论文摘要
[目的]为了降低拟南芥原生质体制备的试验成本,缩短制备时间,降低转化所用质粒的浓度和提高转化效率。[方法]实验以胶带法为基础,比较多种普通胶带去除拟南芥叶片下表皮的效果,通过增加裂解叶片用量,设计不同质粒浓度梯度转化原生质体,调整转化过程中PEG处理时间和对原生质体进行暗培养。[结果]发现普通纸质和布质胶带去除拟南芥叶片下表皮效果良好。将叶片酶解时间缩短到20～30 min,转化质粒用量降低到5μg/6～10×104个原生质体;将PEG转化处理时间延长到30 min,利用暗培养降低了原生质体死亡率;用冰水混合物保存原生质体,24 h内不影响转化效率。[结论]改良后的胶带法制备原生质体成本低、用时短、转化效率高、可操作性强。
论文目录
文章来源
类型: 期刊论文
作者: 史勇,金维环,刘姣姣,王林会,陈彦惠
关键词: 拟南芥,原生质体,转化,改良,叶肉细胞
来源: 生物技术 2019年02期
年度: 2019
分类: 基础科学
专业: 生物学
单位: 河南农业大学农学院,河南农业大学生命科学学院
基金: 国家自然科学基金项目(31601318),河南农业大学科研启动金项目
分类号: Q943.2
DOI: 10.16519/j.cnki.1004-311x.2019.02.0026
页码: 147-152+170
总页数: 7
文件大小: 711K
下载量: 549
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