导读:本文包含了低温保存方法论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:低温,超低温,精子,结晶,活力,波谱,皮肤。
低温保存方法论文文献综述
何志,李学拥,雷战军,李靖,黄辞[1]（2019）在《改良皮片4℃低温保存方法在创面二次植皮治疗中的应用研究》一文中研究指出目的:探讨改良皮片4℃低温保存方法在创面二次植皮治疗中的应用效果。方法:①动物实验:健康成年豚鼠3只,处死后,取背部皮肤做成32个1 cm×1 cm小皮样,随机分为新鲜皮组、庆大盐水保存组、RPMI保存组,改良RPMI保存组进行4℃保存;1周后测定皮肤活力;②临床实验:观察自2018年10月至2018年12月,二期植皮患者33例,应用改良RPMI 4℃低温保存皮肤二期回植的患者16例,与重新取皮植皮患者17例比较其皮片成活率。结果:动物实验证实:改良RPMI保存组4℃保存组在皮肤储存1周时皮肤平均活力较庆大盐水保存组、RPMI保存组高(P<0.05);临床实验证实:改良RPMI保存组与重新植皮的皮片平均成活率没有显着性差别(P>0.05)。结论:改良4℃断层皮片低温保存方法可短期内保存皮肤较高的活力,是皮片再利用的一种有效方法。(本文来源于《现代生物医学进展》期刊2019年17期）
曹丹,马永和,张永平[2]（2019）在《实验室常用猪精液的低温保存方法》一文中研究指出随着养猪生产的发展和产业化进程的推进。人们对猪人工授精重要性的认识越来越深刻,在现代养猪生产和育种工作中,人工授精正成为一种非常重要的生产途径。在猪的生产方面,人工授精技术的应用低温保存与冷冻精液相比,具有更好的受胎率和产仔数,而且操作简单,取材方面,更利用推广应用。现将总结的猪精液的低温保存方法介绍如下:(本文来源于《新农业》期刊2019年09期）
刘晓利[3]（2018）在《脂肪间充质干细胞及其构建物新型低温保存方法研究》一文中研究指出低温保存对于细胞、组织、器官甚至新近出现的生物复合物的长期储存是一种有效的不可或缺的方法,被广泛应用到干细胞治疗、生物组织工程、再生医学等生物医学领域。低温的深度保存(-196℃)主要包括慢速降温的两步法保存和快速的玻璃化保存。慢速降温的两步法保存是目前应用最广的方法,但仍然存在着一定的缺陷,尤其是在干细胞及生物材料的保存中。在慢速降温的两步法保存过程中,细胞或生物材料内会产生冰晶,这将造成细胞和生物材料的机械性损伤,而且在慢速降温过程中还存在着溶质损伤。同时,干细胞的慢速保存可能会影响干细胞功能等。玻璃化低温保存可以避免在冷冻降温时冰晶的形成,但是传统的玻璃化保存应用到了高浓度的低温保护剂,这会造成细胞的毒性损伤。因此,探索低浓度低温保护剂下的玻璃化低温保存方法是非常必要的。低浓度玻璃化保存方法面临最大的挑战是复温过程中再结晶的发生,所以,了解再结晶发生的原因以及影响因素是非常重要的。本文首先利用低温显微镜检测了悬浮和贴壁两种状态下的细胞在不同降温速率下和不同溶液中的胞内冰和再结晶的形成概率以及冷冻复温后细胞的活性。其结果发现,随着降温速率的增加,胞内冰和再结晶的形成概率有所增加。同时,在有1 M DMSO存在的条件下,胞内冰和再结晶的形成会比在PBS中有所延迟。虽然在1 MDMSO溶液中,胞内冰和再结晶的形成概率比在PBS溶液中高些,但是复温后的存活率也高,这可能是因为冰晶形成只是细胞损伤的一种因素,在低温保存中,低温保护剂可以保护细胞,比如稳定细胞膜等。相对于悬浮细胞,贴壁细胞在同样的降/复温过程中,其胞内冰形成概率会高很多,但是复温后的细胞活性却比悬浮细胞要高,这是因为细胞间的间隙连接可以避免细胞在冷冻过程中过度脱水,同时在低温环境下保护细胞等。已有研究表明纳米颗粒在溶液冷冻时可以促进其冰晶形成等,而Fe304纳米颗粒已经被应用到组织冷冻的复温过程中,但是它对冻存溶液的影响研究的还不多,因此我们利用低温显微镜观察不同浓度的Fe304纳米颗粒对溶液冰晶形成的影响,结果发现,当溶液中添加Fe304纳米颗粒后,冰晶成核的温度点会提高10℃ 左右,同时冰晶生长的速率也会增加。这是因为在这个冷冻过程中,纳米颗粒可以被看作是冰晶形成的成核剂从而促进冰晶成核及生长。在以往的低浓度低温保护剂的玻璃化低温保存研究中,人们常常用海藻酸盐凝胶来抑制复温过程中反玻璃化的发生,但是对于海藻酸盐水凝胶的低温显微镜的研究还比较少。我们利用低温显微镜来研究一定厚度(200 μm)的海藻酸盐水凝胶对冰晶形成的影响以及低温环境对海藻酸水凝胶微球结构的影响,我们发现在冷冻过程中海藻酸盐水凝胶内仅有少量的冰晶形成,且在复温过程中没有再结晶发生,这说明了海藻酸盐水凝胶在一定程度上可以抑制冰晶的形成和再结晶的发生。同时,我们发现当低温保护剂浓度大于1M(渗透性)时,海藻酸盐水凝胶微球的形态不会受到冷冻复温的影响。在较低浓度的渗透性低温保护剂(2 M)存在时,形成的冰晶边界多是尖锐的,而在高浓度的渗透性低温保护剂(4 M)或是在2 M渗透性低温保护剂和1.3 M海藻糖存在时,形成的冰晶边界多是圆润、光滑的。因此,在低温保存细胞等生物样品时,糖的添加会大大提高保存效率。我们利用DSC方法检测了海藻酸盐水凝胶微球对不同浓度低温保护剂结晶量的影响,其结果发现,即使在较低浓度的低温保护剂存在时,有海藻酸盐水凝胶微球的会比没有的结晶量少很多,这说明了这样凝胶可以促进水向玻璃化状态转变。为了解决低浓度保护剂玻璃化低温保存过程中的再结晶等问题,我们探索了一种新的通过Fe_3O_4纳米颗粒与微胶囊化海藻酸盐水凝胶相结合的方法,成功实现了干细胞-海藻酸盐水凝胶构建物的低浓度低温保护剂下的玻璃化保存。在以往的细胞封装保存过程中,大部分采用是单一的海藻酸盐水凝胶结构,而在我们的实验中,我们采用了“核壳”结构胶囊,外部的海藻酸盐水凝胶外壳不仅可以保护细胞免受封装时溶液剪切力的损伤,也避免细胞在复温过程中冰晶的损伤,同时,这个外壳还可以把Fe_3O_4纳米颗粒与细胞隔离开。在复温过程中,海藻酸盐水凝胶可以在一定程度上抑制再结晶的发生,同时,在交变电磁场下,保护剂溶液中的Fe304纳米颗粒可以产生均匀热量进一步抑制局部以及整体溶液的再结晶或反玻璃化的发生。与传统的复温相比,这种纳米复温的方法把干细胞的贴壁效率从24%提高到68%,这对于其后期的应用尤为重要。此外,这种纳米复温方法也确保了干细胞-水凝胶构建物结构的完整和3D培养中细胞的有效增殖。这种新的纳米复温方法对于促进基于干细胞以及干细胞-水凝胶构建物等应用到临床领域有着潜在的价值。另外,为了排除生物实验过程中溶液渗透压对实验结果的影响以及更全面地检测细胞活性,我们利用微悬臂梁和细胞相结合,探索出一种新的动态溶液渗透压检测方法和细胞活性的检测方法,同时这种方法还可以用于抗癌药物的筛选等,相比一般的细胞活性检测方法,该方法更加灵敏,且无需特殊标记等。(本文来源于《中国科学技术大学》期刊2018-05-01）
张楠[4]（2018）在《兔离断后肢深低温保存灌注方法的改进》一文中研究指出目的以兔离断后肢为模型,进一步改进二甲基亚砜(DMSO)灌注方法,并检验该灌注方法的有效性以及对复合组织深低温冻存的保护效果,为复合组织深低温冷冻再植提供理论依据。方法实验分两部分进行。第一部分:19%DMSO-30min+10%DMSO-10min改良灌注方法灌注兔离断后肢模型有效性的检测。取健康新西兰大白兔9只,获得18只兔离断后肢模型,随机分为1组、2组及3组,每组6只离断后肢模型。1组为改良灌注组,经股动脉给予19%DMSO灌注30min,继而给予10%DMSO灌注10min;2组为灌注组,经股动脉给予19%DMSO灌注40min;3组为对照组,经股动脉给予生理盐水(NS)灌注40min,用于磁共振波谱技术的基线调整。各组采用磁共振波谱技术定量测量相同部位血管、肌肉组织中DMSO的具体浓度,1组、2组获得的各样本数据进行对比,并行统计学分析。第二部分:兔离断后肢模型不同灌注方法经冷冻复温再植后微观形态学变化的观察。取健康新西兰大白兔24只,随机分为A组、B组、C组及D组,每组6只。A组为改良灌注组,首先经股动脉给予19%DMSO灌注30min,然后给予10%DMSO灌注10min;B组为灌注组,直接经股动脉给予19%DMSO灌注40min;C组为对照组,经股动脉给予生理盐水(NS)灌注40min;D组为空白组,不进行冷冻再植,直接取样本。A组、B组、C组先行兔右后肢离断,进行灌注后给予慢速冷冻、快速复温后再植并取样本,D组直接取新鲜样本,各样本行苏木精-伊红(HE)染色后标记并保存,观察并对比各组间血管、骨骼肌及神经微观形态学变化。结果第一部分:1组、2组血管周围DMSO浓度存在显着统计学差异,P值=0.0000004;1组血管周围DMSO平均浓度为6.8550±1.97581%;2组血管周围DMSO平均浓度为18.6367±0.35359%。1组、2组肌肉周围DMSO浓度无显着统计学差异,P值=0.784,1组肌肉周围DMSO平均浓度为9.4633±2.48194%,2组肌肉周围DMSO平均浓度为9.7517±1.54743%。第二部分:各组样本血管组织损伤程度:D组<A组<B组<C组;各组样本肌肉、神经组织损伤程度:A组与B组损伤程度相当,明显优于C组,但与新鲜组D组相比,仍有较大差距。结论本实验证明,兔离断肢体模型经19%DMSO灌注30min后应用10%DMSO灌洗血管的改良灌注方法,可在保证肌肉内接近10%有效保护浓度的基础上,显着降低血管中DMSO浓度,从而降低了DMSO对血管的毒性损伤。(本文来源于《锦州医科大学》期刊2018-03-01）
张金梅,闫文君,李雪,黄斌,张海晶[5]（2017）在《桃花粉低温和超低温保存方法比较研究》一文中研究指出桃(Prunus persica(L.)Batsch)是我国重要的无性繁殖作物种质资源,目前主要保存于3个国家无性繁殖作物种质圃。随着以茎尖、花粉、休眠芽为保存载体的超低温保存技术的发展,超低温保存已成为无性繁殖作物重要备份保存方式。本研究以15份桃种质花粉为研究对象,开展含水量、回湿处理和保存温度(4℃低温保存和液氮超低温保存)对保存后花粉离体萌发率的影响研究。研究结果:明确了桃种质花粉超低温保存的含水量;揭示了回湿处理对部分桃种质花粉超低温保存产生显着影响;超低温保存后花粉离体萌发率最高可达83%;4℃低温保存和超低温保存比较研究结果表明,超低温保存4年后14份桃种质花粉离体萌发率仍可保持30%以上,11份桃种质花粉离体萌发率与保存前花粉离体萌发率相比无显着变化甚至显着提高,而4℃低温保存的花粉离体萌发率降至0。该研究为国家种质库建立花粉规模化超低温保存提供技术支撑。(本文来源于《植物遗传资源学报》期刊2017年04期）
王贵英,张涵,李清,祝东梅,陈见[6]（2016）在《黑尾近红鲌精子低温保存方法研究与应用》一文中研究指出在4℃条件下,以精子活力为指标,研究了不同浓度的Na~+、K~+、Ca~(2+)、Mg~(2+)、葡萄糖、氨基酸等组成的5种(A、B、C、D、E)精子保存液及其适量添加青霉素对黑尾近红鲌(Ancherythroculter nigrocauda)精子活力的影响。结果显示:1)温度为4℃时,精子活力达80%的保存液A、B、C、D、E的保存时间分别为48、24、60、48、48 h,保存液C的保存时间明显高于其它各组;2)在各保存液中分别添加浓度为2.0×104IU/m L的青霉素,精子活力达80%的保存液A、B、C、D、E的保存时间分别为60、36、156、48、144 h,保存时间延长了12~96 h,保存液C和E的延长时间最长,均为96 h;3)人工授精试验证明,经保存的黑尾近红鲌精子能正常用于人工繁殖,受精率达(90.6±0.8)%~(91.8±0.9)%,与对照组精子受精率(92.4±0.8)%无显着差异。添加青霉素,保存液C的保存效果最好,其次是保存液E。(本文来源于《淡水渔业》期刊2016年06期）
王晗[7]（2016）在《人参种质资源超低温保存方法及其对遗传变异特性研究》一文中研究指出人参(Panax ginseng C.A.Meyer)是五加科人参属名贵中药材。我国人参资源丰富,但由于收集与保存体系不完善,造成人参种质资源遗传多样性的丢失与缩减,给种质创新、育种工作带来很大困难。超低温保存技术是种质资源长期保存的有效方法。本研究以人参不定芽和愈伤组织为试材,通过探讨影响人参超低温保存技术的各项因素,建立起人参种质资源超低温保存体系;并对再生材料进行遗传变异特性研究。主要结果如下:1.本试验采用玻璃化法对人参不定芽进行超低温保存,探讨了影响玻璃化法超低温保存技术的因素,初步建立人参不定芽玻璃化法超低温保存体系。即选择继代培养45~60d的组培苗为试材,低温锻炼14~28d后切取2-3mm的不定芽,之后用含0.5mol/L Suc的MS培养基预处理2d,于室温下在2mol/L Gly+0.4mol/L Suc混合液下装载处理30min,然后PSV2于冰水浴条件下(0℃)处理90~120min,快速投入液氮中;液氮保存30d后,迅速投入38~40℃水浴快速化冻,用含1.2mol/L Suc的MS液体培养基洗涤3次,最后转入MS+4mg/L 6-BA+5mg/L GA3+0.25mg/L NAA培养基上进行恢复培养,存活率高达72.39%。2.本试验采用程序降温法对人参愈伤组织进行超低温保存,对影响程序降温法超低温保存技术的因素进行分析,结果表明:预处理对细胞活力、含水量均有影响,当预处理10d左右时,细胞活力达到最大值,细胞含水量约为30%;最佳冷冻保护剂为10%DMSO+0.5mol/L Suc+10%Gly。人参愈伤组织恢复生长的特征是以在原愈伤组织表面长出新的愈伤组织,恢复培养过程中,先经过一段时间的生长停滞期,之后进入快速生长阶段。3.本试验采用形态学观察、SSR分子标记技术、双向电泳技术对超低温保存前后的材料进行遗传变异特性分析,结果如下:在形态学方面,其生长状态未发现差异;在分子水平方面,未发现差异条带;在蛋白质水平方面,发现多种蛋白质表达量发生不同程度的变化。本试验通过探讨影响超低温保存的因素,建立了人参种质资源超低温保存体系;并对再生材料的遗传变异特性进行研究,为人参种质资源保存和创新提供了材料基础和理论依据。(本文来源于《中国农业科学院》期刊2016-04-01）
吕维敏,姜红强,黄刚妹,何勤跃,张绍志[8]（2015）在《液相线跟踪低温保存方法的研究》一文中研究指出液相线跟踪法是生物材料玻璃化保存的一种手段。降温时通过边降温边提高低温保护剂浓度、复温时边升温边降低低温保护剂浓度的方式,该方法能够有效减轻降温/复温过程中高浓度保护剂对细胞的毒性损伤,从而提高生物材料低温保存的成活率。文中介绍可实现液相线跟踪的低温保存装置,该装置以液氮为冷源、采用计算机控制。以二甲亚砜-氯化钠-水溶液为例进行的实验表明,该装置能够实现温度和保护剂浓度的良好匹配,二甲亚砜的最终浓度达到了玻璃化所需浓度。(本文来源于《低温与超导》期刊2015年08期）
朱泽兴,王丹,张树明,赵艳东,樊凯彬[9]（2015）在《深低温保存兔肢体不同方法复温后许旺细胞的活性》一文中研究指出背景:根据神经再生的特点,作为再生支架的许旺细胞完整性十分重要,因此神经的深低温保存最重要的是保存许旺细胞的结构和活性。目的:使用不同方法复温深低温保存的兔肢体,通过对比其神经组织的微观形态学变化,得到一种对深低温保存复合组织中的神经组织损伤较小的复温方法。方法:取40个新西兰大白兔后肢,随机分为空白组、快速复温组、慢速复温组、对照组。空白组不进行任何处理,对照组给予保护剂灌注,快速复温组、慢速复温组给予保护剂灌注后采用梯度化降温处理并保存于液氮中72 h,而后慢速复温组采用梯度化复温断肢,快速复温组将断肢直接放入37℃水浴中快速复温。复温后的各组肢体切取胫神经,采用光镜、电镜、免疫荧光、共聚焦显微镜进行观察对比,结果用SPSS 17.0统计软件进行统计分析。结果与结论:通过光镜、电镜、免疫荧光、共聚焦显微镜观察对比,空白组与对照组比较差异无显着性意义,快速复温组、慢速复温组两组均有不同程度的神经纤维断裂,轴突破坏以及线粒体肿胀,与空白组、对照组两组比较差异有显着性意义,快速复温组与慢速复温组比较,快速复温组显着优于慢速复温组。结果说明,深低温保存的兔断肢,快速复温方法对复合组织中的神经组织损伤较小。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2015年20期）
张换成,胥义[10]（2015）在《深低温保存生物材料快速复温方法的研究进展》一文中研究指出生物材料的深低温保存已经越来越广泛地应用于生物学、医学等领域,其主要特点是通过低温保存生物材料,从而缓解供求之间的矛盾。同快速降温一样,快速复温在提高冷冻保存的生物组织的活性中也扮演了重要的角色。快速复温冷冻生物材料能够有效避免其在复温过程中的重结晶现象,减小热应力,降低细胞损伤,提高细胞的存活率。近年来许多国内外学者在快速复温低温保存的生物材料方面做了很多研究,探索出多种可行的复温方法。本文对传统以及新出现的复温方法逐一论述。通过查阅大量国内外相关文献,同时结合本单位的相关研究成果分析总结进行综述。目前所使用的快速复温的方法主要有传统的水浴法、Cryotop法、微波法、激光法和磁热法等。通过对几种复温方法的综合分析,认识到它们的优势和不足,以及各种方法在应用上的局限性。所以有必要寻找一种新的可靠的复温方法来实现快速均匀的生物组织的加热,并提出了一种新的快速均匀复温生物材料的方法,该方法具有重要的研究意义和应用背景。(本文来源于《中国医学物理学杂志》期刊2015年01期）
低温保存方法论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
随着养猪生产的发展和产业化进程的推进。人们对猪人工授精重要性的认识越来越深刻,在现代养猪生产和育种工作中,人工授精正成为一种非常重要的生产途径。在猪的生产方面,人工授精技术的应用低温保存与冷冻精液相比,具有更好的受胎率和产仔数,而且操作简单,取材方面,更利用推广应用。现将总结的猪精液的低温保存方法介绍如下:
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
低温保存方法论文参考文献
[1].何志,李学拥,雷战军,李靖,黄辞.改良皮片4℃低温保存方法在创面二次植皮治疗中的应用研究[J].现代生物医学进展.2019
[2].曹丹,马永和,张永平.实验室常用猪精液的低温保存方法[J].新农业.2019
[3].刘晓利.脂肪间充质干细胞及其构建物新型低温保存方法研究[D].中国科学技术大学.2018
[4].张楠.兔离断后肢深低温保存灌注方法的改进[D].锦州医科大学.2018
[5].张金梅,闫文君,李雪,黄斌,张海晶.桃花粉低温和超低温保存方法比较研究[J].植物遗传资源学报.2017
[6].王贵英,张涵,李清,祝东梅,陈见.黑尾近红鲌精子低温保存方法研究与应用[J].淡水渔业.2016
[7].王晗.人参种质资源超低温保存方法及其对遗传变异特性研究[D].中国农业科学院.2016
[8].吕维敏,姜红强,黄刚妹,何勤跃,张绍志.液相线跟踪低温保存方法的研究[J].低温与超导.2015
[9].朱泽兴,王丹,张树明,赵艳东,樊凯彬.深低温保存兔肢体不同方法复温后许旺细胞的活性[J].中国组织工程研究.2015
[10].张换成,胥义.深低温保存生物材料快速复温方法的研究进展[J].中国医学物理学杂志.2015
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