导读:本文包含了残耳软骨细胞论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:软骨,细胞,干细胞,组织,工程,脂肪,支架。
残耳软骨细胞论文文献综述
于瑶,殷宗琦,李丹,周广东,曹谊林[1](2019)在《人耳软骨细胞冻存复苏后的体外成软骨能力及体内转归的研究》一文中研究指出目的以无支架软骨膜片为模型,研究冻存对人耳软骨细胞的细胞活力、增殖和体外/体内软骨再生能力的影响。方法将小耳畸形患者术中废弃的残耳软骨,以胶原酶消化、分离,得到原代软骨细胞。将软骨细胞扩增至第1代(P1)后,分为实验组及对照组。实验组(Exp)以含有FBS和DMSO的冻存液,经程控降温仪和液氮冻存1个月后复苏,高密度接种,制备软骨膜片及可注射软骨;对照组(Ctrl)不经冻存继续扩增至第3代(P3),高密度接种,制备软骨膜片及可注射软骨。通过光学显微镜、CCK-8、活/死细胞染色、HE和阿利新蓝染色等,检测细胞形态、活力、增殖能力及软骨特异基质(ECM)的表达能力。通过每组体外软骨膜片的湿重、体积及生化成分定量检测,确定软骨细胞的体外成软骨能力。将每组软骨膜片制成新生软骨颗粒(可注射软骨),注射至裸鼠皮下(n=5),8周后取材,行大体观察、HE染色和生化成分定量检测,比较每组软骨细胞的体内成软骨能力。结果两组细胞的形态、活力、增殖能力和软骨特异的糖胺聚糖(GAG)形成能力无明显差异。相比对照组,实验组体外再生软骨的湿重及总胶原表达升高;但体内软骨再生能力两组亦无明显差异。结论细胞冻存复苏对人耳软骨细胞的细胞活力、增殖和体外/体内软骨再生能力无明显影响。(本文来源于《组织工程与重建外科杂志》期刊2019年03期)
蔡震,蒋海越[2](2017)在《残耳软骨细胞诱导脂肪来源干细胞体内软骨的形成》一文中研究指出背景:先天性小耳畸形残耳软骨细胞从细胞数量和质量上难以作为种子细胞构建出正常人耳郭大小的同质耳软骨支架。目的:探讨残耳软骨细胞能否在裸鼠体内非软骨环境下模拟软骨诱导微环境,促进脂肪来源的干细胞向软骨分化并形成组织工程软骨,从而为解决组织工程化人耳郭软骨支架制备做基础准备工作。方法:(1)实验分为4组:第2代残耳软骨细胞与第3代脂肪来源的干细胞以3∶7比例混合作为共移植组,单纯残耳软骨细胞作为阳性对照组(残耳软骨细胞组),单纯脂肪来源的干细胞作为阴性对照组(脂肪干细胞组),以上3组接种细胞终浓度为5.0×10~(10) L~(-1),低浓度残耳软骨细胞对照组细胞终浓度为1.5×10~(10) L~(-1);(2)按照实验分组将0.2 mL细胞-Pluronic-F127复合物注射到裸鼠背部皮下,体内培养8周后对新生组织进行大体观察、湿质量测量、糖胺多糖含量测定、组织学及免疫组化染色检测。结果与结论:(1)共移植组平均湿质量达到残耳软骨细胞组的80%以上;低浓度残耳软骨细胞对照组平均湿质量低于残耳软骨细胞组的30%;(2)共移植组和残耳软骨细胞组的平均湿质量和糖胺多糖平均含量均显着高脂肪干细胞组和低浓度残耳软骨细胞对照组(P<0.05);(3)组织学染色:共移植组、残耳软骨细胞组与低浓度残耳软骨细胞对照组标本均有成熟的软骨陷窝形成,低浓度残耳软骨细胞对照组软骨陷窝松散排列不均,胞外基质着色淡;脂肪干细胞组为纤维样组织,未见软骨陷窝形成;(4)Ⅱ型胶原免疫组化染色:共移植组、残耳软骨细胞组与低浓度残耳软骨细胞对照组可见成熟软骨陷窝周围有不同程度的棕黄色沉淀即Ⅱ型胶原表达;脂肪干细胞组未见Ⅱ型胶原表达;(5)结果提示,残耳软骨细胞能够在裸鼠体内非软骨环境下模拟软骨诱导微环境,促进脂肪干细胞向软骨分化并生成组织工程软骨。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2017年21期)
康宁,刘霞,曹谊林,肖苒[3](2014)在《单例先天性小耳残耳软骨细胞体外构建人耳廓软骨》一文中研究指出目的探讨单例先天性小耳残耳软骨细胞体外构建正常人大小耳廓形态组织工程软骨的可行性。方法分离40例小耳畸形患者残耳软骨细胞统计细胞提取率;MTT法检测细胞增殖能力、计算扩增效率;免疫荧光和PCR检测不同代数细胞的软骨表型。分别应用3例患者各自的残耳软骨细胞培养至P3~P4代,藻酸盐凝胶包埋接种于正常人大小耳廓形态的聚羟基乙酸/聚乳酸支架,体外成软骨诱导动态培养10周后行组织学染色观察。结果耳软骨细胞提取率为(3.90±1.27)×106/g;在增殖培养基中细胞增殖能力明显提高,至P4代扩增(328.4±50.4)倍(P<0.05);P3代细胞Ⅱ型胶原、蛋白聚糖表达显着减弱,至P4代消失,Ⅰ型胶原表达增强;体外培养10周,实验组形成了耳廓形态的类软骨组织,可见典型软骨陷窝,番红O、甲苯胺蓝及Ⅱ型胶原染色阳性;对照组明显变形,未形成软骨结构。结论单例先天性小耳残耳软骨细胞经体外扩增和动态诱导培养可在体外构建正常人大小耳廓软骨。(本文来源于《基础医学与临床》期刊2014年05期)
康宁,刘霞,曹谊林,肖苒[4](2013)在《传代对残耳软骨细胞体内软骨形成能力的影响》一文中研究指出目的研究传代对残耳软骨细胞体内软骨形成能力的影响。方法分离培养人残耳软骨细胞,将第3~8代细胞分别复合聚羟基乙酸/聚乳酸支架,构建组织工程化软骨;体外培养4周后植入裸鼠体内观察8周。采用组织学染色观察各组标本的软骨形成情况;Real-time PCR检测软骨分化相关基因的表达;生物力学分析新生软骨的弹性模量。结果各代复合物体外培养4周时均不能形成软骨组织,但第3~5代残耳软骨细胞COL 2A1、第3~4代的SOX 9和第3代的DLK 1仍可维持较高的表达水平(P<0.05);体内植入8周后,第3~6代复合物均有不同程度的弹性软骨结构形成,并随代次增高而减少,第3~6代复合物的弹性模量明显高于第7、8代。结论残耳软骨细胞传至第4代仍能保持良好的体内软骨形成能力,但扩增传代对残耳软骨细胞软骨表型去分化的影响在第7代后已无法逆转。(本文来源于《组织工程与重建外科杂志》期刊2013年06期)
谢波,丁文峰,平亦雯,高庆华[5](2013)在《改良组织块法培养原代兔耳软骨细胞》一文中研究指出通过改良组织块细胞培养法,建立一种简单、经济、可行的兔软骨细胞系体外培养方法。从6只家兔耳缘同一部位取下6块软骨组织样,随机分为2组,改良组使用酶消化法结合组织块体外培养兔耳软骨细胞,对照组使用传统的组织块法,对比两种方法中组织块的贴壁、生长、分裂及增殖状况。与对照组相比,改良的组织块法中组织块贴壁时间从24 h缩短至6 h,贴壁后新生软骨细胞游离出的时间从48 h缩短至24 h,软骨细胞的整齐度从92%提高至98%。(p<0.05)。改良的组织块法较传统的组织块法在软骨细胞培养中具有显着优势,适于建立简易的兔耳软骨细胞系体外培养方法。(本文来源于《塔里木大学学报》期刊2013年02期)
蔡震,潘博,林琳,蒋海越,庄洪兴[6](2013)在《残耳软骨细胞诱导脂肪来源干细胞体外软骨形成实验研究》一文中研究指出目的探讨残耳软骨细胞能否在体外模拟软骨诱导微环境,促进脂肪来源干细胞(adipose derived stemcells,ADSCs)向软骨分化并形成软骨样组织。方法取外耳再造术中废弃的先天性小耳畸形患者残耳软骨组织与皮下脂肪组织分离培养,分别收集第2代残耳软骨细胞与第3代ADSCs,以3∶7比例混合培养作为实验组(A组),单纯残耳软骨细胞和单纯ADSCs作为对照(分别为B组和C组)。取各组细胞1.0×106个离心培养获得细胞球后,体外培养28 d,大体观察各组细胞球取材时的外观变化,测量湿重;阿利辛蓝比色法检测糖胺多糖(glycosaminoglycan,GAG)含量;RT-PCR检测各组标本的Ⅱ型胶原、蛋白聚糖(Aggrecan)mRNA表达;并行HE、甲苯胺蓝、番红O组织学观察及Ⅱ型胶原免疫组织化学检测。结果体外培养28 d后,A、B组标本形成白色半透明圆盘状组织块,表面光滑,弹性可;C组标本组织块有明显收缩,呈黄色球状,无弹性。A、B组标本湿重及GAG含量显着高于C组(P<0.05);A、B组间差异无统计学意义(t=1.820 3,P=0.068 7;t=1.861 4,P=0.062 7)。RT-PCR检测示A、B组标本均可见Ⅱ型胶原与Aggrecan mRNA条带清晰表达,C组未见明显表达;A、B组Ⅱ型胶原与Aggrecan mRNA表达均显着高于C组(P<0.05),A、B组间差异无统计学意义(t=1.457 6,P=0.144 9;t=1.519 5,P=0.128 6)。组织学观察示:A组与B组细胞球标本形成了大量软骨陷窝样结构,细胞外基质均有不同程度染色;C组细胞球标本组织内主要为纤维性成分,未见软骨陷窝,细胞外基质染色阴性。A、B组可见在软骨陷窝周围有不同程度棕黄色沉淀即Ⅱ型胶原表达,C组未见明显表达;A、B组灰度值显着低于C组(P<0.01),A、B组间差异无统计学意义(t=1.661 5,P=0.097 0)。结论残耳软骨细胞可在体外独立模拟软骨诱导微环境,促进ADSCs软骨定向分化并形成软骨组织。(本文来源于《中国修复重建外科杂志》期刊2013年01期)
吴军成,吕仁荣,霍然[7](2012)在《兔骨髓间充质干细胞与异体脱细胞耳软骨支架的体外复合(英文)》一文中研究指出背景:耳软骨作为脱细胞基质可选择的支架,进行脱细胞处理可去除了软骨细胞的抗原性,从而与种子细胞具有良好的相容性。目的:体外提取、培养兔骨髓基质干细胞,并与异体脱细胞耳软骨支架复合,观察其生物相容性。方法:提取兔骨髓间充质干细胞行体外培养,诱导为软骨细胞,以胰蛋白酶-曲拉通联合法获得脱细胞软骨支架,将两者于体外复合,10d后复合支架固定行组织学染色及扫描电镜观察。结果与结论:兔骨髓间充质干细胞体外诱导14d可形成软骨细胞,Ⅱ型胶原免疫细胞化学示胞浆呈棕黄色;兔耳软骨脱细胞基质呈乳白色,组织学染色及扫描电镜观察示经脱细胞后支架孔隙均匀,结构完整,仍保存大量酸性黏多糖及胶原成分。其孔径长度(33.70±4.33)μm,孔隙率(65.23±7.35)%。复合支架组织学染色及扫描电镜示两者黏附良好,并伴有多量基质分泌。说明兔骨髓间充质干细胞诱导为软骨细胞与异体脱细胞耳软骨有良好的生物相容性。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2012年08期)
张洁[8](2011)在《先天性小耳畸形残耳软骨细胞与脂肪干细胞共培养构建组织工程软骨的实验研究》一文中研究指出第一部分残耳软骨细胞诱导脂肪干细胞向软骨分化的实验研究目的研究ADSCs的体外生长的生物学特性及其作为软骨组织工程种子细胞的可行性。方法利用先天性小耳畸形患者外耳再造手术中废弃的残耳软骨组织与脂肪组织,胶原酶消化法从组织中提取脂肪干细胞,体外传代培养及生物学特性研究:细胞形态学观察,细胞生长曲线测定,流式细胞仪检测脂肪干细胞表面标志物,多向分化诱导检测,其向软骨、骨、脂肪及内皮多向分化诱导能力检测。胶原酶消化法从组织中提取残耳软骨细胞、脂肪干细胞,脂肪干细胞与残耳软骨细胞隔离共培养,检测残耳软骨细胞微环境能否诱导脂肪干细胞向软骨方向分化:Alcian Blue染色;RT-PCR检测Collagen II基因及Aggrecan基因的表达。结果ADSCs呈成纤维细胞样生长,生长旺盛;流式细胞仪检测显示:CD44,CD105阳性, CD34,CD45,CD106,CD117为阴性;成骨诱导茜素红染色显示钙化基质沉积表达;成脂肪诱导油红-0染色阳性,胞浆内见脂滴形成;成软骨诱导细胞聚集成小团块,番红0染色显示蛋白聚糖表达阳性。结论成功分离培养出脂肪干细胞,ADSCs生长增殖能力强,高表达干细胞相关抗原,可长期传代,具有多向分化潜能可向软骨,骨,脂肪等多个方向分化,可作为组织工程软骨构建的种子细胞。残耳软骨细胞能够在体外模拟软骨诱导微环境,促进ADSCs向软骨分化。第二部分残耳软骨细胞与脂肪干细胞共培养体内构建软骨的实验研究目的残耳软骨细胞与ADSCs在裸鼠体内构建组织工程软骨最佳细胞比的初步研究。方法实验分组:第2代残耳软骨细胞与第3代ADSCs以1:9的比例混合作为实验组(Exp1),以3:7的比例混合作为实验组(Exp2),以5:5的比例混合作为实验组(Exp3),单纯残耳软骨细胞作为阳性对照组(Ctrl.1),单纯ADSCs作为阴性对照组(Ctrl.2),Exp1、Exp2、Exp3、Ctrl.1和Ctrl.2组接种细胞终浓度为5.0×107/ml,单纯低密度残耳软骨细胞对照组(Ctrl.3)细胞终浓度为2.5×107/ml。每组按各自的细胞浓度1将0.2ml的细胞量与Pluronic-F127复合物混合后注射到裸鼠背部皮下,每组接种6只裸鼠。体内培养10周后取材,通过对新生组织的大体观察、湿重比较、糖胺多糖含量测定、组织学及免疫组化染色检测以及Realtime PCR检测相关基因表达,初步找到体内构建组织工程软骨残耳软骨细胞与ADSCs之间的最佳比例。结果Exp2、Exp3组与Ctrl.1组注射部位形成白色软骨样组织,3组新生组织的大小相仿,外观和弹性与正常软骨相似;Ctrl.2组形成纤维样组织,质软,色淡黄;Exp1、Ctrl.3组形成的软骨样组织表面光泽度及弹性差,新生组织量也明显较Exp2、Exp3组与Ctrl.1组少。Exp2、3组平均湿重分别达到达到Ctrl.1组的87%及88.7%;Exp1、Ctrl.3组平均湿重分别低于Ctrl.1组平均湿重的33%及40%;Exp2、Exp3组平均GAG含量达到Ctrl.1组的90%以上;Exp2、Exp3组和Ctrl.1组的平均湿重和GAG平均含量均显着高于Exp1、Ctrl.2组和Ctrl.3组(P<0.05)。组织学染色:Exp1、Exp2、Exp3组、Ctrl.1组与Ctrl.3组标本均有软骨陷窝形成,Exp1、Ctrl.3组与Exp2、Exp3、Ctrl.1组相比较,软骨陷窝松散排列不均,软骨陷窝较大;Ctrl.2组为纤维样组织,未见软骨陷窝形成。Ⅱ型胶原免疫组化染色:Exp1、Exp2、Exp3组、Ctrl.1组与Ctrl.3组标本均可见成熟软骨陷窝周围有不同程度的棕黄色沉淀即Ⅱ型胶原表达;Ctrl.2组未见Ⅱ型胶原表达。共移植组(Exp2)和共移植组(Exp3)在相关基因表达方面与阳性对照组(Ctrl.1)相近似(p>0.05),而ADSCs对照组(Ctrl.2)及低密度残耳软骨细胞对照组(Ctrl.3)以及共移植组(Exp1)与阳性对照组(Ctrl.1)在相关基因表达方面差异较明显(p<0.05)。结论残耳软骨细胞与ADSCs在裸鼠体内构建组织工程软骨的上述叁个比例中,3:7为最佳比例。(本文来源于《北京协和医学院》期刊2011-04-26)
张洁,蒋海越,何乐仁,赵延勇,杨庆华[9](2011)在《残耳软骨细胞与脂肪干细胞共培养体内构建软骨的实验研究》一文中研究指出目的验证残耳软骨细胞与脂肪来源的间充质干细胞(Adipose derived stem cells,ADSCs)共培养,体内构建软骨的可行性。方法分离培养同一先天性小耳畸形患者来源的残耳细胞及脂肪干细胞。24只裸鼠随机分为4组:①实验组,接种残耳软骨细胞及脂肪干细胞,两种细胞以1∶1比例混合,细胞浓度为5.0×107 cells/mL;②对照组1,接种单纯残耳软骨细胞,细胞浓度为5.0×107 cells/mL;③对照组2,接种单纯ADSCs,细胞浓度为5.0×107 cells/mL;④对照组3,接种单纯残耳软骨细胞,细胞浓度为2.5×107 cells/mL。每组接种6只裸鼠,每只接种0.2 mL。体内培养10周后取材。通过对新生组织的大体观察、测量湿重、糖胺多糖含量测定、组织学及免疫组化染色等方法对各组新生软骨进行比较。结果实验组、对照组1与对照组3产生不同组织量的软骨样组织,对照组2形成纤维样组织;实验组平均湿重及糖胺多糖含量达到对照组1的88%以上,对照组3平均湿重低于对照组1的40%;HE染色示实验组、对照组1与对照组3的标本均有软骨陷窝形成,对照组2未见软骨陷窝形成;Ⅱ型胶原免疫组化染色示实验组、对照组1与对照组3均可见Ⅱ型胶原表达;对照组2未见Ⅱ型胶原表达。结论体内共培养条件下,残耳软骨微环境可有效促进脂肪干细胞向软骨方向分化,残耳软骨细胞与脂肪干细胞共培养体内构建软骨具备可行性。(本文来源于《组织工程与重建外科杂志》期刊2011年02期)
刘玲玲,田晋洪[10](2010)在《兔耳软骨细胞与聚羟基丁酯-聚丙交酯复合物相容性的实验研究》一文中研究指出目的探讨兔耳软骨细胞与聚羟基丁酯-聚丙交酯复合物(PHB-PLA)的细胞相容性,为进一步以PHB-PLA为支架构建组织工程软骨提供实验依据和理论基础。方法分离、培养的兔耳软骨细胞,接种于PHB-PLA浸泡液及膜片上,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖指数及计算毒级,并在体外培养后组织染色(Masson)及扫描电镜观察细胞的生长状况。设立空白对照组。结果兔耳软骨细胞在PHB-PLA浸泡培养基中生长良好。24、487、2 h MTT法结果与对照组差异无统计学意义;毒性分级为0。组织染色及扫描电镜显示:兔耳软骨细胞生长良好,形态正常,黏附牢固。结论兔耳软骨细胞与PHB-PLA的相容性良好,无毒性,可以用于进一步构建组织工程软骨。(本文来源于《山西医药杂志》期刊2010年06期)
残耳软骨细胞论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
背景:先天性小耳畸形残耳软骨细胞从细胞数量和质量上难以作为种子细胞构建出正常人耳郭大小的同质耳软骨支架。目的:探讨残耳软骨细胞能否在裸鼠体内非软骨环境下模拟软骨诱导微环境,促进脂肪来源的干细胞向软骨分化并形成组织工程软骨,从而为解决组织工程化人耳郭软骨支架制备做基础准备工作。方法:(1)实验分为4组:第2代残耳软骨细胞与第3代脂肪来源的干细胞以3∶7比例混合作为共移植组,单纯残耳软骨细胞作为阳性对照组(残耳软骨细胞组),单纯脂肪来源的干细胞作为阴性对照组(脂肪干细胞组),以上3组接种细胞终浓度为5.0×10~(10) L~(-1),低浓度残耳软骨细胞对照组细胞终浓度为1.5×10~(10) L~(-1);(2)按照实验分组将0.2 mL细胞-Pluronic-F127复合物注射到裸鼠背部皮下,体内培养8周后对新生组织进行大体观察、湿质量测量、糖胺多糖含量测定、组织学及免疫组化染色检测。结果与结论:(1)共移植组平均湿质量达到残耳软骨细胞组的80%以上;低浓度残耳软骨细胞对照组平均湿质量低于残耳软骨细胞组的30%;(2)共移植组和残耳软骨细胞组的平均湿质量和糖胺多糖平均含量均显着高脂肪干细胞组和低浓度残耳软骨细胞对照组(P<0.05);(3)组织学染色:共移植组、残耳软骨细胞组与低浓度残耳软骨细胞对照组标本均有成熟的软骨陷窝形成,低浓度残耳软骨细胞对照组软骨陷窝松散排列不均,胞外基质着色淡;脂肪干细胞组为纤维样组织,未见软骨陷窝形成;(4)Ⅱ型胶原免疫组化染色:共移植组、残耳软骨细胞组与低浓度残耳软骨细胞对照组可见成熟软骨陷窝周围有不同程度的棕黄色沉淀即Ⅱ型胶原表达;脂肪干细胞组未见Ⅱ型胶原表达;(5)结果提示,残耳软骨细胞能够在裸鼠体内非软骨环境下模拟软骨诱导微环境,促进脂肪干细胞向软骨分化并生成组织工程软骨。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
残耳软骨细胞论文参考文献
[1].于瑶,殷宗琦,李丹,周广东,曹谊林.人耳软骨细胞冻存复苏后的体外成软骨能力及体内转归的研究[J].组织工程与重建外科杂志.2019
[2].蔡震,蒋海越.残耳软骨细胞诱导脂肪来源干细胞体内软骨的形成[J].中国组织工程研究.2017
[3].康宁,刘霞,曹谊林,肖苒.单例先天性小耳残耳软骨细胞体外构建人耳廓软骨[J].基础医学与临床.2014
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[8].张洁.先天性小耳畸形残耳软骨细胞与脂肪干细胞共培养构建组织工程软骨的实验研究[D].北京协和医学院.2011
[9].张洁,蒋海越,何乐仁,赵延勇,杨庆华.残耳软骨细胞与脂肪干细胞共培养体内构建软骨的实验研究[J].组织工程与重建外科杂志.2011
[10].刘玲玲,田晋洪.兔耳软骨细胞与聚羟基丁酯-聚丙交酯复合物相容性的实验研究[J].山西医药杂志.2010