导读:本文包含了无载体固定化培养论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:载体,细胞,基因治疗,哺乳动物,腺病毒,疫苗,基因。
无载体固定化培养论文文献综述
刘红,叶玲玲,李世崇,王启伟,刘兴茂[1]（2012）在《Vero细胞在不同微载体固定化培养中的生长和代谢》一文中研究指出目的:比较Vero细胞在不同的商品化微载体中固定化培养的生长和代谢。方法:以Vero细胞在含1%新生牛血清的DMEM/F12中培养的细胞形态、活细胞密度和细胞活力为指标,考察Vero细胞在2D MicroHex、Biosilon、Cytodex1和Cytopore1微载体固定化培养的细胞生长;以葡萄糖比消耗速率(qglc)、乳酸比生产速率(qlac)、谷氨酰胺比消耗速率(qgln)和谷氨酸比生产速率(qglu)为指标,考察Vero细胞在不同微载体固定化培养的细胞代谢。结果:Vero细胞在2DMicroHex、Biosilon、Cytodex1和Cytopore1微载体固定化培养7d的活细胞密度分别为18.4×105cells/ml、21.9×105cells/ml、23.9×105cells/ml和16.2×105cells/ml,生长在Cytodex1表面的Vero细胞分布均匀、形态清晰;Vero细胞在不同微载体固定化培养的代谢指标基本相同。结论:Vero细胞在Cytodex1微载体固定化培养的效果优于其它商品化微载体,可作为目前用于病毒疫苗生产的Vero细胞固定化培养的首选微载体。(本文来源于《现代生物医学进展》期刊2012年36期）
刘兴茂,刘红,吴本传,李世崇,叶玲玲[2]（2006）在《基于HEK细胞无载体固定化培养技术的重组腺病毒载体高效生产工艺》一文中研究指出重组腺病毒载体是基因治疗研究和临床应用中将治疗基因有效地介入靶细胞和／或靶组织的最常用病毒载体。重组腺病毒载体的生产通常是通过将其感染人胚肾细胞(humanembryonickidneycells,HEK细胞)、使其在HEK细胞中大量扩增而实现的。由于用于基因治疗所需的重组腺病毒载体的使用剂量大、质量要求高,重组腺病毒载体的生产成为基因治疗研究深入和应用推广的关键环节之一。(本文来源于《中国生物工程学会2006年学术年会暨全国生物反应器学术研讨会论文摘要集》期刊2006-08-01）
刘红,刘兴茂,吴本传,李世崇,王启伟[3]（2006）在《重组腺病毒载体在无载体固定化培养HEK细胞中的感染和扩增动态》一文中研究指出感染复数(Multiplicity of infection,MOI)和感染持续时间(hours post-infection,HPI)是病毒体外扩增的重要工艺参数。对于特定的病毒扩增体系(特指病毒生产细胞和病毒种类)而言,MOI和HPI主要地取于病毒生产细胞的培养模式和操作方式。先前,我们利用病毒生产细胞在搅拌培养体系中具有聚集、形成细胞团的倾向,通过控制细胞团的形成、细胞团的粒径分布和细胞团的解聚、游离细胞的再集聚成团,建立了基于悬浮细胞团的动物细胞无(本文来源于《中国生物工程学会2006年学术年会暨全国生物反应器学术研讨会论文摘要集》期刊2006-08-01）
刘兴茂,刘红,吴本传,叶玲玲,李世崇[4]（2006）在《无载体固定化培养模式下HEK293细胞的生长和代谢特征》一文中研究指出利用HEK293细胞在悬浮培养体系中具有聚集成团的体外培养特性,在250ml的spinnerflask搅拌式细胞培养瓶中以悬浮细胞团的形式实施HEK293细胞的无载体固定化培养,以细胞密度、细胞活力、细胞团粒径分布和葡萄糖比消耗率(qglc)、乳酸比产率(qlac)、乳酸转化率(Ylac/glc)、氨基酸消耗为观察指标,同时设置静止培养体系作为参照,考察无载体固定化培养模式下的HEK293细胞生长和代谢特征。观察结果表明,HEK293细胞在搅拌式细胞培养瓶中无载体固定化培养和在组织培养瓶中静止贴壁培养表现为基本相同的细胞生长和代谢特征,平均粒径小于300μm的细胞团中的物质传递能够满足HEK293细胞维持正常生长和代谢的基本需要。HEK293细胞的无载体固定化培养便于实施灌注操作、提高生物反应器单位体积的生产效率。(本文来源于《中国生物工程杂志》期刊2006年02期）
陈昭烈[5]（2004）在《哺乳动物细胞无载体固定化培养技术的建立》一文中研究指出动物细胞固定化是实现动物细胞高密度长期培养、从而提高生物反应器生产效率的关键技术途径。这一培养模式的应用使凭借小型生物反应器进行一定规模的动物细胞表达产品的生产成为可能。多孔微载体固定化是诸多细胞固定化系统中的一项技术成熟，也是能同时兼顾生产效率提高、培养规模扩大的动物细胞固定化培养技术。由于动物细胞固定化介质增加了细胞培养的成本。因此，无需借助固定化介质而直接利用生物反应器中形成的细胞团实现细胞固定化的无载体固定化培养被看作降低动物细胞表达产品生产成本的一种技术途径。此外，与动物细胞的多孔微载体固定化培养相比，无载体固定化培养可通过对培养过程中细胞团的形成和解聚的控制使细胞培养规模的放大更易实施，同时也易于监测培养过程中的细胞生长。本论文的主要目标是建立适用于哺乳动物细胞的无载体固定化培养模式。鉴于人胚肾细胞系HEK293细胞已被广泛地用作生产基因治疗载体和重组蛋白的哺乳动物细胞，本论文研究围绕HEK293细胞的无载体固定化培养展开。细胞团中的细胞密度近似于组织中的细胞密度，存在于细胞团内的物质扩散限制可能影响细胞活力。因而，实施无载体固定化培养的基本前提是通过控制细胞团的粒径分布，提高悬浮细胞团中的细胞活力。基于此，论文研究从确定悬浮培养中HEK293细胞团的形成和HEK293细胞团的特征入手。在Bellco搅拌式细胞培养瓶中对血清浓度、Ca2+浓度和流体动力强度等影响细胞团形成因素的考察和优化结果表明：培养基中的Ca2+浓度对细胞团的形成以及所形成细胞团的粒径分布起着决定性的影响；流体动力强度则在很大程度上影响着细胞团的形状和粒径分布。在Ca2+浓度为500-750μM、流体动力强度为搅拌速度设置在50-75 r／min的悬浮培养体系中，HEK293细胞团的平均粒径分布可控制在小于250μm的范围内。采用培养基的替换操作，在生物反应器内就能完成HEK293细胞团的充分解聚、游离HEK293细胞再聚集成团的控制过程而不影响细胞的活力。这一细胞团解聚、游离细胞再聚集的控制方法为无载体固定化培养的规模放大提供了极大的便利。以比生长速率(μ)、葡萄糖比消耗率(qglu)、乳酸比生成率(qlac)和氨基酸利用特征考察HEK293细胞无载体固定化培养的细胞生长和代谢特征表明：Bellco搅拌式细胞培养瓶中以悬浮细胞团培养的HEK293细胞保持着其在静止贴附培养中的生长和代谢特征。扫描电镜和荧光显微镜可观察到位于细胞团表面的HEK293细胞形态由球形转变为扁平上皮细胞样的变化。在条件优化的悬浮培养中，HEK293细胞团中无细胞凋亡和／或坏死区域形成，细胞活力保持在90%以上。在2 L搅拌罐式生物反应器以灌注式操作无载体固定化培养HEK293细胞，11 d后的活细胞密度达到1． 32×107cells／ml。上述结果表明，采用灌注式操作无载体固定化培养哺乳动物细胞是实现细胞高密度培养的一种可选方法。用重组腺病毒载体pAd-TH-GFP感染HEK293细胞团，表现为细胞团表面的细胞先被感染，而后感染细胞团内部的HEK293细胞的动态过程。在5 L搅拌罐式生物反应器中以HEK293细胞无载体固定化的培养模式扩殖pAd一TH一GFP，pAd一TH一oFP的滴度在病毒载体感染后1 Zoh达到l一sxlo”oTu/ml。 借鉴HEK293细胞无载体固定化培养的工艺条件，CHO细胞、BHK细胞和Vero细胞等哺乳动物细胞均可在搅拌式生物反应器中以无载体固定化的模式进行培养。这些结果在一定程度上验证了无载体固定化培养对贴壁依赖性生长的哺乳动物细胞的适用性。 综合上述结果表明，细胞团在搅拌式生物反应器中的悬浮培养可作为便于实施灌注操作、提高生物反应器单位体积产率的无载体固定化培养模式。哺乳动物细胞的无载体固定化培养是一种具有发展和应用潜力的动物细胞培养模式。(本文来源于《中国人民解放军军事医学科学院》期刊2004-05-30）
无载体固定化培养论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
重组腺病毒载体是基因治疗研究和临床应用中将治疗基因有效地介入靶细胞和／或靶组织的最常用病毒载体。重组腺病毒载体的生产通常是通过将其感染人胚肾细胞(humanembryonickidneycells,HEK细胞)、使其在HEK细胞中大量扩增而实现的。由于用于基因治疗所需的重组腺病毒载体的使用剂量大、质量要求高,重组腺病毒载体的生产成为基因治疗研究深入和应用推广的关键环节之一。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
无载体固定化培养论文参考文献
[1].刘红,叶玲玲,李世崇,王启伟,刘兴茂.Vero细胞在不同微载体固定化培养中的生长和代谢[J].现代生物医学进展.2012
[2].刘兴茂,刘红,吴本传,李世崇,叶玲玲.基于HEK细胞无载体固定化培养技术的重组腺病毒载体高效生产工艺[C].中国生物工程学会2006年学术年会暨全国生物反应器学术研讨会论文摘要集.2006
[3].刘红,刘兴茂,吴本传,李世崇,王启伟.重组腺病毒载体在无载体固定化培养HEK细胞中的感染和扩增动态[C].中国生物工程学会2006年学术年会暨全国生物反应器学术研讨会论文摘要集.2006
[4].刘兴茂,刘红,吴本传,叶玲玲,李世崇.无载体固定化培养模式下HEK293细胞的生长和代谢特征[J].中国生物工程杂志.2006
[5].陈昭烈.哺乳动物细胞无载体固定化培养技术的建立[D].中国人民解放军军事医学科学院.2004
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