中国水仙LAR基因启动子的克隆及功能初步分析

论文摘要

为了解NtLAR基因的表达调控机制,该研究以中国水仙（Narcissus tazetta var.chinensis）‘金盏银台’ DNA为模版,采用染色体步移法克隆了NtLAR基因起始密码子ATG上游启动子片段序列,测序结果显示,该克隆片段共995 bp（GenBank登录号:MH371155）。通过PlantCare数据库对获得的启动子序列顺式作用元件预测发现,NtLAR启动子序列中包含有大量顺式作用元件,如光反应元件ACE、G-box、GATA-motif、GT1-motif,激素响应元件CGTCA-motif、ABRE、TGACG-motif、TGA-element,胁迫响应元件和MYB结合位点MBS等。成功构建了植物表达载体pBI121-pNtLAR∷GUS和pGreenII 0800-pNtLAR-Luc。pBI121-pNtLAR∷GUS在烟草叶片的瞬时表达结果显示,克隆的启动子片段具有活性;pBI121-pNtLAR∷GUS在水仙不同组织器官的瞬时表达实验发现,NtLAR基因的表达具有组织特异型,其在鳞茎盘的表达量较高,在花瓣和副冠中的表达量较低;将pBI121-pNtLAR∷GUS分别和中国水仙R2R3-MYB转录因子NtMYB2、NtMYB5混合注射烟草叶片,GUS染色结果显示NtMYB2和NtMYB5并不能抑制NtLAR启动子的活性,定量PCR结果与GUS染色结果一致。采用pGreenII 0800-pNtLAR-Luc载体进行双荧光素酶实验进一步验证了GUS染色实验和定量PCR结果。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 周平,范雨昕,姚红,彭嘉宇,曾黎辉

关键词: 中国水仙,启动子,表达调控机制

来源: 西北植物学报 2019年08期

年度: 2019

分类: 基础科学,农业科技

专业: 生物学,园艺

单位: 福建农林大学园艺学院

基金: 福建农林大学科技创新基金(KFA17352A,KFA17602A),福建农林大学特色花卉产业服务团队(11899170116),国家甘蔗工程技术中心项目(KJG16005R)

分类号: S682.21;Q943.2

页码: 1353-1360

总页数: 8

文件大小: 4628K

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