白细胞介素-4负调控NF-κB通路抑制炎症反应的机制研究

白细胞介素-4负调控NF-κB通路抑制炎症反应的机制研究

论文摘要

目的探讨白细胞介素(IL)-4对于脂多糖(LPS)诱导的Ana-1细胞髓样分化因子88(MyD88)/核因子(NF)-κB信号通路的影响。方法将小鼠巨噬细胞Ana-1分为LPS组(给予50μg/L LPS刺激)和LPS+IL-4组(10μg/L IL-4预培养1 h后,给予LPS刺激)。在0、0.5、1和2 h时收集细胞培养上清液。采用RT-PCR检测MyD88和NF-κB mRNA的相对表达水平;Western blot法检测MyD88、NF-κB总蛋白、NF-κB p65蛋白表达水平;ELISA法检测NF-κB p65胞核/胞浆比例,以及细胞培养上清液中IL-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α含量。结果随着细胞培养时间的延长,LPS组MyD88、NF-κB mRNA和蛋白表达水平,NF-κB p65胞核/胞浆比例,IL-6和TNF-α水平均呈逐渐升高的趋势(P<0.05);而LPS+IL-4组MyD88 mRNA表达水平无明显变化(P>0.05),MyD88蛋白表达水平、NF-κB mRNA和蛋白表达水平、NF-κB p65胞核/胞浆比例、IL-6和TNF-α水平则均呈先升高后降低的趋势(P<0.05);LPS+IL-4组MyD88 mRNA和蛋白表达水平、NF-κB p65胞核/胞浆比例、IL-6和TNF-α水平在1 h和2 h时显著低于LPS组(P<0.05),而2组不同时间点NF-κB mRNA和蛋白表达水平比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 IL-4发挥抗炎作用可能与抑制MyD88/NF-κB信号通路活化有关,IL-4可下调促炎细胞因子IL-6和TNF-α的表达。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1主要材料和仪器
  •   1.2方法
  •     1.2.1细胞培养和构建LPS±IL-4处理Ana-1细胞模型
  •     1.2.2RT-PCR检测MyD88、NF-κB mRNA表达水平
  •     1.2.3Western blot检测MyD88和NF-κB蛋白表达水平
  •     1.2.4ELISA检测NF-κB p65胞核/胞浆比例
  •     1.2.5ELISA检测IL-6和TNF-α含量
  •   1.3统计学方法
  • 2 结果
  •   2.1 IL-4对LPS活化的Ana-1细胞表达MyD88的影响
  •   2.2 IL-4对LPS活化的Ana-1细胞NF-κB表达的影响
  •   2.3 NF-κB p65胞核/胞浆比例变化
  •   2.4 IL-4对LPS诱导的IL-6和TNF-α水平的影响
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 黄洁媛,刘文明

    关键词: 白细胞介素,脂多糖类,肿瘤坏死因子,髓样分化因子,炎症

    来源: 天津医药 2019年10期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,基础科学

    专业: 生物学,基础医学

    单位: 南京医科大学附属常州市第二人民医院

    分类号: R392.1

    页码: 1025-1029

    总页数: 5

    文件大小: 855K

    下载量: 126

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