尼罗罗非鱼TGF-β1蛋白原核表达及多克隆抗体的制备

尼罗罗非鱼TGF-β1蛋白原核表达及多克隆抗体的制备

论文摘要

为制备尼罗罗非鱼TGF-β1多克隆抗体,采用同源重组技术构建尼罗罗非鱼pET-B2m-TGF-β1原核表达载体,转入大肠杆菌B21中诱导表达,将重组表达蛋白质纯化后免疫大耳兔制备多克隆抗体,采用Western Blot和ELISA检测抗体的特异性和效价。结果表明,构建的pET-B2m-TGF-β1原核表达载体经诱导表达获得了分子量为5.2×104的重组蛋白质,免疫大耳兔获得效价为1∶2 048 000的抗尼罗罗非鱼TGF-β1多克隆抗血清,该抗体能够特异性地识别原核表达的TGF-β1蛋白。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 蛋白质结构分析及抗原表位预测
  •     1.2.2 目的基因的扩增与表达质粒的构建
  •     1.2.3 重组蛋白质的诱导表达
  •     1.2.4 多克隆抗体的制备及鉴定
  • 2 结果与分析
  •   2.1 TGF-β1蛋白结构及抗原表位分析
  •   2.2 TGF-β1表达载体的构建与鉴定
  •   2.3 TGF-β1重组蛋白的表达与鉴定
  •   2.4 TGF-β1重组蛋白的提取与纯化
  •   2.5 TGF-β1蛋白血清抗体的免疫效价
  •   2.6 重组蛋白TGF-β1抗血清的特异性
  •   2.7 TGF-β1抗体的纯度
  • 3 讨 论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 余艳玲,冯鹏霏,潘传燕,陈晓汉,林勇,张永德,罗洪林

    关键词: 罗非鱼,蛋白,原核表达,多克隆抗体

    来源: 江苏农业学报 2019年06期

    年度: 2019

    分类: 农业科技

    专业: 水产和渔业

    单位: 广西水产科学研究院广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室

    基金: 国家自然科学基金面上项目(31760765,31372553),广西自然科学基金项目(2015GXNSFAA139068)

    分类号: S917.4

    页码: 1407-1412

    总页数: 6

    文件大小: 1108K

    下载量: 109

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