导读:本文包含了原始卵泡论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:卵泡,原始,卵巢,细胞,颗粒,减数,绝经期。
原始卵泡论文文献综述
曾靖雯,李小琴,叶友斌,刘瑾[1]（2019）在《2,5-己二酮对小鼠原始卵泡发育的影响及其机制探讨》一文中研究指出目的:探讨卵泡激活相关调控因子在2,5-己二酮抑制小鼠原始卵泡发育中的作用。方法:6日龄ICR小鼠卵巢体外培养24小时后加入2,5-己二酮,染毒4天。每日测量卵巢直径。染毒结束后,观察卵巢结构、分析各级卵泡构成比;ELISA法检测孕酮合成水平;qRT-PCR法检测卵泡激活相关调控因子及凋亡相关因子mRNA表达水平,检测PI3K基因调控的相关microRNA表达水平,western blot法检测卵泡激活相关调控因子的蛋白表达水平;免疫荧光法观察凋亡相关基因Caspase8表达情况;qRT-PCR法确定PI3K激动剂(740Y-P)剂量,740Y-P单独及联合2,5-己二酮对培养卵巢进行染毒4天后,检测卵泡激活相关调控因子mRNA表达水平。结果:1.6日龄小鼠卵巢体外2,5-己二酮暴露后,可引起次级卵泡构成比减少;2.卵巢体外染毒2,5-己二酮后,孕酮合成水平上升;3.凋亡相关因子Caspase3、Caspase9 mRNA表达水平上升,Caspase8蛋白水平下调;4.卵泡激活相关调控因子PI3K mRNA表达水平下降,AKT mRNA表达水平上升,FOXO3 mRNA表达水平下降,FOXO3蛋白磷酸化水平上调。2,5-己二酮和740Y-P联合暴露后,PI3K mRNA表达水平上升,AKT mRNA表达水平下降,FOXO3 mRNA表达水平上升;5.表观遗传学中观察到PI3K基因调控的miR-7a-5表达下调,miR-214-3p表达上调。结论:2,5-己二酮影响孕酮合成和卵巢中凋亡相关因子表达,其可能通过影响卵泡激活信号通路PI3K/AKT/FOXO3相关因子的表达,进而抑制原始卵泡发育。(本文来源于《2019全国呼吸毒理与卫生毒理学术研讨会论文集》期刊2019-10-25）
洪雯丽,付歆欣,黄瑶琪,钟志胜,郑月慧[2]（2019）在《原始卵泡池和精神压力对妇女自然绝经年龄的影响》一文中研究指出目的探讨原始卵泡池的动态变化和精神压力对妇女自然绝经年龄的影响,为女性生殖健康提供预防和干预措施。方法选取2015年7月至2018年3月江西省11个地区市、10个县级市、70个县,采取分层、整群概率比率的方法抽取50个样本群(包括城区25个街道、郊区25个乡),对样本群中40～65岁的围绝经期妇女(n=16 597)进行问卷调查,内容包括初潮年龄、月经周期、绝经年龄、生育胎数、哺乳时长和化疗药物使用情况,以及体质指数的测定。将120例围绝经期妇女按绝经年龄分为≤50岁组和>50岁组,每组60例。对2组采用精神压力分析系统进行测评,对自然绝经年龄影响因素采用多元线性回归分析。结果多元线性回归分析结果显示,初潮年龄、月经周期、生育胎数、哺乳时长和化疗药物使用均不是自然绝经年龄的影响因素,而BMI是自然绝经年龄的影响因素。≤50岁组生理压力指数、心理压力指数均高于>50岁组(均P<0.01)。结论影响卵泡池的因素与自然绝经年龄无关,体质量和精神压力能使绝经年龄提前。(本文来源于《南昌大学学报(医学版)》期刊2019年04期）
洪雯丽,黄瑶琪,祝费隐,郑月慧,李佳[3]（2019）在《PTEN调控大鼠原始卵泡启动和生长》一文中研究指出目的探讨PTEN对大鼠原始卵泡激活和生长的调控作用和机制。方法 2日龄大鼠卵巢在Waymouth培养系统中培养0、4和8 d,用HE染色检测慢病毒PTEN siRNA的沉默效率及其对原始卵泡生长启动情况。同步用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学染色检测PTEN mRNA和蛋白在卵泡生长中的表达和动态变化;用慢病毒PTEN-shRNA沉默卵巢中PTEN表达后,观察对原始卵泡启动生长及雌二醇和孕酮分泌的影响;此外,利用PI3K抑制剂LY294002探讨了PTEN在原始卵泡形成过程中的可能信号通路。结果 PTEN mRNA和蛋白在原始卵泡中均有表达,随着原始卵泡的发育,其表达水平降低(P<0.01);经PTEN-shRNA慢病毒转染后,荧光成像显示慢病毒在体外已成功转染到卵巢组织,HE染色显示原始卵泡数量减少(P<0.01),表明PTEN参与了原始卵泡的起始。结论 PTEN可通过PI3K信号通路和调节雌、孕激素分泌调控原始卵泡发育。它在原始卵泡的发育启动中起着重要的作用。(本文来源于《基础医学与临床》期刊2019年08期）
梁菁媛,邓彦飞,赵易敏,朱剑宗,程隽如[4]（2019）在《哺乳动物原始卵泡体外培养与激活调控研究进展》一文中研究指出随着体外受精、克隆与转基因动物等基础研究快速发展,对卵母细胞的需求越来越多,科学家们不得不寻求能够获得大量优质卵母细胞的新途径。原始卵泡作为生长卵泡的来源,其初始容量影响哺乳动物的繁殖性能,是整个雌性生殖期中各阶段卵泡及卵子发育的源头。哺乳动物的卵巢在出生时由一定数量的卵泡组成,大多数原始卵泡处于休眠状态,只有极少数的原始卵泡被激活并进入生长卵泡池中。因此合理开发卵巢里尚未激活的原始卵泡对提高动物繁殖率、加速优良牛种的遗传改良、阐明动物卵泡发生的分子机理具有重要意义。本文将目前哺乳动物原始卵泡体外激活的国内外进展做一综述,为研究动物和人类卵泡激活的生物学过程提供理论基础。(本文来源于《中国畜牧杂志》期刊2019年07期）
赵瑜[5]（2019）在《视黄酸在维持小鼠原始卵泡库稳定中的作用及机制研究》一文中研究指出大多数雌性哺乳动物出生前后会建立一个储备生殖细胞的原始卵泡库。原始卵泡库一旦形成,绝大多数的原始卵泡将处于静息状态以维持雌性哺乳动物的生殖年限。原始卵泡的不正常的激活将导致卵巢早衰等疾病最终导致雌性不育。许多研究表明视黄酸(retinoid acid,RA)在减数分裂启动和性别分化中起到重要的作用,但是RA在原始卵泡激活中的作用尚不清楚。本实验研究了 RA在原始卵泡激活中的作用及其分子机制。研究发现,RA合成酶以及受体在卵巢中的表达随着新生小鼠天数增加显着下降,这提示RA的活性与原始卵泡激活负相关。体外添加RA培养新生3天(3 dpp)小鼠卵巢的结果显示RA不能显着抑制原始卵泡的激活,但RA代谢酶的表达显着上升。所以本实验添加了 RA代谢酶的抑制剂Talarozole和RA共同培养新生卵巢,结果显示RA+Talarozole处理四天后,原始卵泡激活的数量显着降低。添加RA受体抑制剂AGN194301或者RA合成酶抑制剂DEAB后,小鼠卵巢生长卵泡的数量显着升高,原始卵泡数量降低。体内注射的结果也显示RA可以显着抑制原始卵泡的激活。这些结果表明RA可以维持原始卵泡库的稳定,防止卵泡的过度激活。有文献表明,在心肌细胞和角质细胞中RA可以抑制丝裂原活化蛋白激酶3/1(MAPK3/1)信号通路。因此本实验研究了 MAPK3/1对原始卵泡激活的影响以及RA与MAPK3/1信号通路之间的关系。结果显示,添加MAPK3/1抑制剂U0126培养3 dpp的小鼠卵巢可显着减少激活卵泡的数量。进一步研究发现U0126可以抑制前颗粒细胞中的mTORC1-KITL信号传导。随后本实验研究了新生小鼠卵巢中RA是否通过抑制MAPK3/1信号通路防止卵泡过度激活以及RA维持原始卵泡库稳定的分子机制。结果显示,RA不影响MAPK3/1的活性和KITL的分泌,表明RA不通过前颗粒细胞中的信号传导来维持原始卵泡库的稳定。最后,我们的研究结果显示RA可以抑制卵母细胞内p-Akt的表达,降低Foxo3的核输出率,表明RA可以通过抑制卵母细胞内的PI3K-Akt信号通路维持原始卵泡库的稳定。综上所述,RA通过抑制卵母细胞内PI3K-Akt信号通路来维持小鼠原始卵泡库的稳定,而MAPK3/1通过前颗粒细胞中的mTORC1-KITL信号传导参与调控原始卵泡的激活。这些发现为阐明原始卵泡激活的分子机理提供了新的科学依据。(本文来源于《中国农业大学》期刊2019-01-01）
蔡晗[6]（2019）在《转录因子SP1调控小鼠原始卵泡形成的机制研究》一文中研究指出原始卵泡作为雌性生殖的基本功能单位,其储备库的建立具有两个特点:一是几乎所有哺乳动物原始卵泡的形成都是在妊娠中后期(如人)或出生前后(如小鼠)完成;二是大量的卵母细胞最终只能形成一定数量的原始卵泡。因此,原始卵泡库是雌性哺乳动物不可再生的生殖资源,原始卵泡形成失败或提早衰竭会引起卵巢早衰(Premature ovarian insufficiency,POI)。原始卵泡的形成是一个卵母细胞与体细胞互作的复杂生理过程,需要多种基因的时空性差异表达。其中,转录因子作为一类调控基因表达和决定细胞命运的关键分子,其在原始卵泡形成中的功能却鲜有报道。本文我们研究了转录因子SP1在小鼠原始卵泡形成中的主要功能及作用机制。研究发现,SP1在小鼠卵巢的卵母细胞及体细胞中均有表达,且表达水平伴随原始卵泡的形成逐渐升高,并在原始卵泡形成完成后表达回落。为了明确SP1在原始卵泡形成中的作用,我们利用慢病毒敲降结合胚胎卵巢体外培养模型发现,敲降Spl显着抑制了小鼠原始卵泡的形成,同时卵母细胞的数量显着增多。进一步利用胚胎卵巢体外重构实验表明,SP1主要在体细胞中发挥功能。为了探究SP1在体细胞中的作用,一方面我们利用Lgr5-EGFP-ires-CreERT2(LGR5-KI)转基因小鼠结合全卵巢敲降模型发现,SP1缺失显着抑制了前颗粒细胞从卵巢表面上皮LGR5阳性细胞的募集;另一方面利用FOXL2阳性细胞特异性敲降模型证明,SP1还调控了前颗粒细胞的维持。进一步的研究发现,与全卵巢敲降Sp1的表型相一致,在前颗粒细胞中特异性敲降SS1显着抑制了原始卵泡形成和卵母细胞凋亡,导致大量卵母细胞以合胞体的形式存在于卵巢中。通过对SP1发挥功能的机制进一步研究证明,体细胞表达的Notch2介导了 SP1对前颗粒细胞发育及原始卵泡形成的调控。体内染色质免疫共沉淀及体外双荧光素酶实验结果表明,SP1可以直接与Notch2启动子区结合进而调控其转录。为了探究由于SP1缺失导致的前颗粒细胞发育受阻是否会影响合胞体中卵母细胞的进一步发育,我们通过体外延长培养时间以及体内肾被膜移植实验发现,在SP1缺失的卵巢中,卵泡和卵母细胞在青春期前发生了大规模丢失,导致POI的发生。同时,在Sp1被沉默的区域,Notch2和FOXL2的表达也出现同步化下调,证明SP1调控的前颗粒细胞发育对于青春期前卵泡的存活也是至关重要的。综上所述,我们的研究证明了 SP1作为一个控制颗粒细胞发育的关键转录因子,通过Notch2介导的信号通路调控了原始卵泡库的建立与维持。这项研究为揭示体内卵泡发育的机理奠定了理论基础;同时,对于促进辅助生殖医学的进步,以及对于因卵泡发育问题而导致的POI等生殖疾病的预防和治疗具有重要的理论指导意义。(本文来源于《中国农业大学》期刊2019-01-01）
朱楠,黄小圆,李金晶,葛红山[7]（2018）在《晚期糖基化终末产物对卵巢原始卵泡的影响》一文中研究指出目的探究晚期糖基化终末产物(AGEs)对原始卵泡激活的影响。方法取4日龄ICR小鼠卵巢,将其分别置于基础培养液(空白对照组)、包含200μg/ml牛血清白蛋白(BSA)培养液(溶剂对照组)以及包含200μg/ml AGE-BSA培养液(AGE-BSA组)中进行体外培养,4d后取材检测。HE染色观察各组卵巢卵泡构成比;免疫蛋白印迹法检测AGEs受体(RAGE)和卵泡激活相关指标细胞增殖核抗原(PCNA);免疫组织化学法检测PCNA定位表达。结果与溶剂对照组相比,AGE-BSA组中生长卵泡构成比增加(P<0.001),同时伴随着卵巢髓质部原始卵泡的出现;AGE-BSA组RAGE、PCNA的蛋白表达较溶剂对照组显着增加(P<0.05),而空白对照组与溶剂对照组间卵泡构成比以及RAGE、PCNA的蛋白表达均无显着差异(P>0.05);免疫组织化学结果显示PCNA表达在卵巢各级卵泡卵母细胞和颗粒细胞中。结论 AGEs可能通过AGEs-RAGE轴激活卵巢内的原始卵泡,促进卵泡池耗竭。(本文来源于《生殖医学杂志》期刊2018年06期）
卓勇[8]（2018）在《FGF21-脂联素分泌轴介导蛋白质营养调控卵巢原始卵泡激活》一文中研究指出静默状态的原始卵泡是储存卵母细胞的基本单位,其数量的高低决定了动物的繁殖寿命。猪卵巢原始卵母细胞数量高达百万,然而终生排出并受孕的卵母细胞仅万分之一,营养及饲养管理不当引起原始卵泡激活不足或过度激活可能是导致母猪繁殖寿命缩短的主要原因之一。细胞内感知营养代谢的关键分子mTOR是唤醒静默状态原始卵泡的必需信号通路,但营养能否通过mTOR影响原始卵泡激活报道较少。新近无脊椎动物上的研究发现,蛋白质(而非碳水化合物和脂质)是影响动物寿命、繁殖衰老的关键营养素,而蛋白质营养能否调控卵巢mTOR信号并影响原始卵泡激活及繁殖寿命尚不清楚。肝脏表达与分泌的FGF21是反映蛋白质营养状态的关键代谢信号,可显着影响细胞内的mTOR信号,但FGF21能否参与蛋白质营养调控卵巢mTOR信号及原始卵泡激活未见报道。鉴于此,本论文首先以母猪和小鼠为模型,明确蛋白限制及过量对卵巢原始卵泡激活的影响;进一步通过卵巢体外培养、转基因小鼠模型、关键营养信号的外源干预等手段,探明蛋白质营养对卵巢原始卵泡激活的调控效应及机制。研究分为5个试验:试验一,饲粮蛋白限制对后备母猪原始卵泡激活及卵母细胞质量的影响。选择40头90日龄体重33kg的LY后备母猪,分别饲喂NRC推荐的正常蛋白(NP,100%SIDLys,n = 20)或蛋白限制(LP,50%SIDLys,n = 20)的饲粮,结果发现:(1)与NP组母猪相比,LP母猪不同时间点的血液中FGF21浓度显着上升;(2)与NP组母猪相比,与对照组相比,LP组后备母猪初情日龄推迟9.9天(P =0.14),初情体重降低8.71kg(P<0.05),初情背膘增加1.78mm(P<0.05)。(3)日粮处理30天时分析母猪卵巢形态学,与NP组相比,LP组母猪卵巢原始卵泡比例显着增加(68.74 vs 80.39%,P= 0.012),初级卵泡(20.87 vs 15.47%,P= 0.062)和次级卵泡(9.46vs 3.31%,P = 0.040)的比例显着降低,但不影响卵巢表面直径为1～3mm有腔卵泡的数量;日粮处理至第叁情期屠宰时分析母猪卵巢形态学,NP和LP组母猪各级卵泡的比例差异不显着,且不影响卵巢表面直径为1～3mm有腔卵泡的数量,以及直径≥3mm的大卵泡的数量;(4)日粮处理至第叁情期时,选择NP和LP组母猪卵巢上直径≥3mm的大卵泡卵母细胞卵丘细胞复合物(COCs)进行体外培养,发现NP和LP组母猪COCs的体外卵丘扩散率、卵母细胞极体排出率影响差异不显着,说明卵母细胞质量未受到日粮处理的影响;(5)通过WB检测日粮处理30天和第叁情期母猪卵巢与原始卵泡激活相关的蛋白表达,与NP组母猪相比,LP组母猪卵巢mTOR及其下游靶蛋白S6的磷酸化水平显着下降,与颗粒细胞增殖和卵母细胞生长相关蛋白ERK1/2的磷酸化水平显着下降、AMPK磷酸化水平显着上调;以上结果说明:(1)饲粮蛋白限制降低母猪卵巢原始卵泡的激活,但不影响卵母细胞质量;(2)血液FGF21浓度下降及卵巢mTORCl信号下调可能是饲粮蛋白限制降低卵巢原始卵泡激活的原因。试验二,蛋白限制及过量对小鼠原始卵泡激活及终生繁殖力的影响。选择520只4周龄C57BL/6雌鼠为研究模型,分别饲喂蛋白限制(LP,CP8%)、正常蛋白(NP,CP20%)、蛋白过量(HP,CP50%)叁种日粮,日粮处理4周、12周、24周、48周后收集卵巢(n=8～10)检测原始卵泡与生长卵泡的数量及比例、卵巢蛋白表达,并在日粮处理12周、24周、48周后每个处理组选择20只雌鼠进行配种试验,结果发现:(1)蛋白限制显着提高日粮处理不同时间点的肝脏Fgf21基因表达及血液FGF21浓度,蛋白过量显着降低肝脏Fgf21基因表达及血液FGF21浓度;蛋白限制提高脂肪组织Adiponectin基因表达及血液脂联素浓度,蛋白过量显着降低脂肪组织Adiponectin基因表达及血液脂联素浓度;(2)通过HE染色分析卵巢形态学,发现蛋白限制显着降低卵巢原始卵泡激活,表现在:卵巢原始卵泡数量和比例显着增加、初级卵泡数量和比例显着下降、初级卵泡与原始卵泡相对比例显着下降;相反,蛋白过量显着增加卵巢原始卵泡激活,表现在:卵巢原始卵泡数量和比例显着下降、初级卵泡数量和比例显着上升、初级卵泡与原始卵泡相对比例显着增加;此外,蛋白限制显着降低闭锁卵泡数量及比例,蛋白过量显着增加闭锁卵泡数量及比例;(3)卵母细胞内Pten,Lhx8,Foxo3a是维持原始卵泡静默状态的关键基因,日粮处理4周后,蛋白限制不同程度地上调卵母细胞内Pten,Lhx8,Foxo3a的基因表达,而蛋白过量不同程度地降低了卵母细胞内Pten,Lhx8,Foxo3a的基因表达;(4)日粮处理显着影响卵巢上与原始卵泡激活相关的蛋白表达:蛋白限制显着下调卵巢mTOR及其下游靶蛋白S6的磷酸化水平,且下调了颗粒细胞增殖和卵母细胞生长相关蛋白ERK1/2的磷酸化水平;蛋白过量显着上调卵巢mTOR、S6、ERK1/2的磷酸化水平;(5)通过免疫组化法检测日粮处理4周小鼠卵巢的磷酸化蛋白表达可知,卵巢上磷酸化的S6蛋白主要表达在卵母细胞,而在颗粒细胞中的表达较低;(6)日粮处理4周、12周、24周、48周后,每个处理组选择12-20只雌鼠进行排卵数测试,结果发现日粮处理4周、12周、24周对各处理组小鼠排卵数影响差异不显着,但是日粮处理48周后,HP组小鼠排卵数显着低于LP组;(7)日粮处理12周后每组选择20只小鼠开展连续32周的配种测试,结果发现各处理组小鼠的累计分娩胎次(LP:5.74、NP:6.32、HP:5.55)差异不显着,LP组小鼠在配种后16周、20周、24周内的累计产仔数显着低于NP组,而28周和32周内的累计产仔数各处理组之间差异不显着;日粮处理24周后开展连续28周的配种测试,结果发现LP组小鼠的累计分娩胎次具有显着高于HP组的趋势(3.78vs 2.64,P = 0.081),且HP组小鼠28周内的累计产仔数具有显着低于NP和LP组的趋势(= 0.067);日粮处理48周后每组选择20只小鼠开展连续8周的配种测试,结果发现LP组小鼠第一胎次分娩的比例显着高于HP组(35%vs 5%,P<0.05),且连续配种8周后LP组小鼠累计产仔数高于HP组(25只vs2只);以上结果说明:(1)蛋白限制降低卵巢mTORCl信号并抑制原始卵泡激活,蛋白过量上调卵巢mTORCl信号并促进原始卵泡激活;(2)短期(12周)饲喂蛋白过量日粮不损害繁殖力,长期蛋白过量降低卵泡库并损害繁殖力。试验叁,蛋白质营养信号对体外培养卵巢原始卵泡激活的调控及机制。以体外培养新生小鼠卵巢为模型,考察蛋白质营养叁种关键代谢信号(氨基酸、FGF21、脂联素)对体外培养卵巢原始卵泡激活的影响。(1)根据试验二饲喂LP、NP、HP日粮小鼠餐后血液氨基酸组成,设计不同氨基酸水平(LP-AA:3.93 mM,LP-AA:5.14 mM,LP-AA:7.74 mM)的培养基,考察氨基酸水平(无氨基酸、LP-AA、LP-AA、LP-AA)对体外培养卵巢原始卵泡激活及相关蛋白表达的影响,结果发现无氨基酸处理显着抑制了体外培养卵巢原始卵泡的激活,mTOR及下游靶蛋白S6的磷酸化水平显着下调,而LP-AA、LP-AA、LP-AA各处理组间卵巢原始卵泡激活、mTOR、S6蛋白磷酸化水平影响差异不显着;(2)设计不同浓度的FGF21(0,50,200,I000ng/ml)处理体外培养卵巢,发现FGF21对体外培养卵巢原始卵泡激活、mTORCl信号通路关键蛋白表达影响差异不显着;(3)设计不同浓度脂联素(0,5,15,30μg/ml)处理体外培养卵巢,发现脂联素(15,30μg/ml)处理显着抑制了卵巢原始卵泡的激活,同时卵巢AMPK磷酸化水平显着上调,mTOR及下游靶蛋白S6磷酸化水平显着下降;研究进一步使用AMPK信号抑制剂Compound C处理体外培养卵巢,考察AMPK信号在脂联素调控卵巢原始卵泡激活中的作用,结果发现Compound C虽然显着抑制了脂联素引起的AMPK磷酸化,但是并未恢复S6的磷酸化及原始卵泡的激活至对照组水平;以上结果说明:(1)氨基酸是卵巢原始卵泡激活的必需营养素,但是当氨基酸满足原始卵泡激活的基本需求后,再增加氨基酸水平对原始卵泡的激活没有影响;(2)FGF21不能直接作用于卵巢调控原始卵泡激活;(3)脂联素能够抑制体外培养卵巢原始卵泡的激活,该过程不依赖AMPK信号。试验四,肝脏FGF21在蛋白质营养调控卵巢原始卵泡激活中的作用。由于肝脏分泌FGF21的首要靶器官是脂肪组织,且研究已经证实FGF21对代谢的调控依赖脂联素的表达与分泌,因此本试验采用FGF21肝脏特异性敲除(FGF21LKO)小鼠为模型,验证蛋白质营养关键信号FGF21是否通过脂联素间接调控原始卵泡激活。选择28日龄野生型(WT)及FGF21LKO小鼠,采用2×3因子设计,对WT和FGF21LKO小鼠饲喂LP、NP、HP叁种日粮,日粮处理12周后考察血液激素分泌、卵巢卵泡发育及蛋白表达,结果发现:(1)蛋白限制显着增加脂肪组织Adiponectin基因表达及血液脂联素浓度,肝脏FGF21敲除后,蛋白限制组小鼠脂肪组织Adiponectin基因表达及血液脂联素浓度恢复至NP组水平;(2)蛋白限制显着增加野生型小鼠卵巢原始卵泡的数量和比例,降低初级卵泡的比例,蛋白过量显着降低野生型小鼠卵巢原始卵泡的数量和比例,增加初级卵泡的数量和比例;肝脏FGF21敲除后,各处理组原始卵泡和初级卵泡的数量和比例差异不显着。(3)日粮处理、肝脏FGF21、肝脏FGF21与日粮交互效应显着影响了卵巢mTOR蛋白磷酸化水平,肝脏FGF21敲除后,NP和HP组小鼠卵巢mTOR蛋白磷酸化水平进一步提高;饲喂LP日粮的野生型小鼠卵巢S6蛋白磷酸化显着低于NP和HP组,但肝脏FGF21敲除后,各处理组小鼠卵巢S6磷酸化水平差异不显着。以上结果说明:(1)肝脏FGF21参与了蛋白质营养调控原始卵泡激活;(2)蛋白限制降低原始卵泡激活的原因,与FGF21刺激脂联素的表达与分泌有关。试验五,脂联素受体激动剂AdipoRon对卵巢原始卵泡过度激活的保护效应。鉴于体外试验及动物试验均已证明脂联素参与蛋白质营养调控卵巢原始卵泡激活,本试验考察外源处理脂联素受体激动剂AdipoRon能否保护蛋白过量引起的原始卵泡过度激活。本试验分为两部分:(1)首先通过体外卵巢培养试验,比较了 AdipoRon与脂联素对卵巢原始卵泡激活及mTORCl信号的影响,结果发现:脂联素的处理浓度为15和30μg/ml时,显着上调了 AMPK磷酸化水平,下调S6的磷酸化水平,原始卵泡的激活受到显着抑制;AdipoRon的处理浓度为25mM和50mM时,显着上调了 AMPK磷酸化水平,下调S6的磷酸化水平,原始卵泡的激活受到显着抑制,说明AdipoRon与脂联素在抑制原始卵泡激活及mTORCl信号方面具有相似的调控效应;(2)研究进一步采用2×3因子设计,对LP、NP、HP日粮处理的28日龄雌性小鼠,按50mg/kg.天的剂量,进行连续28天的AdipoRon灌胃处理,研究发现:未进行AdipoRon处理时,LP组小鼠原始卵泡数量和比例显着高于NP和HP组,初级卵泡比例显着低于HP组,mTORCl信号显着下调,AMPK信号显着上调;进行AdipoRon处理后,HP组小鼠原始卵泡数量和比例降低至LP组水平,且各处理组间卵巢mTOR、S6、AMPK蛋白磷酸化水平差异不显着;以上结果说明:脂联素受体激动剂AdipoRon与脂联素对卵巢原始卵泡激活具有相似的调控效应,外源处理AdipoRon能够防止蛋白过量引起的原始卵泡过度激活。基于试验一至试验五的结果,本论文得到以下结论:(1)蛋白限制降低原始卵泡激活,蛋白过量增加原始卵泡激活;(2)卵巢mTORCl信号是蛋白质营养调控原始卵泡激活的关键信号;(3)蛋白限制增强肝脏FGF21分泌,蛋白过量降低肝脏FGF21分泌,FGF21通过影响脂联素的分泌间接调控卵巢mTORCl信号及原始卵泡激活。(本文来源于《四川农业大学》期刊2018-06-01）
文佳[9]（2018）在《GSK-3β调控小鼠卵母细胞第一次减数分裂与原始卵泡形成机制的研究》一文中研究指出成年雌性哺乳动物的卵巢中不存在生殖干细胞资源,因而出生前后卵巢中形成的原始卵泡库容量就成为其终生可利用的生育力资源。在胚胎期卵巢中,卵母细胞经历第一次减数分裂前期后阻滞于核网期,随后少部分的单个未成熟的卵母细胞被周围的扁平颗粒细胞包裹,形成原始卵泡,而大多数卵母细胞死亡丢失。胚胎期卵母细胞减数分裂异常将直接导致原始卵泡库建立障碍。因此,探究胚胎卵母细胞内精确的分子调控网络对于更好地理解雌性生殖储备的建立具有重要意义。糖原合成激酶3β(GSK-3β)是一种高度保守的丝、苏氨酸激酶,在细胞内发挥多种催化作用。已知GSK-3β通过磷酸化不同的底物,参与调控细胞内的蛋白合成、细胞增殖与分化、微管动力以及细胞凋亡等生理过程。然而,关于GSK-3β在早期卵母细胞发生以及原始卵泡库建立过程中的功能研究仍然空缺。针对这一科学问题,我们展开了以下研究工作。免疫荧光检测结果证明,GSK-3β在小鼠胚胎期与新生前后卵巢中表达广泛,分布于体细胞与卵母细胞的胞质,而卵母细胞内GSK-3β的活性随胚胎卵巢发育进程呈现下调趋势。在功能探究实验中,通过体外培养添加GSK-3β特异性抑制剂BIO后发现,抑制GSK-3β活性的胚胎卵巢中处于第一次减数分裂前期的卵母细胞发生大量凋亡,导致卵巢卵母细胞数量显着少于对照组卵巢。对卵母细胞减数分裂进程的研究发现,抑制GSK-3β后,胚胎卵母细胞减数分裂进程受阻,部分卵母细胞无法进入双线期;同时DSBs修复异常的卵母细胞比例显着增加。通过对DNA损伤检验点蛋白的研究发现,抑制GSK-3β活性后,在胚胎卵巢中负责卵母细胞质量监管及执行凋亡的β63异常地在卵母细胞中提前表达,同时下游凋亡执行相关基因的表达也发生显着上调。进一步的机制研究发现:胚胎期卵母细胞内GSK-3β通过磷酸化β-catenin介导了 β63的转录;GSK-3β受抑制后,β-catenin降解受阻,在胞质积累后发生入核,激活β63的转录,造成胚胎卵母细胞凋亡。当我们同时拮抗β-catenin的转录活性时,卵母细胞凋亡的现象能够得到拯救。另外,在体实验证明,在小鼠胚胎期与新生前后的卵母细胞中,β-catenin的转录活性与β63的表达上调趋势一致,揭示在卵母细胞第一次减数分裂前期,GSK-3β通过磷酸化降解β-catenin,从而维持卵母细胞的存活;而出生前后原始卵泡大量形成阶段,GSK-3β活性下调,β-catenin的转录活性上升,激活β63转录,监管卵母细胞质量并清除有遗传缺陷的卵母细胞。为了证明上述体外研究发现的GSK-3β调控卵母细胞存活的作用,本研究进一步采用体内基因敲除小鼠模型验证了 GSK-3β在早期卵母细胞发生过程中的必要性。通过构建Cre-LoxP条件性敲除小鼠模型,我们得到在生殖细胞中特异性敲除Gsk-3β的小鼠(conditional KO;cKO)。表型分析显示,新生1天时,cKO小鼠卵巢卵母细胞数量明显少于野生型小鼠,与体外使用GSK-3β抑制剂培养胚胎期卵巢的结果一致;至新生7天时,cKO小鼠卵巢生长卵泡数量与野生型小鼠无显着差异,但原始卵泡数量显着少于野生型小鼠。同时我们证明,cKO小鼠卵巢卵母细胞发生显着的凋亡。另外,在新生1天cKO小鼠卵巢中,DSBs标记蛋白与修复蛋白持续表达,表明敲除小鼠卵母细胞DSBs修复发生了障碍。综上,本研究证明在小鼠胚胎期卵巢内,GSK-3β对于第一次减数分裂前期的卵母细胞的存活具有重要作用。GSK-3β通过调控β-catenin的转录活性,影响β63的时空特异性表达模式,进而维持减数分裂前期进程的正常进行。上述研究结果对于阐明减数分裂的调控机制以及卵巢生殖储备的建立机制具有重要科学意义。(本文来源于《中国农业大学》期刊2018-06-01）
黄堃[10]（2018）在《CAV1和JAK在原始卵泡形成中的功能与机制研究》一文中研究指出卵泡是雌性哺乳动物卵巢的基本结构和功能单位,其在雌性哺乳动物的生殖活动中发挥重要作用。原始卵泡库的大小决定了雌性哺乳动物一生的生殖能力。原始卵泡由扁平状的前体颗粒细胞包裹单个卵母细胞形成,因此前体颗粒细胞和卵母细胞的生长发育对于原始卵泡形成至关重要。本论文工作主要探讨小窝蛋白CAVEOLIN1(CAV1)和非受体酪氨酸激酶Janus kinase(JAK)家族蛋白参与小鼠卵巢合胞体破裂和原始卵泡形成的调控机制。Western blot实验发现CAV1在合胞体破裂初期的17.5 dpc(days post coitum)达到高峰,1 dpp(dayspostpartum)显着降低,添加特异性敲降CAV1的反义吗琳寡核苷酸morpholino(CAV1 MO)体外培养,发现卵巢中大量卵母细胞滞留在合胞体结构中,原始卵泡数量显着下降,表明CAV1调控合胞体破裂和原始卵泡形成。免疫荧光结果显示,CAV1表达于卵巢上皮和皮质区颗粒细胞前体细胞中,与LGR5阳性细胞共定位。在CAV1 MO处理的卵巢中,LGR5阳性细胞增殖数量显着下降,Lgr5表达显着下调。用干扰CAV1蛋白表达的慢病毒载体侵染卵巢上皮得到同样的结果。以上结果表明,CAV1调控卵巢上皮中LGR5阳性细胞增殖。进一步研究发现在CAV1 MO处理的卵巢中LGR5和FOXL2双阳性细胞数量显着下降,Foxl2表达明显下调,表明抑制CAV1蛋白表达导致卵巢皮质区FOXL2阳性细胞募集减少。在本研究中,抑制CAV1蛋白表达导致NOTCH2蛋白及其靶基因的表达减弱,表明在合胞体破裂过程中CAV1调控Notch2信号通路的表达。进一步实验证明抑制Notch2信号通路后卵巢上皮LGR5阳性细胞的增殖减少,表明CAV1可能通过Notch2信号通路调控卵巢上皮LGR5阳性细胞增殖和募集。此外,本实验在早发性卵巢功能不全(Premature Ovarian Insufficiency,POI)病人卵巢外周血中检测到C4V1基因突变c.142G>C(p.E48Q)。细胞增殖实验证明CAV1E8Q突变导致293T细胞增殖能力下降,细胞中NOTCH2表达量减弱。综上,CAV1通过Notch2信号通路调控颗粒细胞的来源和募集,进而参与合胞体破裂和原始卵泡形成:同时发现CAV1可能是人类早发性卵巢功能不全的潜在致病基因。同时我们还发现,JAK家族成员JAK2和JAK3在原始卵泡形成过程中表达量较高,Western blot结果表明JAK2和JAK3蛋白活性和总蛋白水平持续上升,免疫荧光结果显示JAK2和JAK3主要表达在小鼠卵巢的卵母细胞胞质中。通过添加JAK2或JAK3特异性抑制剂体外培养卵巢,发现卵巢中多卵子卵泡数量显着增加,合胞体不能破裂,原始卵泡显着减少。抑制JAK2表达的卵巢中卵母细胞数量显着增加,而抑制JAK3表达的卵巢中卵母细胞数量没有明显变化。进一步实验证明JAK2通过p53来调控卵母细胞的凋亡,从而影响卵巢中卵母细胞数量;而JAK3通过影响Notch2信号通路来调控卵巢上皮LGR5阳性细胞的增殖,进而控制颗粒细胞的数量。结果表明JAK2和JAK3通过不同的调控机制参与合胞体破裂和原始卵泡形成。本论文工作部分揭示了颗粒细胞来源的CAV1和卵母细胞来源的JAK在合胞体破裂和原始卵泡形成过程中的功能和机制,并发现CAV1可能是人类早发性卵巢功能不全的潜在致病基因,不仅为卵泡形成机制研究提供了新的理论依据,也为3乳动物卵巢疾病的临床治疗提供新的方案。(本文来源于《中国农业大学》期刊2018-06-01）
原始卵泡论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的探讨原始卵泡池的动态变化和精神压力对妇女自然绝经年龄的影响,为女性生殖健康提供预防和干预措施。方法选取2015年7月至2018年3月江西省11个地区市、10个县级市、70个县,采取分层、整群概率比率的方法抽取50个样本群(包括城区25个街道、郊区25个乡),对样本群中40～65岁的围绝经期妇女(n=16 597)进行问卷调查,内容包括初潮年龄、月经周期、绝经年龄、生育胎数、哺乳时长和化疗药物使用情况,以及体质指数的测定。将120例围绝经期妇女按绝经年龄分为≤50岁组和>50岁组,每组60例。对2组采用精神压力分析系统进行测评,对自然绝经年龄影响因素采用多元线性回归分析。结果多元线性回归分析结果显示,初潮年龄、月经周期、生育胎数、哺乳时长和化疗药物使用均不是自然绝经年龄的影响因素,而BMI是自然绝经年龄的影响因素。≤50岁组生理压力指数、心理压力指数均高于>50岁组(均P<0.01)。结论影响卵泡池的因素与自然绝经年龄无关,体质量和精神压力能使绝经年龄提前。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
原始卵泡论文参考文献
[1].曾靖雯,李小琴,叶友斌,刘瑾.2,5-己二酮对小鼠原始卵泡发育的影响及其机制探讨[C].2019全国呼吸毒理与卫生毒理学术研讨会论文集.2019
[2].洪雯丽,付歆欣,黄瑶琪,钟志胜,郑月慧.原始卵泡池和精神压力对妇女自然绝经年龄的影响[J].南昌大学学报(医学版).2019
[3].洪雯丽,黄瑶琪,祝费隐,郑月慧,李佳.PTEN调控大鼠原始卵泡启动和生长[J].基础医学与临床.2019
[4].梁菁媛,邓彦飞,赵易敏,朱剑宗,程隽如.哺乳动物原始卵泡体外培养与激活调控研究进展[J].中国畜牧杂志.2019
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[8].卓勇.FGF21-脂联素分泌轴介导蛋白质营养调控卵巢原始卵泡激活[D].四川农业大学.2018
[9].文佳.GSK-3β调控小鼠卵母细胞第一次减数分裂与原始卵泡形成机制的研究[D].中国农业大学.2018
[10].黄堃.CAV1和JAK在原始卵泡形成中的功能与机制研究[D].中国农业大学.2018
论文知识图
