论文摘要
目的:建立毛细管电泳-激光诱导荧光检测（CE-LIF）的方法对重组人促红细胞生成素（recombinant human erythropoietin,rhEPO）的N-寡糖进行快速分析。方法:以N-糖苷酶酶切rhEPO样品,采用磁珠辅助法收集酶切下来的N-寡糖,以APTS对酶切下来的N-寡糖进行荧光标记,利用CE-LIF实现分离检测,通过GU数据库进行糖型鉴定。CE-LIF条件:采用未涂层熔融石英毛细管（有效长度20 cm,总长度30 cm,内径50μm）,电迁移进样,电压设为-2 kV,进样时间2 s;毛细管分离温度设为25℃,毛细管分离电压为-30 kV,分离时间5.5 min;LIF检测器的激发波长及发射波长分别为488 nm和520 nm。结果:新建方法在60 min内完成样品前处理,5 min内完成分离分析检测;FA2BG2S2、FA2（3）G1S1和A2B3个峰的迁移时间的RSD均小于0.2%,校正峰面积百分比RSD均小于2.6%（n=5）。结论:本研究建立的CE-LIF快速糖分析法高效快速,重复性好,可对糖型进行实时鉴定,适用于rhEPO制品的N-寡糖分析。
论文目录
文章来源
类型: 期刊论文
作者: 李响,于雷,史新昌,周勇,饶春明
关键词: 促红细胞生成素,糖基化,重组蛋白,数据库
来源: 药物分析杂志 2019年10期
年度: 2019
分类: 医药卫生科技,工程科技Ⅰ辑
专业: 化学,药学
单位: 中国食品药品检定研究院
基金: 国家“重大新药创制”科技重大专项资助项目(2015ZX09501008-001)
分类号: R917;O657.3
DOI: 10.16155/j.0254-1793.2019.10.14
页码: 1852-1857
总页数: 6
文件大小: 1480K
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