骨髓间充质干细胞源外泌体调控心肌微血管内皮细胞增殖的机制研究

论文摘要

目的探讨缺氧预处理骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs）来源的外泌体（exosomes）调控心肌微血管内皮细胞（cardiac microvascular endothelial cells,CMVECs）增殖的机制。方法采用酶消化法联合差速贴壁法培养大鼠CMVECs,超高速离心法提取常氧及缺氧预处理的BMSCs exosomes,免疫荧光检测CMVECs内化exosomes情况。实验分为4组（n=3）:①正常对照组（Control）,②去除exosomes后的BMSCs条件培养基的空白对照组（Free-Exos）,③常氧外泌体组（Nor-Exos）,④缺氧外泌体组（Hypoxia-Exos,外泌体浓度为400μg/μL,与CMVECs共培养24 h）。采用Edu法及流式细胞术细胞周期法检测细胞增殖能力,qRT-PCR检测exosomes和CMVECs各组中miR-214表达变化。抑制exosomes中miR-214后,qRT-PCR检测exosomes及CMVECs中miR-214的表达变化,并观察细胞增殖情况。结果经透射电镜及免疫印迹法验证提取的囊泡状物质为外泌体,并通过免疫荧光分析发现DiI标记的exosomes可被CMVECs内化;Edu及细胞周期结果显示,Hypoxia-Exos组较Nor-Exos组具有更强的促CMVECs增殖能力（P<0.05）。qRT-PCR结果显示,与Nor-Exos组比较,Hypoxic-Exos组中miR-214表达显著升高（P<0.05）。下调Hypoxia-Exos中的miR-214表达后,Edu及细胞周期结果显示Hypoxia-Exos组的促进细胞增殖能力被部分阻断（P<0.05）。结论缺氧预处理骨髓间充质干细胞源exosomes可能通过传递miR-214促进CMVECs增殖效应。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 李朝富,王艳,赵然尊,龙仙萍,张巍,陈攀科,石蓓

关键词: 骨髓间充质干细胞,外泌体,心肌微血管内皮细胞,细胞增殖,细胞分化

来源: 第三军医大学学报 2019年23期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 心血管系统疾病

单位: 遵义医科大学附属医院心内科

基金: 国家自然科学基金地区项目(81760042,81860061),贵州省科技计划项目(黔科合LH字[2017]7107号)~~

分类号: R54

DOI: 10.16016/j.1000-5404.201907063

页码: 2313-2321

总页数: 9

文件大小: 9674K

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