导读:本文包含了重组大肠杆菌论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:大肠杆菌,谷氨酸,培养基,干扰素,海藻,毒素,系统。
重组大肠杆菌论文文献综述
郑金珠,吴华伟,李相前[1]（2019）在《培养基添加剂促进重组大肠杆菌胞外分泌β-环糊精葡萄糖基转移酶的工艺优化》一文中研究指出随着对β-环糊精的需求的增加,开发提高β-环糊精葡萄糖基转移酶产量成为主要焦点之一。为了克服重组质粒pET28a-DacD-cgt-his胞外产酶量低的缺陷,研究了培养基添加剂对β-环糊精葡萄糖基转移酶胞外分泌的影响,提高胞外表达量。首先通过向培养基中分别添加表面活性剂(Tween-80、Triton X-100)、氨基酸(天冬氨酸、甘氨酸)、渗透调节剂(L-脯氨酸、山梨醇、甜菜碱)和环糊精(α-环糊精、β-环糊精、γ-环糊精)4种类型添加剂以确定对重组大肠杆菌胞外分泌β-环糊精葡萄糖基转移酶的有益添加剂;其次对Tween-80、Triton X-100、甘氨酸和L-脯氨酸进行单因素试验和正交试验以确定培养基添加剂的组合条件。结果表明,各因素对胞外产β-环糊精葡萄糖基转移酶的影响顺序依次是:Tween-80>Triton X-100>甘氨酸>L-脯氨酸;培养基添加剂促进胞外分泌β-环糊精葡萄糖基转移酶的最优组合是:Triton X-100 0.5%、Tween-80 2%、甘氨酸30 mmol/L、L-脯氨酸80 mmol/L,胞外产酶量达50.3 U/mL,是对照组的2.04倍。(本文来源于《食品科技》期刊2019年11期）
阳元娥,李永莲,张媛媛,周春晖[2]（2019）在《重组大肠杆菌高效催化合成γ-氨基丁酸》一文中研究指出[目的]实现重组大肠杆菌高效合成γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)。[方法]构建表达谷氨酸脱羧酶的基因工程菌Escherichia coli p ET-GAD,对催化工艺进行初步优化,实现高效催化L-谷氨酸脱羧反应合成GABA。[结果]在谷氨酸脱羧酶的表达过程中,维生素B6盐酸吡哆醇(PN)可以替代5-磷酸吡哆醛(PLP)作为辅酶补给,提高工程菌E. coli p ET-GAD的催化活力。在50 m L反应体系中,重组细胞浓度为8 mg/m L,底物浓度为200 mmol/L,在35℃、p H 4. 4条件下反应2 h,L-谷氨酸的转化率> 98%。为了提高GABA的生产效率,采用谷氨酸/谷氨酸钠分批补料方式控制反应过程中的p H值,GABA的最终浓度达到247 g/L。[结论]重组大肠杆菌可以高效催化合成γ-氨基丁酸,为基因工程菌工业化制备GABA提供实验依据。(本文来源于《生物技术》期刊2019年05期）
王莉洁,孙丹,罗春艳[3]（2019）在《重组大肠杆菌产人成纤维细胞生长因子8a工业化发酵工艺优化》一文中研究指出目的:探究重组大肠杆菌产人成纤维细胞生长因子8a的工厂化生产发酵工艺条件。方法:通过摇瓶和50 L发酵罐对h FGF8a重组菌的发酵培养基以及条件进行优化。结果:工业化50 L发酵罐培养,接种量为10%,最优的培养基为NaCl 1.0%、酵母提取物0.5%、胰化蛋白胨1.0%,当OD_(600)达到0.8,加入诱导剂,转速200 r/min,通气量20%,温度28℃,pH 7.2,发酵培养16 h后,可获得发酵重组人FGF8a约80 mg/L。结论:此工艺提高了hFGF8a的生产量,简化了工业发酵操作步骤,降低成本,为下游开发hFGF8a产品提供原料供给。(本文来源于《生物化工》期刊2019年05期）
周游,杨文涛,黄科谚,晋玉北,冯博[4]（2019）在《重组鹅IFN-α在大肠杆菌中的表达及抗血清制备》一文中研究指出为了研究鹅α干扰素(goIFN-α)基因原核表达产物的反应原性并进行goIFN-α抗血清的制备,试验首先根据大肠杆菌偏爱密码子对goIFN-α基因进行优化,随后采用PCR方法扩增goIFN-α编码序列并进行同源性分析。将goIFN-α片段与表达载体pET-28a连接,构建重组表达质粒pET-28a-goIFN-α,然后将重组表达质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导后进行SDS-PAGE和Western-blot检测。通过切胶回收的方法回收目的条带,将碾碎的蛋白胶与PBS混合后注入小鼠体内,15 d后回收血清进行Western-blot检测。结果表明:试验成功扩增出goIFN-α基因;与多种IFN-α基因序列进行比较,goIFN-α基因氨基酸序列的同源性为92.5%～98.1%;随后成功构建出重组表达质粒pET-28a-goIFN-α,并将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,重组蛋白goIFN-α的分子质量约为18 ku,具有良好的反应原性;回收血清进行Western-blot检测,鼠抗goIFN-α血清制备成功。说明重组goIFN-α蛋白能够在大肠杆菌中表达,大小符合预期且具有良好的反应原性,并成功制备出鼠抗goIFN-α血清。(本文来源于《黑龙江畜牧兽医》期刊2019年19期）
彭小兵,杜吉革,彭国瑞,李旭妮,董令赢[5]（2019）在《含腐败梭菌α毒素和产气荚膜梭菌ε毒素基因的重组大肠杆菌的高密度发酵和免疫效果》一文中研究指出为确定含腐败梭菌α毒素和产气荚膜梭菌ε毒素重组蛋白的生产效率并评价其作为抗原的免疫效果,用生物反应器对重组大肠杆菌DE3-pET-AE进行高密度发酵,并将其制苗后以不同抗原剂量分别接种家兔和绵羊,间隔21 d进行二免,分别测定一免、二免动物混合血清的中和效价。发酵结果显示,培养物菌体密度D_(600 nm)达20.3,相对表达量为27.6%,D_(600 nm)与相对表达量的乘积为摇瓶培养的6.5倍,菌体湿质量为37.2 g/L;十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果显示,目的蛋白以可溶形式表达。动物免疫效果评价结果显示,在家兔和绵羊上,抗原含量与免疫效果在一定的范围内均呈正相关,当接种量为300μg/只时,免疫效果均最好;对腐败梭菌毒素与D型产气荚膜梭菌毒素的血清中和效价,在家兔上一免、二免分别达4与30、15与200,在绵羊上一免、二免分别达2与30、12与250。结果表明,DE3-pET-AE菌高密度发酵可获得高产量蛋白抗原,且抗原的免疫效果明显优于《中华人民共和国兽药典》合格标准。(本文来源于《江苏农业科学》期刊2019年17期）
张雨晴,尹新坚,吴坚平,杨立荣[6]（2019）在《响应面法优化重组大肠杆菌产谷氨酸脱氢酶培养基的研究》一文中研究指出通过响应面实验设计方法对重组大肠杆菌的发酵培养基进行优化,提高胺化还原反应工艺制备L-草铵膦中关键生物催化剂谷氨酸脱氢酶的生产能力。首先通过单因素实验筛选发酵培养基最适的碳源、氮源,并用Plackett-Burman设计确定发酵培养基各成分对产酶的影响程度。然后根据Box-Bohnken的中心组合设计实验和响应面分析确定最佳的培养基成分组合。优化后的培养基组成为:甘油11. 3 g/L,安琪酵母粉905 16. 28 g/L,MgSO_4·7H_2O 0. 63 g/L,Na_2HPO_4·12H_2O 17. 1 g/L,KH_2PO_43 g/L,NH_4Cl 1. 5 g/L,NaCl 0. 5 g/L。采用优化后发酵培养基获得的谷氨酸脱氢酶对2-羰基-4-(羟基甲基膦酰基)丁酸(PPO)的催化活力为129. 1 U/m L,是LB培养基的2. 58倍,显着降低了酶催化剂的制备成本。(本文来源于《生物学杂志》期刊2019年04期）
王志宇,曹广祥,付加芳,宗工理,李俊玲[7]（2019）在《重组人骨靶向干扰素γ-1b在大肠杆菌中的表达》一文中研究指出目的建立人骨靶向干扰素γ-1b的高效原核表达体系。方法从Drug Bank数据库下载人干扰素γ-1b氨基酸序列,在羧基端加上10个天冬氨酸标签作为骨靶向分子。采用大肠杆菌偏爱密码子,DNA Star软件分析获得骨靶向性干扰素γ-1b的基因序列。人工合成基因序列并克隆入pET3c质粒表达载体。将上述pET3c-rhIFNγ-1b-D10重组表达载体转入大肠杆菌BL21,筛选高效表达菌株。分离包涵体,8mol/L尿素溶解,利用镍柱亲和层析纯化重组蛋白。Western blot检测目的蛋白的特异性表达。结果测序结果显示所克隆的骨靶向rhIFNγ-1b基因序列正确,筛选出高效表达菌株。经SDS-PAGE显示在相对分子质量19KD处出现特异的目的蛋白表达带,表达量约占全菌蛋白的30%。表达产物以包涵体形式存在,8mol/L尿素变性后经镍柱亲和层析纯化,纯度大于90%,浓度为0.8mg/mL。Western检测显示在19KD处出现特异性目的条带。结论成功在大肠杆菌中表达了人骨靶向干扰素γ-1b,为研究其生物学活性及用于骨硬化症的治疗奠定基础。(本文来源于《罕少疾病杂志》期刊2019年04期）
朱泓宇,魏金亚[8]（2019）在《重组大肠杆菌top10(PET28a-makinase9)抗逆性分析》一文中研究指出将来源于蓝藻的Makinase9基因导入载体PET28a中,在原核表达的基础上,利用分光光度计检测重组大肠杆菌top10(PET28a-makinase9)的抗逆性。重组大肠杆菌top10(PET28a-makinase9)的抗NaCl在一定浓度范围内会随盐浓度增大而增强,对抗NaHCO_3较为敏感,表现为一定范围内既有促进又有抑制,不具有抗O■和抗Cu~(2+)胁迫性。为蓝藻的二元系统和双组分系统在其他生物渗透胁迫信号识别和转导中的研究提供了依据。(本文来源于《环境科学导刊》期刊2019年04期）
张真,汪燕,马振刚[9]（2019）在《提高大肠杆菌重组蛋白可溶性表达方法研究进展》一文中研究指出大肠杆菌表达系统与其他外源表达系统相比具有重组蛋白产量高、易操作、生长速度快和成本低等特点。通过大肠杆菌表达重组蛋白是一种既高效又经济的途径。然而,外源蛋白在大肠杆菌中表达时往往处于还原性环境的胞质中,而在胞质中外源蛋白不易形成二硫键,出现外源蛋白无法正确折迭的现象,从而形成不可溶的包涵体。文章在近年提高大肠杆菌重组蛋白可溶性表达研究的基础上,从选择适当的载体和宿主、外源蛋白与其他辅助蛋白共表达、降低蛋白合成速率、提高周质蛋白表达、融合标签表达、肽标签表达、替换蛋白质中的氨基酸、改变培养基的条件等方面进行了综述,为研究者根据外源蛋白自身特点,优化外源蛋白可溶性表达方法提供了参考。(本文来源于《广东蚕业》期刊2019年07期）
晏星辰,黄璞,王鑫沂,姜艳芝,李斯斯[10]（2019）在《高密度发酵重组大肠杆菌产海藻糖合成酶》一文中研究指出酶法催化是目前生产海藻糖的主要手段。本文中,笔者通过高密度发酵重组大肠杆菌产海藻糖合成酶,进而以麦芽糖为底物,催化生产海藻糖。首先根据大肠杆菌高密度发酵条件要求,在揺瓶中对基因工程菌进行了培养基、发酵条件和诱导条件的逐一优化;然后在5 L和50 L发酵罐中进行批次补料发酵的放大实验;最后采用变指数-恒pH法的策略发酵重组大肠杆菌,结果OD_(600)达到97,海藻糖合成酶酶活达到(24 000±350) U/mL,实现了海藻糖合成酶的重组大肠杆菌高密度发酵生产,极大提高了海藻糖的生产效率。(本文来源于《生物加工过程》期刊2019年04期）
重组大肠杆菌论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
[目的]实现重组大肠杆菌高效合成γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)。[方法]构建表达谷氨酸脱羧酶的基因工程菌Escherichia coli p ET-GAD,对催化工艺进行初步优化,实现高效催化L-谷氨酸脱羧反应合成GABA。[结果]在谷氨酸脱羧酶的表达过程中,维生素B6盐酸吡哆醇(PN)可以替代5-磷酸吡哆醛(PLP)作为辅酶补给,提高工程菌E. coli p ET-GAD的催化活力。在50 m L反应体系中,重组细胞浓度为8 mg/m L,底物浓度为200 mmol/L,在35℃、p H 4. 4条件下反应2 h,L-谷氨酸的转化率> 98%。为了提高GABA的生产效率,采用谷氨酸/谷氨酸钠分批补料方式控制反应过程中的p H值,GABA的最终浓度达到247 g/L。[结论]重组大肠杆菌可以高效催化合成γ-氨基丁酸,为基因工程菌工业化制备GABA提供实验依据。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
重组大肠杆菌论文参考文献
[1].郑金珠,吴华伟,李相前.培养基添加剂促进重组大肠杆菌胞外分泌β-环糊精葡萄糖基转移酶的工艺优化[J].食品科技.2019
[2].阳元娥,李永莲,张媛媛,周春晖.重组大肠杆菌高效催化合成γ-氨基丁酸[J].生物技术.2019
[3].王莉洁,孙丹,罗春艳.重组大肠杆菌产人成纤维细胞生长因子8a工业化发酵工艺优化[J].生物化工.2019
[4].周游,杨文涛,黄科谚,晋玉北,冯博.重组鹅IFN-α在大肠杆菌中的表达及抗血清制备[J].黑龙江畜牧兽医.2019
[5].彭小兵,杜吉革,彭国瑞,李旭妮,董令赢.含腐败梭菌α毒素和产气荚膜梭菌ε毒素基因的重组大肠杆菌的高密度发酵和免疫效果[J].江苏农业科学.2019
[6].张雨晴,尹新坚,吴坚平,杨立荣.响应面法优化重组大肠杆菌产谷氨酸脱氢酶培养基的研究[J].生物学杂志.2019
[7].王志宇,曹广祥,付加芳,宗工理,李俊玲.重组人骨靶向干扰素γ-1b在大肠杆菌中的表达[J].罕少疾病杂志.2019
[8].朱泓宇,魏金亚.重组大肠杆菌top10(PET28a-makinase9)抗逆性分析[J].环境科学导刊.2019
[9].张真,汪燕,马振刚.提高大肠杆菌重组蛋白可溶性表达方法研究进展[J].广东蚕业.2019
[10].晏星辰,黄璞,王鑫沂,姜艳芝,李斯斯.高密度发酵重组大肠杆菌产海藻糖合成酶[J].生物加工过程.2019
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