导读:本文包含了软骨形成论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:软骨,干细胞,脂肪,血浆,血小板,细胞,细胞因子。
软骨形成论文文献综述
李晓锋,薛纯纯,施杞,莫文,王拥军[1]（2019）在《OPG基因敲除小鼠腰椎间盘软骨终板炎症因子表达增加及新生血管形成》一文中研究指出目的:探索OPG基因敲除小鼠腰椎间盘软骨终板炎症因子及新生血管形成的改变。方法:分别获得8w、12w、24w OPG基因敲除(OPG KO)小鼠及其同窝野生型(WT)小鼠,藏红-固绿进行形态学染色,微计算机断层扫描(micro-CT)分析软骨终板的结构变化,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色评估软骨终板破骨细胞形成。免疫组织化学染色(IHC)观察椎间盘软骨终板血管内皮生长因子A(VEGF-A)、CD31、VE-钙粘蛋白(VE-cad)、CD34、白介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的蛋白表达,实时荧光定量PCR(RTPCR)分析软骨终板组织中IL-1β、IL-6和TNF-α等炎症因子及血管新生相关的VEGF-a、Cd31、Ve-cad、Cd34的基因表达情况。结果:藏红固绿染色显示与WT小鼠比较,12w OPG KO小鼠腰椎间盘软骨终板出现新骨,而且随着月龄的增加(24w),钙化的骨组织更明显。micro-CT叁维重建同样显示12w OPG KO小鼠椎间盘软骨终板外侧缘出现骨髓腔,至24w时Opg KO小鼠骨髓腔进一步扩大,几乎覆盖了整个椎体上缘平面,进一步免疫组化发现在椎间盘终板和生长板中IL-1β,IL-6和TNF-α的蛋白表达均增加,并且VEGF-A,CD31,VE-cad和CD34的蛋白表达也增加。RT-PCR显示IL-1β和TNF-αmRNA及VEGF-a,Cd31,Ve-cad和Cd34 mRNA表达高于WT小鼠。结论:OPG基因缺失导致椎间盘软骨终板新生血管形成和炎性细胞因子表达增加,这可能是引起椎间盘退变的重要原因。(本文来源于《第五届“华夏黄河骨科大会”、甘肃省老年医学会脊柱疾患专业委员会第二届学术年会、中国中西医结合学会脊柱医学专业委员会第十二届学术年会暨第四届专业委员会换届会议论文集》期刊2019-10-18）
周海玲,周楠,谢艾伦,陈晓艳,高珺[2]（2019）在《Fgf8激活通过改变下颌骨舌侧成骨细胞的成软骨命运抑制舌牙槽骨的形成》一文中研究指出目的：FGF家族被认为是调控胚胎发育与器官形成的重要信号分子之一。其家族包括22个成员，被分为3大类，包括旁分泌型、内分泌型以及胞内分泌型。其中，Fgf8属于旁分泌型蛋白。有研究显示，Fgf8信号在小鼠CNCCs（颅神经嵴间充质细胞）中激活（Wnt1-cre; Rosa26R-Fgf8）导致小鼠出现严重的上、下颌突均严重发育不良，缺乏任何可识别的下颌骨、软骨、舌及肌肉等组织器官。Fgf8(本文来源于《2019第九次全国口腔生物医学学术年会论文汇编》期刊2019-10-11）
孙剑,魏垒[3]（2019）在《滑膜关节与关节软骨的形成》一文中研究指出膜关节是人体的重要组成部分,虽然数量很少,但是它们都有独特的生物力学结构和功能。近几十年来滑膜关节一直是骨科领域研究的热点,这充分体现了关节对维持人类机体功能和生活质量的重要性,但是目前对胚胎发育过程中滑膜关节的形成机制依然知之甚少。本文对滑膜关节与关节软骨形成机制的研究进展作一综述。(本文来源于《中华关节外科杂志(电子版)》期刊2019年03期）
Vinod,E,Vinod,Francis,D,ManickamAmirtham,S,赵泽亮[4]（2019）在《同种异体富血小板血浆用于关节软骨衍生的软骨形成的支架》一文中研究指出软骨的有限自我恢复能力使得必须使用基于细胞和组织工程的疗法。关节软骨衍生的软骨形成剂(CP)的分离、扩展和表征的最新进展,已经在其软骨修复的作用中得到普及。富血小板血浆(PRP)是用于体外和体内研究的可靠的生物支架,已报道在软骨和骨疾病的治疗中得到应用。本研究的目的是评估人同种异体PRP是否可以作为软骨修复中软(本文来源于《中国口腔颌面外科杂志》期刊2019年02期）
岳家吉[5]（2019）在《镁离子调节Erk信号通路及自噬形成抑制软骨细胞外基质钙化的分子生物学机制研究》一文中研究指出研究目的:骨性关节炎最重要的细胞病理学变化包括软骨细胞肥大化、软骨细胞凋亡、软骨细胞被成骨细胞替代。细胞外基质(extracellular matrix,ECM)由以胶原为主要成分向以钙磷酸盐为主要成分转化,导致软骨细胞外基质被骨组织所替代,并最终形成骨性关节炎的主要组织学特点。镁是人体内常量元素,是细胞内含量仅次于钙离子的二价阳离子,它在维持人体的正常生理功能、促进细胞和生物酶活性中发挥了至关重要的作用,其参与多种酶促反应、蛋白合成和能量代谢;调控骨组织生长和维持神经肌肉的兴奋性;保持胃肠道和激素功能的稳定性。Ca~(2+)和Mg~(2+)作为人体内含量最大的两种二价阳离子,细胞外液的平衡调控着细胞外微环境中钙盐沉积和组织钙化水平;同时生理性的骨形成、骨吸收和病理性的异位骨化、软骨细胞钙化也受到这两种离子的调控影响。目前发现,钙化的肌腱组织和韧带中,钙含量较正常组织增高,且随着肌腱退变和钙化的严重程度而加剧,而镁的含量则随着肌腱老化和退变而下降;近年研究表明,Mg~(2+)与细胞外基质的钙化过程密切相关,涉及很多常见的病理状态,如骨质疏松和动脉血管粥样硬化中钙化斑块的形成。除此之外,结缔组织异位骨化被Mg~(2+)有效抑制也已经在动物实验中得到证实;关节腔内注射硫酸镁也可以有效抑制关节软骨产生类似骨性关节炎的病理变化;新英格兰杂志也指出,血液中镁离子含量的异常,可导致焦磷酸钙在软骨细胞间沉积从而引起软骨钙质沉着症。人群的大样本研究也提示,当血清Mg~(2+)浓度升高或饮食中添加较高浓度镁元素时,膝关节骨性关节炎的影像学表现则有所减弱,差异具有统计学意义,可以说Mg~(2+)在调控细胞外基质钙化过程中起到了关键作用。ATDC5细胞系和DMM手术诱导的骨性关节炎动物模型是目前被广泛使用的,用以研究骨性关节炎发病机制最有效的体外和体内研究的实验对象。与衰老引发的自发性小鼠膝关节骨性关节炎模型相比,DMM手术诱导模型可以在较短的时间内复制相似严重程度和相同位置的病理变化。该模型可以造成膝关节不稳定和内侧间室的压力集中,导致软骨退化从膝关节的内侧间隙开始,该病理机制与人体膝关节炎的发病机制相似。软骨细胞是关节软骨中唯一的常驻细胞,其主要功能为合成丰富的ECM,并参与细胞外基质的转换,而ECM从胶原向骨组织转换则是本研究中的重点。ATDC5细胞系于1990年首次从小鼠肿瘤组织中分离得来,相关研究也发现,该细胞系相对于其他已知细胞系(C3H10T1/2和RJC3.1)相比,具有非常强大的软骨形成及软骨分化能力。在细胞培养过程中,该细胞显示出软骨结节形成、II型胶原分泌、聚集蛋白聚糖和其他ECM分子的分泌等典型软骨细胞特征。随着培养时间的延长,ATDC5细胞出现肥大化现象,同时X型胶原蛋白表达也随之升高,在标准培养基培养45天后出现ECM钙化现象。ATDC5软骨细胞,具有快速增殖和未分化状态持久性较强的特点,有效确保本研究中的体外实验有效实施。本研究将着重探讨Mg~(2+)在有效抑制ATDC5软骨细胞外基质钙化,减缓小鼠膝关节骨性炎发展中的分子生物学机制和相关细胞信号通路,为临床工作中有效预防膝关节骨性关节炎,减缓疾病进展提供新的理论依据和新的治疗思路。研究方法:本研究以软骨细胞细胞系ATDC5细胞系和DMM手术诱导的骨关节炎动物模型为主要研究对象,着重探讨Mg~(2+)在有效抑制ATDC5软骨细胞外基质钙化,减缓小鼠膝关节骨性炎发展中的分子生物学机制和相关细胞信号通路。1、ATDC5软骨细胞分别在普通培养基,成骨诱导培养基,及含有梯度浓度Mg~(2+)的成骨诱导培养基(1.2 mM/L,1.6 mM/L,2.0 mM/L和2.4 mM/L)中连续培养14天,并进行茜素红染色,评估成骨诱导作用。2、ATDC5软骨细胞在普通培养基,成骨诱导培养基或含有2.4mM/L Mg~(2+)的成骨诱导培养基中培养3,7和15天,采用qPCR技术检测成骨相关基因ALP,Runx2,软骨细胞肥大化基因Col10α1,MMP13,软骨细胞标记基因Sox9,Col1α1及钙化抑制基因MGP。3、ATDC5软骨细胞在普通培养基,成骨诱导培养基或含有2.4mM/L Mg~(2+)的成骨诱导培养基中培养,并进行蛋白印迹法检测。于24小时后检测磷酸化ERK1/2蛋白及总ERK1/2蛋白,于72小时后检测LC3和p62蛋白,于7天后检测Runx2,MMP13,Col1α1,Col10α1。4、ATDC5软骨细胞在普通培养基,成骨诱导培养基,含有2.4mM/L Mg~(2+)的成骨诱导培养基及含有5mM/L 3-MA的成骨诱导培养基中养孵育3小时或6小时。使用FACScan流式细胞仪,对ADTC5细胞中LC3蛋白阳性表达进行检测。5、对12周龄雄性小鼠的右膝进行DMM手术,从而诱导膝关节骨性关节炎的发生。通过打开和暴露膝关节腔,不对关节软骨或半月板进行任何操作,对同一小鼠的左膝进行假手术,以此作为阴性对照。6、术后第2周至11周,在麻醉(Avertin 240mg/kg体重)下每周向实验组小鼠双侧膝关节腔内注射MgCl_2(50μg,溶解于10μl生理盐水中),向对照组注射10μl生理盐水。在手术后12周收集双侧膝关节的标本,脱钙、处理、包埋、切片并进行组织学研究。7、对小鼠膝关节进行连续的矢状位切片(3μm厚)并用阿尔新蓝/苏木精和曙红(AB/H&E)染色,从而进行组织学和形态学分析。8、用OsteoMeasure软件(OsteoMetrics,Inc.,Atlanta,GA,USA)进行组织形态学测量。在每个组织切片的投影图像上描绘AB/H&E染色区域中关节软骨的蓝色区域,并进行统计学分析比较。9、根据Glasson等学者制定的骨性关节炎评分系统,对每只小鼠膝关节骨性关节炎进展的严重性进行评价。10、在3-μm厚的组织切片上进行免疫荧光(IF)染色,采用链霉抗生物素蛋白(488缀合物,Thermo Fisher)检测LC3阳性表达的荧光信号。使用具有DAPI的封片液封片,其中细胞核可以被染为蓝色。研究结果:高浓度Mg~(2+)可以有效抑制ATDC5软骨细胞外基质钙化,关节腔内注射MgCl_2可以有效抑制DMM手术诱导的膝关节骨性关节炎进展。1、当成骨诱导培养基中镁离子含量在1.6mM/L或更高浓度时,ATDC5软骨细胞外基质钙化程度受到显着的抑制,茜素红染色定量显着下降,细胞外高浓度Mg~(2+)的抑制作用具有剂量依赖效应。2、培养3天,7天或15天的ATDC5中提取的总RNA显示,高浓度的Mg~(2+)对ALP表达没有调控作用。成骨诱导培养基显着抑制MGP,Col1α1和Sox9的mRNA表达,高浓度Mg~(2+)则逆转了成骨诱导培养基的抑制作用。成骨诱导培养基可以显着提高Runx2,Col10α1和MMP13的mRNA表达,高浓度的Mg~(2+)则可以逆转其表达升高。3、培养24小时后,成骨诱导培养基中磷酸化的ERK蛋白显着增高,高浓度的Mg~(2+)可以抑制p-ERK的表达,而总ERK保持稳定。4、培养72小时后,LC3 II蛋白在成骨诱导培养基中表达升高,而高浓度Mg~(2+)和3-MA都可以降低该蛋白的表达。p62在成骨诱导培养基中受到抑制,高浓度的Mg~(2+)和3-MA则显着提高了p62的表达。5、培养7天后,成骨诱导培养基可激活ATDC5中软骨细胞肥大化标志物Runx2,Col10α1和基质降解酶MMP13水平,高浓度Mg~(2+)则明显降低了蛋白升高水平;培养7天后,成骨诱导培养基抑制ATDC5中的软骨细胞标记物Col1α1,高浓度的Mg~(2+)逆转抑制效果并呈现软骨细胞保护作用。6、每组样品分析1×10~4个ATDC5细胞。成骨诱导培养基可显着激活LC3表达,而高浓度的Mg~(2+)和3-MA均抑制LC3的表达。7、在DMM手术后连续关节腔内注射MgCl_2可以有效缓解骨性关节炎的进展。AB/H&E染色显示,在DMM手术后12周,小鼠膝关节出现显着骨性关节炎样表型,包括软骨下硬化,软骨退化和软骨细胞肥大化。Mg~(2+)可以有效缓解骨性关节炎的进展,减少软骨下硬化,软骨退化和软骨细胞肥大化的出现。8、通过组织形态学测量来量化胫骨平台的关节软骨面积,使用OsteoMeasure系统追踪阿尔新蓝阳性染色区域,注射MgCl_2的DMM组胫骨软骨面积明显高于注射生理盐水的DMM组样本;采用盲法由另外两位观察者对小鼠膝关节进行OARSI评分,结果显示,DMM手术引起显着的骨关节炎样缺陷,高浓度Mg~(2+)可有效保护关节软骨。9、通过免疫荧光检测标本石蜡切片中LC3的表达,LC3阳性的软骨细胞显示绿色荧光。与假手术组相比,DMM诱导的骨性关节炎标本中,软骨细胞的LC3阳性表达率更高,并且MgCl_2注射也可以降低LC3阳性表达的软骨细胞百分比。研究结论:高浓度Mg~(2+)可以有效抑制软骨细胞ATDC5细胞外基质钙化,抑制DMM手术诱导的小鼠膝关节骨性关节炎,产生软骨保护作用。1、高浓度Mg~(2+)通过抑制成骨相关转录因子Runx2,软骨细胞肥大化基因Col10α1,MMP13的mRNA及蛋白表达,抑制ATDC5细胞外基质钙化;高浓度Mg~(2+)通过上调软骨细胞标记基因Sox9,Col1α1及钙化抑制基因MGP的mRNA和蛋白表达,对ATDC5软骨细胞产生保护作用。2、高浓度Mg~(2+)通过抑制细胞信号通路ERK1/2蛋白磷酸化,有效抑制ATDC5软骨细胞自噬蛋白LC3-II的形成,增加自噬体内载体标记蛋白p62表达,有效抑制成骨诱导激活的细胞自噬形成,对细胞外机制钙化产生抑制作用。3、关节内注射MgCl_2可以有效减缓DMM诱导的小鼠膝关节骨性关节炎,在一定程度上减少软骨下硬化,软骨退化和软骨细胞肥大化的现象,有效降低膝关节OARSI评分,部分保留关节软骨面积,缓解DMM模型的关节炎进展;免疫荧光染色显示,关节腔内注射MgCl_2还可以有效降低关节软骨中LC3阳性表达的细胞数量。(本文来源于《中国医科大学》期刊2019-02-01）
少玲,伍妍[6]（2018）在《钟基因Bmal1调控软骨形成与软骨内成骨及其机制研究》一文中研究指出目的:作为下颌骨发育的生长中心,髁突软骨的成骨发育过程直接决定下颌骨的生长结构。生物节律是机体对光照以及温度等环境因素周期变化长期适应而演化的内在自主计时机制,参与协调机体各种物质代谢和生物学行为。研究证实生物节律紊乱可通过影响骨代谢进而导致颌面发育异常,不过其中的内在机制仍不明确。本研究拟探索生物节律及钟基因Bmal1对髁突软骨形成和软骨内成骨的影响及其分子机制。方法:体外原代培养BMSCs并进行成软骨诱导,慢病毒转染Bmal1敲除或过表达质粒后检测软骨形成情况:采用RT-PCR、Western Blot、免疫荧光法于成软骨诱导后14天检测COL2a1、SOX9、ACAN等软骨形成相关蛋白的表达变化;于成软骨诱导后21天检测ALP、OCN、COL10a1、MMP-13等成骨形成相关蛋白的表达变化和软骨细胞凋亡情况。体内构建生物节律紊乱小鼠及BMSC细胞特异性敲除Bmal1小鼠,HE、massion染色动态检测1至8周小鼠髁突软骨及下颌骨发育情况,番红固绿染色检测髁突软骨发育情况,免疫组化法检测软骨形成相关蛋白和成骨形成相关蛋白的表达变化。结果:Bmal1表达抑制后可见软骨形成及软骨内成骨明显减少,COL2a1、SOX9、ACAN、ALP、OCN、COL10a1、MMP13的表达水平下降,而软骨细胞凋亡明显增加;反之,过表达Bmal1后,软骨形成和软骨内成骨增加,COL2a1、SOX9、ACAN、ALP、OCN、COL10a1、MMP13的表达水平上升,软骨细胞凋亡明显减少。生物节律紊乱型小鼠及BMSC细胞特异性敲除Bmal1小鼠表现为髁突软骨发育异常和下颌骨骨量减少,免疫组化显示软骨形成相关蛋白COL2a1、SOX9、ACAN,成骨形成相关蛋白ALP、OCN、COL10a1、MMP13的表达有所下降。结论:钟基因Bmal1参与调控了髁突软骨形成及软骨内成骨过程,调节生物节律或Bmal1可能会影响下颌骨发育的进程。(本文来源于《中华口腔医学会第九次全科口腔医学学术会议论文汇编》期刊2018-08-30）
李治冶,赵铱民,吴炜[7]（2017）在《脂肪干细胞促进可注射性“软骨细胞砖移植体”形成异位软骨并构建鼻背部软骨增高体的实验研究》一文中研究指出目的:将脂肪干细胞(ADSC,A)负载入可注射性软骨细胞砖-富血小板血浆(Chondrocyte Bricks-Platelet Rich Plasma,CB-PRP)复合体中,探究其作为种子细胞实现颌面部微创软骨修复的可行性。方法:体外成膜培养软骨细胞和扩增培养ADSC、骨髓间充质干细胞(BMSC,B)。利用多片刀切削系统将软骨细胞膜片制备成CB并混合PRP(P),分别将ADSC和BMSC混入(本文来源于《2017全国口腔生物医学学术年会论文汇编》期刊2017-10-13）
蔡震,蒋海越[8]（2017）在《残耳软骨细胞诱导脂肪来源干细胞体内软骨的形成》一文中研究指出背景:先天性小耳畸形残耳软骨细胞从细胞数量和质量上难以作为种子细胞构建出正常人耳郭大小的同质耳软骨支架。目的:探讨残耳软骨细胞能否在裸鼠体内非软骨环境下模拟软骨诱导微环境,促进脂肪来源的干细胞向软骨分化并形成组织工程软骨,从而为解决组织工程化人耳郭软骨支架制备做基础准备工作。方法:(1)实验分为4组:第2代残耳软骨细胞与第3代脂肪来源的干细胞以3∶7比例混合作为共移植组,单纯残耳软骨细胞作为阳性对照组(残耳软骨细胞组),单纯脂肪来源的干细胞作为阴性对照组(脂肪干细胞组),以上3组接种细胞终浓度为5.0×10~(10) L~(-1),低浓度残耳软骨细胞对照组细胞终浓度为1.5×10~(10) L~(-1);(2)按照实验分组将0.2 mL细胞-Pluronic-F127复合物注射到裸鼠背部皮下,体内培养8周后对新生组织进行大体观察、湿质量测量、糖胺多糖含量测定、组织学及免疫组化染色检测。结果与结论:(1)共移植组平均湿质量达到残耳软骨细胞组的80%以上;低浓度残耳软骨细胞对照组平均湿质量低于残耳软骨细胞组的30%;(2)共移植组和残耳软骨细胞组的平均湿质量和糖胺多糖平均含量均显着高脂肪干细胞组和低浓度残耳软骨细胞对照组(P<0.05);(3)组织学染色:共移植组、残耳软骨细胞组与低浓度残耳软骨细胞对照组标本均有成熟的软骨陷窝形成,低浓度残耳软骨细胞对照组软骨陷窝松散排列不均,胞外基质着色淡;脂肪干细胞组为纤维样组织,未见软骨陷窝形成;(4)Ⅱ型胶原免疫组化染色:共移植组、残耳软骨细胞组与低浓度残耳软骨细胞对照组可见成熟软骨陷窝周围有不同程度的棕黄色沉淀即Ⅱ型胶原表达;脂肪干细胞组未见Ⅱ型胶原表达;(5)结果提示,残耳软骨细胞能够在裸鼠体内非软骨环境下模拟软骨诱导微环境,促进脂肪干细胞向软骨分化并生成组织工程软骨。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2017年21期）
李治冶,董岩,冯晓珂,曹强,吴炜[9]（2017）在《脂肪干细胞促进可注射性“软骨细胞砖-富血小板血浆”复合体形成异位软骨的实验研究》一文中研究指出目的:将脂肪干细胞(ADSCs)负载入可注射性软骨细胞砖-富血小板血浆(CB-PRP)复合体中,探究其作为种子细胞能否促进异位软骨的形成。方法:成膜培养软骨细胞并制备CB;扩增培养ADSCs和骨髓间充质干细胞(BMSCs);取静脉血制备PRP;将ADSCs和BMSCs分别与CB-PRP混合并注射至裸鼠皮下,12周后取材观测软骨形成情况。结果:体外实验显示CB由软骨细胞及细胞外基质构成;体内生长12周后,大体观察2组复合体均形成软骨样组织;HE染色、番红O(SafraninO)和甲苯胺蓝(TB)染色及定量检查结果显示2组复合体均有软骨组织形成,Safranin-O和TB染色阳性区域面积无统计学差异。结论:ADSCs能够作为种子细胞促进可注射性"软骨细胞砖-富血小板血浆"复合体形成异位软骨。(本文来源于《实用口腔医学杂志》期刊2017年03期）
李赛娜[10]（2017）在《牛关节软骨Ⅱ型胶原的制备及其对骨形成的影响》一文中研究指出胶原是构成哺乳动物细胞外基质的主要蛋白质。目前脊椎动物中已发现28种胶原,其中Ⅱ型胶原主要分布于关节软骨中,对类风湿性关节炎、软骨发育不良等疾病具有显着疗效。传统的Ⅱ型胶原鉴定方法如溴化氢降解法、Elisa法等方法无法同时进行类型识别和定量检测,且存在精确度低等问题。本文采用酶法制备了牛关节软骨中的Ⅱ型胶原,并以Ⅱ型胶原的特征多肽为基础,建立了一种Ⅱ型胶原质谱定性定量检测方法;同时将胶原覆层材料用于小鼠前成骨细胞培养,在基于质谱的蛋白质组学研究基础上,考察了不同类型胶原对细胞不同功能性蛋白表达的影响,在此基础上研究Ⅱ型胶原对细胞分化方向及骨形成的影响,在未来的功能食品、药品及生物材料等领域具有广泛的应用前景。主要结论如下:1.采用酶法提取了牛关节软骨中的Ⅱ型胶原,并对制备的Ⅱ型胶原进行鉴定。采用氯化钠除杂和盐酸胍抽提蛋白多糖后,在酸性条件下采用胃蛋白酶降解非胶原类蛋白,经盐析和透析处理去除多肽,冷冻干燥后获得Ⅱ型胶原。SDS-PAGE结果表明牛Ⅱ型胶原单条链分子量约为130 kDa;胶原酶解产物中检测出牛Ⅱ型胶原的特征多肽,质谱分析结果表明Ⅱ型胶原的纯度为92.2%,与氨基酸组成分析结果一致,Ⅱ型胶原得率为9.2%;TEM可观测到Ⅱ型胶原特有的超分子结构;DSC结果表明制备的Ⅱ型胶原在pH 7.0条件下变性温度Tm为43.68℃,且在酸性条件下较不稳定。结果表明实验所用方法可得到纯度较高的Ⅱ型胶原,鉴定结果符合Ⅱ型胶原特性。2.采用化学偶联法将Ⅰ型胶原和Ⅱ型胶原覆层在硅片上,并采用质谱法对硅片表面覆层的胶原进行定量。以氨基硅烷和戊二醛为偶联剂,将经Piranha溶液处理的硅片进行胶原覆层,XPS分析结果表明经氨基硅烷处理的硅片表面氮含量有所增加,氨基硅烷成功偶联在硅片表面;采用HPLC-MS法对硅片表面覆层的胶原进行定量,得到Φ10 cm硅片表面Ⅰ型胶原覆层量为0.81 mg,Ⅱ型胶原覆层量为0.67 mg。3.采用胶原覆层硅片培养小鼠前成骨细胞,并通过细胞培养效果评价其生物相容性。与空白硅片相比,经胶原覆层后的硅片细胞贴附状态显着改善,细胞增殖速率和细胞活性均显着提高,结果表明胶原覆层可增强硅片的生物相容性。4.对细胞蛋白进行差异性分析,并比较胶原类型对细胞分化的影响。将硅片表面培养的细胞裂解后提取细胞蛋白,经HPLC-MS分析后进行蛋白质组学研究,结果表明经Ⅰ型胶原覆层的硅片培养的细胞多表达与细胞增殖期和基质合成有关的基础蛋白,而经Ⅱ型胶原覆层的硅片培养的细胞多表达与钙盐沉积有关的蛋白。结果表明Ⅱ型胶原对骨形成具有一定的促进作用。(本文来源于《山东农业大学》期刊2017-05-04）
软骨形成论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的：FGF家族被认为是调控胚胎发育与器官形成的重要信号分子之一。其家族包括22个成员，被分为3大类，包括旁分泌型、内分泌型以及胞内分泌型。其中，Fgf8属于旁分泌型蛋白。有研究显示，Fgf8信号在小鼠CNCCs（颅神经嵴间充质细胞）中激活（Wnt1-cre; Rosa26R-Fgf8）导致小鼠出现严重的上、下颌突均严重发育不良，缺乏任何可识别的下颌骨、软骨、舌及肌肉等组织器官。Fgf8
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
软骨形成论文参考文献
[1].李晓锋,薛纯纯,施杞,莫文,王拥军.OPG基因敲除小鼠腰椎间盘软骨终板炎症因子表达增加及新生血管形成[C].第五届“华夏黄河骨科大会”、甘肃省老年医学会脊柱疾患专业委员会第二届学术年会、中国中西医结合学会脊柱医学专业委员会第十二届学术年会暨第四届专业委员会换届会议论文集.2019
[2].周海玲,周楠,谢艾伦,陈晓艳,高珺.Fgf8激活通过改变下颌骨舌侧成骨细胞的成软骨命运抑制舌牙槽骨的形成[C].2019第九次全国口腔生物医学学术年会论文汇编.2019
[3].孙剑,魏垒.滑膜关节与关节软骨的形成[J].中华关节外科杂志(电子版).2019
[4].Vinod,E,Vinod,Francis,D,ManickamAmirtham,S,赵泽亮.同种异体富血小板血浆用于关节软骨衍生的软骨形成的支架[J].中国口腔颌面外科杂志.2019
[5].岳家吉.镁离子调节Erk信号通路及自噬形成抑制软骨细胞外基质钙化的分子生物学机制研究[D].中国医科大学.2019
[6].少玲,伍妍.钟基因Bmal1调控软骨形成与软骨内成骨及其机制研究[C].中华口腔医学会第九次全科口腔医学学术会议论文汇编.2018
[7].李治冶,赵铱民,吴炜.脂肪干细胞促进可注射性“软骨细胞砖移植体”形成异位软骨并构建鼻背部软骨增高体的实验研究[C].2017全国口腔生物医学学术年会论文汇编.2017
[8].蔡震,蒋海越.残耳软骨细胞诱导脂肪来源干细胞体内软骨的形成[J].中国组织工程研究.2017
[9].李治冶,董岩,冯晓珂,曹强,吴炜.脂肪干细胞促进可注射性“软骨细胞砖-富血小板血浆”复合体形成异位软骨的实验研究[J].实用口腔医学杂志.2017
[10].李赛娜.牛关节软骨Ⅱ型胶原的制备及其对骨形成的影响[D].山东农业大学.2017
论文知识图
