一步研究母源性因子Wee1B在早期胚胎发育过程中的作用提供理论基础。方法将2 mmol/L dbc AMP作用于小鼠1-细胞期受精卵1 h,并显微注射Wee1Bm RNAs,实验分为未注射组、TE缓冲液注射组、Wee1B-WT/KD注射组、Wee1B-S15A/D注射组,继续在M16培养基中培养。相差显微镜下观察小鼠受精卵的形态变化和卵裂情况,放射自显影测定各期细胞有丝分裂促进因子(MPF)活性,Western blotting方法检测Wee1B蛋白的表达、CDC2-p Tyr15和Wee1B-p Ser15的磷酸化水平。结果小鼠受精卵在有dbc AMP存在时,G_1、S、G_2和M各细胞周期均检测到磷酸化的Wee1B表达,非磷酸化条带在G_2期和M期才能检测到;各组受精卵卵裂出现时间延迟,卵裂率显着降低;h CG注射后35 h内,MPF活性一直处于低水平,CDC2-p Tyr15磷酸化状态和MPF活性变化趋势相一致。结论dbc AMP激活PKA后,PKA磷酸化Wee1B蛋白的S15位点,Wee1B活性增加,阻滞受精卵分裂,本研究提示Wee1B蛋白的S15位点可能是PKA作用的生理靶点,可以更好地认识早期胚胎发育的分子事件。(本文来源于《中国现代医生》期刊2017年22期）
张苎兮,刘超,任丽莉,刘乙蒙,齐川[3]（2016）在《蛋白激酶A抑制剂H-89通过Wee1B蛋白调控小鼠1-细胞期受精卵发育》一文中研究指出目的:探讨蛋白激酶A(PKA)抑制剂H 89通过调控小鼠蛋白激酶Wee1B蛋白S15位点磷酸化状态影响小鼠1-细胞期受精卵的发育。方法:超排卵方法获得小鼠1-细胞期受精卵,经H-89预处理后显微注射Wee1B-mRNAs,相差显微镜观察受精卵的形态变化、计数卵裂率;放射自显影测定M期促进因子(MPF)活性;免疫印迹检测Wee1B蛋白表达、CDC2pTyr15和Wee1B-pSer15磷酸化及Wee1B-pSer15非磷酸化状态。结果:H-89持续存在时,在受精卵G_1和S期检测到Wee1B-Ser15的磷酸化条带,在G2期和M期检测到Wee1B-Ser15的非磷酸化条带;小鼠受精卵有丝分裂进程加快,但过表达Wee1B-WT和过表达突变体Wee1B-S15A/D均能延缓受精卵有丝分裂进程,逆转由H-89引起的促进分裂作用。结论:H-89抑制PKA活性,从而抑制Wee1B蛋白S15位点的磷酸化状态,但过表达Wee1B-S15A/D有效逆转H-89加速的G_2/M期转换,使受精卵的分裂延迟。提示Wee1B蛋白的S15位点可能是PKA作用的生理靶点。(本文来源于《解剖学杂志》期刊2016年02期）
刘超,任丽莉,刘乙蒙,孟智超,肖建英[4]（2015）在《从人卵巢cDNA文库中筛选与蛋白激酶Wee2互作蛋白及在小鼠1-细胞期受精卵中的功能验证》一文中研究指出【目的】筛选与蛋白激酶Wee2相互作用的候选分子,证实该蛋白与Wee2的相互作用及作用机制,并进一步探讨其对小鼠受精卵早期发育的影响,本研究对揭示小鼠受精卵早期发育的分子机制和生殖机理具有十分重要的意义,为优化人类辅助生殖提供理论和实验依据。【方法】构建p GBKT7-Wee2诱饵质粒并转入酵母感受态细胞中检测其对酵母的毒性、自激活能力以及表达情况,再将含有p GBKT7-Wee1B的酵母感受态细胞与人卵巢c DNA文库相融合,利用酵母双杂交系统筛选出阳性克隆,提取阳性克隆的酵母质粒转化大肠杆菌后进行测序鉴定。经酵母重新转化验证后,在哺乳动物细胞中使用免疫共沉淀、GST-pull down和免疫荧光共定位的方法确定候选分子与Wee2蛋白激酶的相互作用。【结果】以小鼠Wee2编码基因的pc DNA3.1/V5-His-TOPO-Wee2-WT野生型质粒为模板,设计特异性引物构建出p GBKT7-Wee2诱饵质粒;诱饵质粒p GBKT7-Wee2对酵母感受态细胞无毒性,无自激活能力,通过western blot验证其在酵母感受态细胞中表达;酵母双杂交系统从人卵巢c DNA文库中筛选出了9个与Wee2蛋白激酶存在相互作用的蛋白;免疫共沉淀证实蛋白激酶Wee2与KHDRBS3蛋白在NIH3T3细胞中存在相互作用;GST-pull down证实Wee2与KHDRBS3在体外存在相互作用;免疫荧光共定位确定蛋白激酶Wee2与KHDRBS3蛋白在小鼠受精卵中共定位。【结论】成功构建p GBKT7-Wee2质粒,并以此为诱饵,利用酵母双杂交系统从人卵巢c DNA文库筛选出KHDRBS3蛋白;免疫共沉淀证实KHDRBS3与Wee2存在相互作用,且二者在小鼠1-细胞期受精卵中共定位。以上提示KHDRBS3蛋白可能通过调控Wee2的蛋白激酶活性和定位进而参与小鼠受精卵的早期发育。(本文来源于《第五届泛环渤海生物化学与分子生物学会学术交流会论文集》期刊2015-08-19）
马浚仁,刘超,孟智超,刘乙蒙,孙静[5]（2015）在《WEE1B和CDC25B蛋白核浆转位调控小鼠1-细胞期受精卵有丝分裂进程》一文中研究指出目的通过观察内外源性蛋白激酶WEE1B和蛋白磷酸酶CDC25B在小鼠1-细胞期受精卵中不同细胞时期的定位,为深入研究WEE1B和CDC25B的核浆转位机制奠定基础。方法对小鼠超排卵获得各期受精卵后,免疫荧光观察各期受精卵内源性WEE1B和CDC25B蛋白定位;将p EGFP-CDC25B-WT和p Ds RED2-N1-WEE1B-RFP融合质粒显微注入G1期受精卵中,观察各组小鼠1-细胞期受精卵中外源性WEE1B和CDC25B蛋白亚细胞定位。结果在小鼠1-细胞期受精卵G2/M期转换过程中,WEE1B向细胞浆转位和CDC25B向细胞核转位。结论 WEE1B和CDC25B在小鼠受精卵G2/M转换过程中存在核浆转位的动态平衡,本研究对阐明WEE1B和CDC25B调控小鼠1-细胞期受精卵有丝分裂过程和生殖机理具有十分重要意义。(本文来源于《现代预防医学》期刊2015年11期）
刘超,孟智超,任丽莉,刘乙蒙,郭淼[6]（2015）在《蛋白激酶Pkmyt1对小鼠1-细胞期受精卵发育的抑制作用》一文中研究指出目的:通过在小鼠1-细胞期受精卵内过表达Pkmyt1-wild type(WT)(野生型)mRNAs,研究蛋白激酶Pkmyt1对小鼠受精卵早期发育的影响,为进一步阐明Pkmyt1对哺乳动物受精卵早期发育调控的机制奠定基础。方法:构建pcDNA3.1/myc-Pkmyt1-WT质粒。超排卵方法获得小鼠1-细胞期受精卵,实验分为未注射组、TE缓冲液注射组和Pkmyt1-WT mRNAs注射组,收集各组卵细胞后采用Western blotting法检测Pkmyt1蛋白表达和Cdc2-pTyr15磷酸化状态;相差显微镜观察受精卵的形态变化并计数卵裂率。结果:pcDNA3.1/myc-Pkmyt1-WT质粒构建成功。与未注射组(0.414±0.016)和TE缓冲液注射组(0.441±0.013)比较,受精卵显微注射Pkmyt1-WT mRNAs 4h后,Pkmyt1蛋白表达水平(1.112±0.025)增高(P<0.01)。与未注射组(60.81%±3.27%)和TE缓冲液注射组(61.79%±4.08%)比较,Pkmyt1-WT-mRNA注射组卵裂率(34.2%±3.25%)显着降低(P<0.01)。Pkmyt1-WT mRNA注射组在注射hCG后29.0h检测到微弱的磷酸化信号,29.5h检测不到任何磷酸化信号。结论:Pkmyt1过表达后磷酸化Cdc2-pTyr15可抑制小鼠1-细胞期受精卵的卵裂率,提示Pkmyt1负调控小鼠受精卵有丝分裂的进程。(本文来源于《吉林大学学报(医学版)》期刊2015年01期）
任丽莉,刘超,刘乙蒙,孟智超,孙静[7]（2014）在《下调蛋白激酶Wee1B表达对小鼠1-细胞期受精卵有丝分裂的促进作用》一文中研究指出目的:利用特异性发夹结构Wee1BshRNA,探讨蛋白激酶Wee1B对小鼠受精卵早期发育的影响。方法:超排卵方法获得小鼠1-细胞期受精卵并显微注射质粒,实验分为未注射组、TE缓冲液注射组、Control shRNA注射组和Wee1BshRNA注射组,收集各组卵细胞后用RT-PCR和Western blotting方法检测Wee1B shRNA的干涉效能;荧光显微镜观察受精卵的形态变化、计数卵裂率;放射自显影测定Wee1B活性。结果:与TE缓冲液和Control shRNA注射组比较,Wee1BshRNA注射组小鼠1-细胞期受精卵Wee1BmRNA水平和蛋白表达显着降低;与其他3组比较,Wee1BshRNA注射组Wee1B的激酶活性明显降低;未注射组、TE缓冲液注射组和Control shRNA注射组在hCG注射33h后1-细胞期受精卵的卵裂率分别为71.91%±1.74%、72.90%±2.25%和72.28%±2.06%,3组间比较差异无统计学意义(P>0.05);而Wee1BshRNA注射组的卵裂率提高18.00%,为90.00%±0.77%,与其他3组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:Wee1B表达沉默可提高小鼠1-细胞期受精卵的卵裂率,说明Wee1B负调控小鼠受精卵有丝分裂的进程。(本文来源于《吉林大学学报(医学版)》期刊2014年01期）
刘超,肖建英,任丽莉,于秉治[8]（2014）在《Wee1B蛋白S15位点突变抑制小鼠1-细胞期受精卵的发育》一文中研究指出为研究小鼠Wee1B蛋白S15位点磷酸化状态对小鼠1-细胞期受精卵发育的影响,构建pcDNA3.1/V5-His-TOPO-Wee1B-S15A(Ser突变成Ala)/D(Ser突变成Asp)突变体,体外转录成mRNAs.对小鼠进行超排卵后当晚与雄鼠1∶1合笼,第2 d早取受精卵后培养至S期,显微注射Wee1B-WT(野生型)/KD(激酶失活型)-mRNAs和突变体Wee1B-S15A/D-mRNAs,观察其对受精卵发育、有丝分裂促进因子(MPF)活性及CDC2-pTyr15磷酸化状态的影响.结果表明,过表达Wee1B-WT和Wee1B-S15A/D可有效抑制受精卵有丝分裂进程,明显降低卵裂率.过表达模拟磷酸化的突变明显抑制MPF的活性,CDC2-pTyr15磷酸化状态和MPF活性变化相一致.因此,在小鼠1-细胞期受精卵有丝分裂过程中,PKA对小鼠Wee1B蛋白S15位点的磷酸化修饰是控制受精卵G2/M转换的重要方式.(本文来源于《中国生物化学与分子生物学报》期刊2014年01期）
刘超,肖建英,任丽莉,刘洋,马浚仁[9]（2013）在《蛋白激酶Wee1B在小鼠1-细胞期受精卵中的表达及其定位》一文中研究指出目的:检测小鼠1-细胞期受精卵各个细胞周期中蛋白激酶Wee1B的表达水平及其定位水平,初步阐明Wee1B对哺乳动物受精卵早期发育调控的机制。方法:超排卵获得小鼠1-细胞期受精卵,收集卵细胞后用RT-PCR和Western blotting方法检测Wee1B的mRNA和蛋白表达水平;放射自显影测定Wee1B活性;间接免疫荧光观察Wee1B在各个细胞时期的定位。结果:小鼠1-细胞期受精卵G1、S、G2和M期Wee1BmRNA相对表达量比较差异均无统计学意义(P>0.05);S、G2和M期Wee1B蛋白表达量与G1期比较差异有统计学意义(P<0.01);与G1期比较,S、G2期Wee1B活性逐渐增高(P>0.05,P<0.01),M期Wee1B活性迅速下降(P<0.01)。G1期和S期细胞Wee1B蛋白偶联的红色荧光信号主要集中分布于细胞核,但在G2期细胞红色荧光信号弥散分布于细胞浆,在M末期和2-细胞期可见红色荧光信号又重新分布于细胞核,细胞浆内荧光减弱。结论:蛋白激酶Wee1B在小鼠1-细胞期受精卵各个细胞周期动态表达,Wee1B蛋白存在核浆转位,Wee1B的定位变化可能调控小鼠受精卵有丝分裂。(本文来源于《吉林大学学报(医学版)》期刊2013年05期）
刘超,任丽莉,孟智超,刘乙蒙,肖建英[10]（2013）在《蛋白激酶WEE2负调控小鼠1-细胞期受精卵的发育》一文中研究指出目的:通过对昆明系小鼠1-细胞期受精卵各个细胞周期(G_1期、S期、G_2期和M期)中蛋白激酶WEE2的表达、活性及其定位进行初步分析,并过表达和降低WEE2,观察小鼠1-细胞期受精卵的卵裂,为进一步研究WEE2对哺乳动物受精卵早期发育调控的机制奠定基础。材料和方法超排卵获得小鼠1-细胞期受精卵,收集卵细胞后用RT-PCR和Western blotting方法检测WEE2蛋白的mRNA和蛋白表达水平;放射自显影测定WEE2激酶活性;间接免疫荧光观察WEE2在各个细胞时期的定位变化。并分别显微注射TE缓冲液、scramble shRNA或Wee2 shRNA,收集卵细胞后用RT-PCR和Western blotting方法检测Wee2shRNA的干涉效能;计数卵裂率;放射自显影测定WEE2活性。过表达Wee2-WT(野生型)/KD(激酶失活型)后观察受精卵卵裂情况、MPF活性和Cdc2-Tyr15的磷酸化状态。结果和分析:RT-PCR结果显示WEE2在受精后各个时期都有表达,各组间无显着性差异(P>0.05);Western blotting结果显示,G_1期Wee1B蛋白开始表达,到S期表达增加,一直到G_2期均为高表达,到M期蛋白表达减少,且与G_1期相比有显着性差异(P<0.01);以组蛋白[typeⅢ-S]为底物,激酶活性测定结果显示:WEE2的活性是随着细胞周期的进程而变化的,在G_1期其活性保持平稳,当进入S期和G_2期后WEE2的活性逐渐增高,随后在M期活性迅速下降。间接免疫荧光实验结果显示:G_1期和S期细胞WEE2蛋白偶联的红色荧光信号主要集中分布于细胞核;但在G_2期细胞红色荧光信号弥散分布于细胞浆;在M末期到2-细胞期可见红色荧光信号又重新分布于细胞核,细胞浆内荧光减弱。过表达Wee2-WT可有效抑制小鼠受精卵有丝分裂进程,明显降低卵裂率。Wee2-KD注射组受精卵能有效激活MPF活性。与此相对应,下调WEE2引发部分有丝分裂的启动。结论蛋白激酶WEE2在小鼠1-细胞期受精卵各个细胞周期动态表达,WEE2蛋白存在核浆转位,WEE2的定位变化可能负调控小鼠1-细胞期受精卵的有丝分裂进程。(本文来源于《第八届全国医学生物化学与分子生物学第五届全国临床应用生物化学与分子生物学2013华东六省一市生物化学与分子生物学联合学术研讨会论文汇编》期刊2013-08-19）
小鼠细胞期受精卵论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的 探讨蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)激活剂双丁酰环腺苷酸(dual dibutyryl cyclic AMP,dbc AMP)调控蛋白激酶Wee1B蛋白对小鼠1-细胞期受精卵发育的影响,为进一步研究母源性因子Wee1B在早期胚胎发育过程中的作用提供理论基础。方法将2 mmol/L dbc AMP作用于小鼠1-细胞期受精卵1 h,并显微注射Wee1Bm RNAs,实验分为未注射组、TE缓冲液注射组、Wee1B-WT/KD注射组、Wee1B-S15A/D注射组,继续在M16培养基中培养。相差显微镜下观察小鼠受精卵的形态变化和卵裂情况,放射自显影测定各期细胞有丝分裂促进因子(MPF)活性,Western blotting方法检测Wee1B蛋白的表达、CDC2-p Tyr15和Wee1B-p Ser15的磷酸化水平。结果小鼠受精卵在有dbc AMP存在时,G_1、S、G_2和M各细胞周期均检测到磷酸化的Wee1B表达,非磷酸化条带在G_2期和M期才能检测到;各组受精卵卵裂出现时间延迟,卵裂率显着降低;h CG注射后35 h内,MPF活性一直处于低水平,CDC2-p Tyr15磷酸化状态和MPF活性变化趋势相一致。结论dbc AMP激活PKA后,PKA磷酸化Wee1B蛋白的S15位点,Wee1B活性增加,阻滞受精卵分裂,本研究提示Wee1B蛋白的S15位点可能是PKA作用的生理靶点,可以更好地认识早期胚胎发育的分子事件。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
小鼠细胞期受精卵论文参考文献
[1].李森,王洋,郑晓娇,刘玲玲,冯晨.肌醇多磷酸5磷酸酶PIPP在小鼠受精卵内对细胞周期蛋白Cdc2的影响[J].解剖科学进展.2018
[2].任丽莉,刘超,刘乙蒙,张苎兮,肖建英.双丁酰环腺苷酸通过蛋白激酶Wee1B调控小鼠1-细胞期受精卵的发育研究[J].中国现代医生.2017
[3].张苎兮,刘超,任丽莉,刘乙蒙,齐川.蛋白激酶A抑制剂H-89通过Wee1B蛋白调控小鼠1-细胞期受精卵发育[J].解剖学杂志.2016
[4].刘超,任丽莉,刘乙蒙,孟智超,肖建英.从人卵巢cDNA文库中筛选与蛋白激酶Wee2互作蛋白及在小鼠1-细胞期受精卵中的功能验证[C].第五届泛环渤海生物化学与分子生物学会学术交流会论文集.2015
[5].马浚仁,刘超,孟智超,刘乙蒙,孙静.WEE1B和CDC25B蛋白核浆转位调控小鼠1-细胞期受精卵有丝分裂进程[J].现代预防医学.2015
[6].刘超,孟智超,任丽莉,刘乙蒙,郭淼.蛋白激酶Pkmyt1对小鼠1-细胞期受精卵发育的抑制作用[J].吉林大学学报(医学版).2015
[7].任丽莉,刘超,刘乙蒙,孟智超,孙静.下调蛋白激酶Wee1B表达对小鼠1-细胞期受精卵有丝分裂的促进作用[J].吉林大学学报(医学版).2014
[8].刘超,肖建英,任丽莉,于秉治.Wee1B蛋白S15位点突变抑制小鼠1-细胞期受精卵的发育[J].中国生物化学与分子生物学报.2014
[9].刘超,肖建英,任丽莉,刘洋,马浚仁.蛋白激酶Wee1B在小鼠1-细胞期受精卵中的表达及其定位[J].吉林大学学报(医学版).2013
[10].刘超,任丽莉,孟智超,刘乙蒙,肖建英.蛋白激酶WEE2负调控小鼠1-细胞期受精卵的发育[C].第八届全国医学生物化学与分子生物学第五届全国临床应用生物化学与分子生物学2013华东六省一市生物化学与分子生物学联合学术研讨会论文汇编.2013
论文知识图
