导读:本文包含了耻垢分枝杆菌论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:分枝,杆菌,反式,敏感性,超声,疫苗,药物。
耻垢分枝杆菌论文文献综述
李刚静,董宇,杜永洪[1]（2019）在《超声联合载药PLGA纳米粒对耻垢分枝杆菌的协同杀菌效果实验研究》一文中研究指出目的纳米颗粒(NPs)用于药物递送以治疗耐药性细菌感染的疾病是一种极有前景的策略。有报道,载药纳米粒不仅可以改善药物对正常组织的毒副作用,还可能选择性在感染部位大量积累,达到高效杀菌的作用。本研究选用生物相容性好、可安全降解的聚乳酸羟基乙酸(PLGA)包裹抗结核药物左氧氟沙星(LVFX),联合低频低强度超声(LFLIU)作用于结核分枝杆菌的生物模式菌株——耻垢分枝杆菌(MS),探讨LFLIU协同载药纳米粒杀菌的效果。方法采用双乳化法制备载左氧氟沙星PLGA纳米粒(LVFX-NPs),马尔文激光粒度仪检测LVFX-NPs的粒径与电位,紫外分光光度计计算其载药率及包封率。平板计数法比较超声、LVFX、超声联合LVFX、超声联合LVFX-NPs对MS的体外杀菌效果。为了验证超声联合LVFX-NPs的协同增效是否与声孔效应有关,将不同方式处理后的样本送至扫描电镜室观察。结果 1.LVFX-NPs的粒径、Zeta电位分别为282.5±2.5nm、-18.5±0.8mV,大小均匀,分散度良好,计算其载药率、包封率分别为1.04%、21.4%。2.平板计数结果显示,与对照组相比,MS分别经超声、LVFX、超声联合LVFX、超声联合LVFX-NPs处理后的存活率为91.19±3.21%、65.22±3.65%、57.74±1.04%、38.81±6.16%,超声联合LVFX-NPs具有显着的协同杀菌效果(P<0.01)。3.实验后扫描电镜结果显示,对照组细菌形态饱满,表面光滑。超声组细菌菌体形态不规则,出现轻微肿胀。LVFX组细菌菌体肿胀。超声联合LVFX组部分菌体呈网孔状损伤,而超声联合LVFX-NPs组细菌肿胀明显,菌体表面严重受损破裂。这与平板计数法的结果相符合。可见,LVFX-NPs的存在增强了超声的声孔效应,致使细菌细胞壁破裂,促进药物进入菌体,从而有效增强杀菌作用。结论双乳化法成功制备了物理特性良好的LVFX-NPs,LFLIU联合LVFX-NPs对MS具有很好的协同杀菌效果。(本文来源于《中国超声医学工程学会第十届全国超声治疗及生物效应医学学术大会论文汇编》期刊2019-12-06）
李健虎,傅敏,谢霜,杜永洪[2]（2019）在《高强度聚焦超声对SD大鼠感染耻垢分枝杆菌病灶损伤效应的实验研究》一文中研究指出目的探究高强度聚焦超声(HIFU)对SD大鼠感染耻垢分枝杆菌(MS)结核动物模型的损伤效应。方法 20只SD大鼠臀部皮下分别注射MS悬液1 ml建立感染MS结核动物模型。选取10只成功建立模型的SD大鼠分为HIFU组和对照组,每组5只。HIFU组行HIFU辐照15 s(频率1 MHz,声强6369 W/cm2);对照组行假照15 s(频率1 MHz,声强0 W/cm2)。观察两组辐照前后结节B超灰度变化。对结节组织分别进行HE染色和抗酸染色,光学显微镜下观察结节组织病理变化;激光共聚焦显微镜及扫描电镜下观察HIFU辐照对结节的损伤效应。结果 HIFU组HIFU辐照前后SD大鼠结核结节的B超灰度值比较差异有统计学意义(P=0.004);对照组辐照前后结节的B超灰度值无明显变化。HE染色:对照组光学显微镜下见皮肤组织结构完整,皮肤附件结构正常,未发现明显的炎症浸润;HIFU组光学显微镜下见皮肤组织结构完整,真皮层组织未见损伤,皮肤附件正常,炎性细胞浸润加重,呈急性损伤表现。抗酸染色:对照组中MS聚集成团,HIFU组中MS较分散,呈短棒状。对照组和HIFU组MS存活率分别为93.61%和48.60%。经HIFU辐照后,MS菌体表面变得粗糙,菌体细胞壁破裂。结论一定剂量的HIFU辐照能有效抑制SD大鼠感染MS的结核结节,有望成为治疗结核病的新方法。(本文来源于《临床超声医学杂志》期刊2019年07期）
江楠,刘娉婷,罗镇颉,吴晨,穆文美[3]（2019）在《猪带绦虫TSOL18重组耻垢分枝杆菌疫苗的构建及其表达》一文中研究指出目的构建猪带绦虫TSOL18重组耻垢分枝杆菌疫苗,分析猪带绦虫TSOL18基因在重组耻垢分枝杆菌中的表达情况。方法采用PCR方法从重组质粒pGEX-TSOL18中扩增TSOL18基因,克隆入pMV361载体,构建pMV361-TSOL18穿梭质粒,经酶切和测序鉴定后电穿孔法转化入耻垢分枝杆菌,进行单克隆菌落筛选及PCR鉴定。构建的猪带绦虫TSOL18重组耻垢分枝杆菌疫苗经热诱导后,以SDS-PAGE分析及Western blot分析TSOL18基因在重组耻垢分枝杆菌中的表达情况。结果成功扩增出TSOL18目的基因,大小约为393 bp,与预期值相符;经酶切验证,pMV361-TSOL18穿梭质粒构建成功;PCR鉴定猪带绦虫TSOL18重组耻垢分枝杆菌疫苗构建成功。SDS-PAGE电泳检测重组菌表达的目的蛋白TSOL18,相对分子质量为15×10~3与预期相符;Western blot分析该蛋白能被TSOL18兔抗血清识别。结论成功构建了猪带绦虫TSOL18重组耻垢分枝杆菌疫苗,猪带绦虫TSOL18基因在耻垢分枝杆菌中成功表达,表达蛋白具有反应原性,其免疫原性有待进一步研究。(本文来源于《中国病原生物学杂志》期刊2019年06期）
肖婧,张宗德[4]（2019）在《利用CRISPR干扰系统敲低耻垢分枝杆菌sepF基因表达的研究》一文中研究指出目的 目前,进行结核分枝杆菌重要基因功能方面的研究受限于缺乏有效的技术工具定向删除或失活结核分枝杆菌指定基因。本研究首次利用CRISPR干扰系统敲低Msm_sepF基因的表达,通过检测敲低的Msm_sepF所引起的细菌生长表型和形态表型的变化,以揭示该基因是否作为必需基因在分枝杆菌中分化中所发挥的作用。方法 本研究先设计可结合到Msm_sepF靶基因编码区正义链上的sgRNA,经CAS OT软件预测,将入选的脱靶位点少的sgRNA进行寡核苷酸单链的化学合成、退火和磷酸化,再与已线性化的酶切(本文来源于《中华医学会结核病学分会2019年全国结核病学术大会论文汇编》期刊2019-06-12）
李智颖[5]（2019）在《Sigma E基因对耻垢分枝杆菌药物敏感性影响及其机制初步探索》一文中研究指出目的:构建SigE过表达耻垢分枝杆菌,通过应激功能试验,证实SigE表达成功有活性。观察SigE过表达耻垢分枝杆菌对多种药物生存率的变化,及敲除SigE或表达“抗SigE”对药物生存率的变化,反映SigE对药物敏感性影响。利用Rpf E促进持留菌复苏,检测复苏指数,了解SigE促进细菌持留影响药物敏感性的可能机制。经高通量测序分析差异基因,进一步了解SigE可能与细菌的哪些基因有关,为后续改善分枝杆菌耐药性的研究奠定基础。方法:1.PCR扩增出耻垢分枝杆菌sigE基因,克隆入质粒p MV261的多克隆位点,构建重组p MV261-SigE质粒,测序验证。重组质粒电转入耻垢分枝杆菌,Western blot检测SigE的表达。2.通过十二烷基硫酸钠、酸和过氧化氢应激试验反映SigE对应激的影响。DDP和MMC作用后观察SigE对DNA损伤应激的影响。3.设立含空质粒转化菌为对照组,采用刃天青作为指示剂的微量滴定板法和菌落计数法检测细菌的生存率反映细菌对抗结核药物的敏感性。4.构建sigE基因缺失突变体,验证缺失sigE基因对耻垢分枝杆菌药物敏感性影响,同时构建p MV261-MSMEG-5071/MS重组耻垢分枝杆菌过表达“抗SigE”分子,验证抑制SigE时,对耻垢分枝杆菌药物敏感性影响。5.采用相应抗生素处理重组耻垢分枝杆菌48 h诱导细菌进入非复制持留状态,随后在含20 ng/m L的结核分枝杆菌复苏促进因子E的7H9中静置培养2周,计数最大可能数和细菌生长数,测算复苏指数来了解SigE对药物敏感性的影响机制。6.高通量测序分析差异基因的表达情况,参考基因注释、聚类、功能富集分析。结果:1.成功构建p MV261-SigE,经测序鉴定序列正确,Western blot检测到SigE在耻垢分枝杆菌中成功表达。2.与空载菌株比较,SigE过表达菌株在十二烷基硫酸钠、酸和过氧化氢应激下生存率更高(P<0.05);顺铂作用后,耻垢分枝杆菌SigE表达水平比未处理对照组高,顺铂或丝裂霉素c处理的SigE重组耻垢分枝杆菌组存活率也更高(P<0.05)。3.与对照组相比,SigE过表达耻垢分枝杆菌组对抗结核药物的相对荧光百分比高,即敏感性下降。4.成功构建sigE基因敲除质粒和p MV261(+)-MSMEG-5071/MS质粒,MSMEG-5071(抗SigE)成功表达。表达MSMEG-5071的重组耻垢分枝杆菌对抗生素的敏感性增加。但耻垢分枝杆菌sigE基因突变体仍需进一步筛选鉴定。5.异烟肼、乙胺丁醇两种药物作用后,SigE过表达耻垢分枝杆菌复苏指数明显高于对照组;MSMEG-5071过表达菌持留复苏指数除链霉素外,其他五种药物都表现出复苏指数低于对照组。6.高通量测序,差异基因分析显示MSMEG-5071过表达菌在药物处理后虽然调动应激等机制,但同时生理代谢旺盛,降低群体感应基因的表达。结论:1.DNA损伤剂作用后,SigE表达量升高,SigE过表达耻垢分枝杆菌有较强的抗应激和抗DNA损伤的能力。2.SigE可能是通过促进耻垢分枝杆菌进入持留状态影响异烟肼和乙胺丁醇作用的敏感性。3.MSMEG-5071对减少持留菌的产生发挥了重要作用。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2019-05-01）
谢霜[6]（2019）在《LFLIU联合载左氧氟沙星纳米粒对巨噬细胞内耻垢分枝杆菌的杀菌效果研究》一文中研究指出研究意义目前,结核病(Tuberculosis,TB)仍然是世界范围内的一个重大公共卫生问题。TB是全球死亡人数最多的传染病,其病原菌结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)细胞壁厚、通透性差,并且它主要寄生在巨噬细胞(Mф)内,导致药物难以渗透MTB的双重障碍而耐药,TB的控制依然面临严峻挑战,临床上迫切需要寻找新的抗结核感染治疗新方法,为此,本文研究了LFLIU联合载左氧氟沙星PLGA纳米粒对巨噬细胞内耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis,MS)的生物学效应和杀菌机制,有望为结核病的治疗提供一种无创、安全、有效的方法。目的探讨LFLIU联合载药PLGA纳米粒突破Mф、MTB细胞壁双层屏障的杀菌效果及机制,有望显着缩短结核病化疗疗程,为陷入困境的结核病治疗带来新突破。方法1.LFLIU对巨噬细胞内耻垢分枝杆菌的损伤效应:选用频率为42KHz,换能器直径45mm,输出声强范围0.13~0.34 W/cm~2连续可调的超声波发射仪。分别用声强0.14 W/cm~2、0.33 W/cm~2的超声辐照巨噬细胞RAW264.7 0、5、10 min和15 min,筛选出对巨噬细胞活性无明显影响的超声辐照剂量。(1)建立耻垢分枝杆菌感染RAW264.7细胞吞噬模型,用声强0.14 W/cm~2的超声分别辐照该感染细胞0、5、10 min。(2)选用正常RAW264.7细胞,用声强0.14 W/cm~2的超声分别辐照0、5、10 min。实验后,分别采用流式细胞术检测RAW264.7细胞的凋亡率和坏死率,使用平板计数法评估RAW264.7细胞内耻垢分枝杆菌的活性,使用激光共聚焦显微镜和流式细胞仪观察并定量RAW264.7细胞经超声辐照后产生的活性氧。2.LFLIU联合载左氧氟沙星PLGA纳米粒对巨噬细胞RAW264.7内耻垢分枝杆菌的杀菌作用和机制:(1)采用双乳化法制备载左氧氟沙星PLGA纳米粒,利用马尔文激光粒度仪检测该纳米粒的粒径,电位和多分散性;在电镜下观察它的形态和内部结构;测量载药纳米粒72h内药物自然释放率及一定超声辐照后药物的释放率;比较游离左氧氟沙星和载左氧氟沙星纳米粒分别对RAW264.7细胞的毒性作用。(2)将被感染耻垢分枝杆菌的巨噬细胞分为6个组(N=3):对照组、游离左氧氟沙星组、载左氧氟沙星纳米粒组、单独超声辐照组、超声联合游离左氧氟沙星组、超声联合载左氧氟沙星纳米粒组。实验后,用激光共聚焦显微镜和流式细胞仪观察和检测LFLIU对载左氧氟沙星纳米粒的吞噬情况以及细胞内产生的活性氧,同时用流式细胞仪分析被处理后的RAW264.7细胞的坏死率和凋亡率,用透射电镜观察巨噬细胞和细胞内耻垢分枝杆菌的结构变化,通过菌落计数法评估RAW264.7细胞内耻垢分枝杆菌的存活情况。结果1.成功制备了物理特性好的载左氧氟沙星PLGA纳米粒:(1)扫描电镜下观察呈球形,形态均一、分散性良好,透射电镜下可见药物被包封于PLGA纳米粒内部。(2)纳米粒性能稳定,Zata电位为-20.8±4.25mV,粒径较小,仅为229.8±?12.1nm,载药率和包封率分别是(8.36?±?0.74)%、(84.74?±?1.28)%。(3)连续监测了72h内载药纳米粒内药物的释放,72h后,超声处理组约有74%的左氧氟沙星被释放出来,对于未经超声处理的自然释放组,大约只有39%的药物被释放,结果表明超声可诱导纳米粒内左氧氟沙星的释放。(4)PLGA纳米粒内药物浓度在一定范围内时,对巨噬细胞无细胞毒性。2.一定剂量的LFLIU对巨噬细胞内耻垢分枝杆菌的损伤效果显着:用不同声强和时间辐照巨噬细胞及吞噬模型,结果提示:(1)用声强0.33 W/cm~2的LILIU辐照巨噬细胞5、10、15min以及用声强0.14W/cm~2的LFLIU辐照巨噬细胞15 min时,巨噬细胞的存活率低于75%,影响巨噬细胞的活性,当超声强度为0.14 W/cm~2,辐照时间为5、10 min时,对巨噬细胞的生长活性影响较小,此时巨噬细胞存活率分别为(116.37±9.54)%,(97.14±9.26)%。(2)用声强0.14 W/cm~2的超声辐照RAW264.7细胞10 min时,耻垢分枝杆菌的吞噬率达到了58.55%,而假照组吞噬率为32.47%,表明LFLIU可以促进巨噬细胞对耻垢分枝杆菌的吞噬。(3)当RAW264.7细胞感染耻垢分枝杆菌后,用声强0.14W/cm~2的LFLIU辐照5 min,细胞凋亡率和坏死率高于超声辐照0 min(P<0.01),但LFLIU辐照10min时,细胞凋亡率和坏死率未进一步增加。(4)用声强0.14 W/cm~2的LFLIU辐照10 min时,RAW264.7细胞内活性氧浓度高于超声辐照5 min(P<0.01),结果提示随着LFLIU辐照时间的增加,细胞内活性氧浓度增加。(5)用声强0.14 W/cm~2的LFLIU辐照0、5、10min后,RAW264.7细胞内的耻垢分枝杆菌活菌数分别为(4.64±0.21)×10~5 CFU/mL,(3.73±0.21)×10~5,(2.20±0.21)×10~5 CFU/mL,表明RAW264.7细胞内耻垢分枝杆菌菌活力随着LFLIU辐照时间的增加而降低,最佳LFLIU辐照剂量为声强0.14 W/cm~2,辐照时间10min。3.LFLIU协同载左氧氟沙星PLGA纳米粒对巨噬细胞内耻垢分枝杆菌的杀菌效果显着:(1)声强0.14 W/cm~2LFLIU处理10min后,巨噬细胞对纳米粒的吞噬率为54.86±7.45%,假照组的吞噬率为33.18±4.16%,差异有统计学意义(P<0.01),表明LFLIU能促进巨噬细胞对纳米粒的吞噬。(2)LFLIU联合载左氧氟沙星PLGA纳米粒可显着诱导细胞内活性氧的产生,超声联合载药纳米粒,活性氧荧光强度达到了1844.3±46.7,约为对照组(993.9±47.5)的两倍。(3)与对照组相比,超声联合载药纳米粒的凋亡率为(21.25±1.15)%,差异有统计学差异(P<0.01),提示超声联合载左氧氟沙星纳米粒促进巨噬细胞的凋亡。(4)一定剂量的LFLIU联合载左氧氟沙星纳米粒可对RAW264.7细胞自身产生损伤效应,透射电镜下观察到超声处理后,巨噬细胞部分微绒毛消失,细胞核体积减小、染色质浓缩,巨噬细胞内耻垢分枝杆菌受到严重损伤,耻垢分枝杆菌壁破裂,结构不完整,脂滴和糖原含量增加。(5)LFLIU联合载左氧氟沙星PLGA纳米粒对巨噬细胞内的耻垢分枝杆菌的杀菌率为82.2%,显示出高于对照组(不用药物处理,也不用超声处理)10倍的抗菌活性。结论1.一定剂量的LFLIU可促进RAW264.7细胞对耻垢分枝杆菌的吞噬作用,单独超声可损伤巨噬细胞内耻垢分枝杆菌。2.LFLIU联合载左氧氟沙星PLGA纳米粒对RAW264.7细胞内耻垢分枝杆菌的增效杀菌作用显着。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2019-05-01）
常芳倩[7]（2019）在《耻垢分枝杆菌整合宿主因子MsIHF的结构与功能研究》一文中研究指出拟核相关蛋白又称拟核结构蛋白、细菌染色质蛋白或DNA结合蛋白。拟核相关蛋白通过与DNA结合并使DNA弯折、桥连、或缠绕,在拟核结构的压缩和组织中起到了重要的作用,并影响着细菌染色体的复制,分离,修复和表达过程。结核分枝杆菌是导致结核病的致病菌,而耻垢分枝杆菌是实验室研究结核病常用的模式菌。分枝杆菌主要编码叁种染色质蛋白,即mHU、Lsr2和整合宿主因子(mIHF),mIHF仅在放线菌中保守,但与其他细菌拟核相关蛋白的相似性很低。目前已经有报道证明mIHF对分枝杆菌的生存是必须的。经过序列比对,发现来自结核分枝杆菌的MtIHF和耻垢分枝杆菌的MsIHF同源性很高,C端序列的一致性接近100%,而生化实验表明去除N端后对蛋白功能没有影响。因此对MsIHF的研究有助于结核病新药的研发。在本研究中,我们构建了含有MsIHF目的基因的pET28at-plus质粒并转入E.coli表达菌株RosettaⅡ中,诱导MsIHF的大量表达,高压破碎细胞后,通过Ni柱亲和层析、离子交换层析、分子凝胶过滤层析的方法对蛋白进行纯化,得到纯度约95%以上的目的蛋白后进行晶体的初筛。设计合适的DNA长度与纯化好的蛋白进行孵育从而得到MsIHF-DNA复合物,对复合物初筛出晶体后通过调整沉淀剂浓度、pH、蛋白浓度、DNA长度以及种晶的方法进行晶体的优化,直到获得分辨率高的晶体,通过X-射线衍射进行数据的收集。我们解析了MsIHF与16 bpDNA的复合物晶体结构:在一个不对称单元中,两个MsIHF单体形成了一个二体,并结合了一条DNA双链。这两个MsIHF单体的结构几乎完全相同,都由五个α-螺旋组成。在MsIHF蛋白质二聚体的两侧形成了较大的正电区域。不同于大肠杆菌中的异源二聚体IHF,可以诱导DNA形成一个U型弯折,而MsIHF仅仅使DNA的构象发生了轻微的改变。单个氨基酸的突变和MsIHF-DNA相互作用分析证明两个正电荷表面都可以结合DNA,这表明了MsIHF可以桥连不同的DNA分子,或者稳定DNA的弯折。我们通过分析超速离心实验、化学交联实验证明了MsIHF在溶液中以二聚体形式存在,与解析的结构信息一致。MsIHF在放线菌中具有高度的保守性,揭示放线菌中的IHF通过一个新的DNA相互作用机制发挥其功能,为mIHF作为结核病药物设计的潜在靶标提供一定的理论基础。(本文来源于《安徽大学》期刊2019-05-01）
胡亚文,白嘉诚,葛文雪,姚梦依,张雪莲[8]（2019）在《耻垢分枝杆菌中反式翻译报告体系的构建》一文中研究指出细菌在翻译过程中,mRNA受到损伤(如缺失终止密码子)时会使翻译提前终止,导致核糖体熄火,细菌自身会启动核糖体拯救途径。由tmRNA-SmpB介导的反式翻译系统是结核分枝杆菌中的核糖体拯救途径,对结核分枝杆菌的生长繁殖有重大影响。为探究分枝杆菌中反式翻译途径的启动及其功能特点,本研究选取耻垢分枝杆菌为实验菌株,分别以mCherry和egfp作为报告基因,通过在报告基因3′端添加大肠埃希菌终止子序列,构建能在菌体中反映反式翻译表达的报告体系,并初步探究该体系中报告基因的动态表达特点。结果显示,相比正常表达mCherry的对照菌株,实验菌株中表达的错误mCherry蛋白很快被水解,菌体颜色均明显浅于前者,增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)定量检测数据也显示错误EGFP水平显着低于正常表达的EGFP水平,表明两种反式翻译报告体系均构建成功。报告基因的动态表达数据显示,蛋白出现翻译异常时,耻垢分枝杆菌可在蛋白翻译过程中快速启动反式翻译途径,并于40～45h将不成熟错误蛋白完全水解。本研究构建的反式翻译报告体系可为后续开展分枝杆菌反式翻译途径的功能研究及抗结核药物筛选提供帮助。(本文来源于《微生物与感染》期刊2019年01期）
李智颖,卢楠,魏家玮,唐弘,吴宣艳[9]（2019）在《Sigma E基因对耻垢分枝杆菌五种药物敏感性的影响及机制研究》一文中研究指出目的探讨Sigma E (sigma factor E,SigE)基因影响耻垢分枝杆菌对5种药物的敏感性及其作用机制研究。方法 PCR法扩增出耻垢分枝杆菌sigE基因,克隆入质粒pMV261构建重组pMV261-SigE质粒,测序验证。重组质粒电转入耻垢分枝杆菌,Western blot检测SigE的表达。设立含空质粒转化菌为对照组,采用刃天青作为指示剂的微量滴定板法和菌落计数法检测pMV261-SigE重组耻垢分枝杆菌对异烟肼、利福平、乙胺丁醇、左氧氟沙星和环丙沙星5种抗结核药物的敏感性。采用相应抗生素处理重组耻垢分枝杆菌48 h诱导细菌进入非复制持留状态,随后在含20 ng/mL的结核分枝杆菌复苏促进因子E (resuscitation-promoting factor E, RpfE)的7H9中静置培养2周,计数最大可能数和细菌生长数,测算复苏指数来了解SigE对药物敏感性的影响机制。结果成功构建pMV261-SigE,经测序鉴定序列正确,Western blot检测到SigE在耻垢分枝杆菌中表达。与对照组相比,表达SigE重组耻垢分枝杆菌组对异烟肼、利福平等5种药物的相对荧光百分比高,敏感性下降。5组抗生素中,异烟肼、乙胺丁醇两种药物作用后pMV261-SigE重组耻垢分枝杆菌复苏指数明显高于对照组。结论 SigE可通过促进耻垢分枝杆菌进入持留状态影响异烟肼和乙胺丁醇作用的敏感性。(本文来源于《中国人兽共患病学报》期刊2019年02期）
何黎,齐文静,郑雪婷,郭刚,李军[10]（2018）在《细粒棘球绦虫EgM123重组耻垢分枝杆菌疫苗在小鼠体内的表达及其免疫应答》一文中研究指出目的构建表达细粒棘球绦虫成虫特异性基因EgM123的耻垢分枝杆菌疫苗株,接种BALB/c小鼠,观察其免疫原性。方法 PCR扩增EgM123片段,定向克隆至大肠埃希菌-分枝杆菌穿梭质粒pMV261中,构建重组质粒pMV261-EgM123。连接产物转化至大肠埃希菌DH5α中,培养后提取质粒,测序确定阅读框架正确,后电穿孔转入耻垢分枝杆菌,构建表达EgM123的重组耻垢分枝杆菌疫苗(rMS-EgM123),经热诱导后采用SDS-PAGE和Western blot检测目的蛋白表达。在培养过程中连续检测菌液A600值,绘制重组菌生长曲线。取重组菌接种小鼠,检测基础接种和加强免疫接种后血清特异抗体水平。结果 PCR扩增出大小为594bp的EgM123片段,EgM123基因正确插入到穿梭质粒pMV261中,测序鉴定阅读框架正确。重组耻垢分枝杆菌连续传10代培养,重组质粒DNA序列未发生变异。Western blot检测表达产物能被抗EgM123鼠血清识别。用重组耻垢分枝杆菌疫苗加强免疫后的小鼠血清特异性抗体呈持续上升趋势,单次加强免疫8周后抗体水平(A405值为2.504±0.659)显着高于亚单位疫苗组(P<0.05)。结论重组耻垢杆菌疫苗菌能表达细粒棘球绦虫成虫EgM123蛋白,且该重组疫苗可通过加强免疫增强基础免疫诱导小鼠产生的抗体水平。(本文来源于《中国病原生物学杂志》期刊2018年12期）
耻垢分枝杆菌论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的探究高强度聚焦超声(HIFU)对SD大鼠感染耻垢分枝杆菌(MS)结核动物模型的损伤效应。方法 20只SD大鼠臀部皮下分别注射MS悬液1 ml建立感染MS结核动物模型。选取10只成功建立模型的SD大鼠分为HIFU组和对照组,每组5只。HIFU组行HIFU辐照15 s(频率1 MHz,声强6369 W/cm2);对照组行假照15 s(频率1 MHz,声强0 W/cm2)。观察两组辐照前后结节B超灰度变化。对结节组织分别进行HE染色和抗酸染色,光学显微镜下观察结节组织病理变化;激光共聚焦显微镜及扫描电镜下观察HIFU辐照对结节的损伤效应。结果 HIFU组HIFU辐照前后SD大鼠结核结节的B超灰度值比较差异有统计学意义(P=0.004);对照组辐照前后结节的B超灰度值无明显变化。HE染色:对照组光学显微镜下见皮肤组织结构完整,皮肤附件结构正常,未发现明显的炎症浸润;HIFU组光学显微镜下见皮肤组织结构完整,真皮层组织未见损伤,皮肤附件正常,炎性细胞浸润加重,呈急性损伤表现。抗酸染色:对照组中MS聚集成团,HIFU组中MS较分散,呈短棒状。对照组和HIFU组MS存活率分别为93.61%和48.60%。经HIFU辐照后,MS菌体表面变得粗糙,菌体细胞壁破裂。结论一定剂量的HIFU辐照能有效抑制SD大鼠感染MS的结核结节,有望成为治疗结核病的新方法。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
耻垢分枝杆菌论文参考文献
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