贵州省六盘水市人民医院贵州六盘水553001
摘要：目的探讨慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者呼吸道感染肺炎克雷伯菌的耐药性。方法采集2015年11月至2017年9月于我院治疗的212例COPD患者进行呼吸道痰标本，将痰标本提取出的157株肺炎克雷伯菌应用改良酶提取物三维试验法进行超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）测定，同时检测其对临床常用的13种抗生素耐药性。结果157株肺炎克雷伯菌中产ESBLs菌株为72株，检出率为45.9%；除亚胺培南抗生素外，产ESBLs菌株对其他12种抗生素耐药性较非产ESBLs菌株均较高，差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论COPD患者呼吸道感染肺炎克雷伯菌发生耐药性主要因为肺炎克雷伯菌产生ESBLs。
关键词：慢性阻塞性肺疾病；呼吸道感染肺炎；克雷伯菌；耐药性
为了进一步探究肺炎克雷伯菌的耐药性，本研究对212例患者痰标本中提取出的157株肺炎克雷伯菌进行产ESBLs分析并检测其耐药性，为临床合理选择抗生素提供依据。现报道如下。
1材料与方法
1.1菌株提取方式
采集2015年11月至2015年9月于我院治疗的212例COPD患者进行呼吸道痰标本，提取痰标本中肺炎克雷伯菌157株。所有痰标本均为检验合格晨痰[1]，其中部分为气管插管患者，从气管插管中吸痰或由纤维支气管镜观察下冲洗痰液留取标本。
1.2菌种鉴别与药敏试验
将痰标本于绵羊血琼脂培养基中接种，在35℃环境下孵育24h，发现可疑菌种后采用美国BIOLOG公司生产的GenIIIMicrostation全自动微生物鉴定系统配合鉴定卡实施菌株鉴定。鉴定结果判定标准[2]：美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）标准。
1.3ESBLs测定
按照相关标准制备好酶粗提物[3]，后在平皿中放置30μg头孢曲松纸片，使用刀片于纸边5mm处从里往外切一道15mm×1mm狭缝，再将36μL酶粗提物从里往外加进狭缝。把培养基在35℃环境下孵育过夜，如果观察结果为抑菌圈和狭缝交接点形成扩大长菌，则ESBLs阳性。
1.4统计学分析
采用SPSS17.0软件进行数据处理，菌株耐药率以百分率表示，以χ2检验，P＜0.05表示差异具有统计学意义。
2结果
肺炎克雷伯菌检测对157株肺炎克雷伯菌进行检测分析，其中产ESBLs菌株为72株，检出率为45.9%。除亚胺培南抗生素外，产ESBLs菌株对其他12种抗生素耐药性较非产ESBLs菌株均较高，差异具有统计学意义（P＜0.05）。见表1。
3讨论
本研究结果中，157株肺炎克雷伯菌中产ESBLs菌株为72株，检出率为45.9%，较国内相关研究检出率要高。这种情况可能是因为本研究中COPD患者多为老年人群，身体抵抗力差，基础疾病也较多，而肺炎克雷伯菌在呼吸道粘膜的附着性比较强，极易侵入呼吸道而引发感染。除此之外，患者若常接受机械通气、雾化、支气管镜检查及吸痰等侵袭性操作时[4]，也极易造成呼吸道感染。本研究结果中，产ESBLs菌株对临床常用13种抗生素耐药性较非产ESBLs菌株均较高（除亚胺培南外），且与氨基糖苷类、喹诺酮类等抗生素存有交叉耐药情况。出现此现象原因为ESBLs耐药基因携带了氨基糖苷类与喹诺酮类等抗生素耐药基因，最终构成具有多样耐药型的菌株。本研究中，产ESBLs菌株对四代头孢菌素类药物耐药性普遍偏高，均超60%（除头孢西丁外）。第一代头孢菌素在抗菌性能方面[5]，对其敏感菌主要有β－溶血性链球菌及其他链球菌，包括流感嗜血杆菌、肺炎链球菌（肠球菌耐药）、克雷伯杆菌、志贺菌、葡萄球菌（包括产酶菌株）、沙门菌、大肠杆菌、奇异变形杆菌等。不同种类头孢菌素具有不同抗菌特点，如头孢唑林对一些革兰阴性菌有一定程度抑制效果，而头孢噻吩对革兰阳性菌抗菌能力较好。但第一代头孢对革兰阴性菌β-内酰胺酶抵抗性较差，所以革兰阴性菌（包含克雷伯菌）对本代抗生素较易耐药；第二代头孢菌素相比第一代而言耐药性稍有改善，主要包括头孢呋辛、头孢孟多、头孢洛克及头孢替安等；而后三代及四代头孢菌素耐药性更加优越。
综上所述，COPD患者呼吸道感染肺炎克雷伯菌发生耐药性主要因为肺炎克雷伯菌产生了ESBLs。
参考文献：
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作者简介：王晶（1986.12——），女，贵州六盘水人，就职于贵州省六盘水市人民医院，本科，住院医师，研究方向：呼吸内科临床疾病。