不同代次大鼠骨髓间充质干细胞Wnt/β-catenin信号通路表达分析

不同代次大鼠骨髓间充质干细胞Wnt/β-catenin信号通路表达分析

论文摘要

目的观察不同代次大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)体外增殖能力及其纤维分化倾向,为临床治疗及组织工程种子细胞的选择提供依据。方法采用贴壁培养法分离培养大鼠MSCs,流式细胞术鉴定细胞表面标记; MTT法检测不同代次MSCs的增殖情况;蛋白质印迹法(Western Blot)检测MSCs Wnt通路相关蛋白的表达情况;实时聚合酶链式反应(Realtime-PCR)法检测不同代次MSCs中成纤维细胞分子标记表达。结果流式细胞术鉴定结果证实我们培养的大鼠MSCs符合间充质干细胞的特征,且纯度高; MTT法检测显示P3代之后细胞的增殖能力明显高于P1、P2代,Western Blot检测显示细胞内Wnt/β-catenin信号通路蛋白表达随培养代次增强,Realtime-PCR法检测结果证实P9代细胞开始出现成纤维分化倾向。结论 MSCs作为种子细胞不宜超过P9代,P3~P7代具有纯度高、倍增快等优点,是能够满足组织工程细胞植入的种子细胞。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 大鼠MSCs的原代培养:
  •     1.2.2 原代培养大鼠MSCs的鉴定:
  •     1.2.3 不同代次MSCs的增殖能力检测:
  •     1.2.4 Wnt通路相关蛋白的表达情况:
  •     1.2.5 不同代次MSCs中成纤维细胞分子标记表达:
  •   1.3 统计学方法
  • 2 结果
  •   2.1 大鼠MSCs的分离、培养与鉴定
  •   2.2 不同代次MSCs的增殖情况
  •   2.3 Wnt通路相关蛋白的表达情况
  •   2.4 不同代次MSCs中成纤维细胞分子标记表达
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 单云峰,宋红焕,李国莉,邵燕,陈诚,竺丽梅,李燕

    关键词: 骨髓间充质干细胞,不同代次,信号通路,成纤维分化

    来源: 实用老年医学 2019年01期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,基础科学

    专业: 生物学,基础医学

    单位: 江苏省疾病预防控制中心慢性传染病防制所

    基金: 国家自然科学基金资助项目(8130144),江苏省青年医学人才计划(QNRC2016541),江苏省“六个一工程”拔尖人才科研项目(LGY2017083,LGY2018067)

    分类号: R329.2

    页码: 20-24

    总页数: 5

    文件大小: 1610K

    下载量: 111

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