吴红红[1]2003年在《脓毒血症过程TNF-α和肝脏细胞凋亡关系及其机制探讨》文中研究说明目的：探讨脓毒血症时TNF-α与肝细胞凋亡的关系以及糖皮质激素对TNF-α和肝细胞凋亡的影响，了解脓毒血症时肝脏功能降低的机制及糖皮质激素的作用机制。方法：将36只雄性wistar大鼠随机分为6组，其中6只作为对照，另外30只采用盲肠结扎穿孔术(CLP)致脓毒血症模型，其中24只于术后30min、60min、120min、180min时限又分为4组作实验组，另6只于术后即给予糖皮质激素地塞米松(5mg／kg)作为干预组。各组均测定肝组织TNF-α和Bcl-2蛋白表达及肝细胞凋亡的情况，同时测定肝脏功能的变化。结果：CLP术后肝组织中TNF-α水平持续升高，与对照组相比有显著差异(p＜0.01)，但30min组与60min组的TNF-α含量相比变化无统计学差异(p＞0.05)，至180min时TNF-α含量达高峰，与60min和120min组分别相比均有统计学差异(p＜0.01)。血清TNF-α含量变化与肝组织TNF-α的表达具有一致性。CLP术后肝细胞凋亡数目与对照组相比有显着差异，并呈进行性增加(p＜0.01)。肝细胞的凋亡数目与肝组织TNF-α的表达也呈现一致性。CLP术后肝组织Bcl-2蛋白与TNF-α蛋白的表达相比表达较弱，但与对照组仍有差异(p＜0.01)。血浆中ALT／AST呈异常改变，CLP术后血浆中ALT亦增加，与对照组相比有显着差异，且呈进行性增加(p＜0.01)；术后血浆中AST增加，但不明显(p＞0.05)，120min、180min时才显着增加(p＜0.01)。同时术后肝脏组织肝小叶结构紊乱，门脉区有较多炎性细胞浸润，肝细胞明显肿胀，有点状坏死。电镜下实验组肝组织胆小管扩张，血管内皮细胞肿胀并有脱落，有炎细胞穿出血管。肝细胞内粗面内质网扩张，线粒体肿胀、基质变淡、婿不清楚，异染色体增多并有边集，有变性和坏死的肝细胞。而上述变化在地塞米松组减轻。结论：由CLP所致的脓毒血症过程中，肝脏组织TNF－口蛋白的表达和血浆中TNF a蛋白的含量进行性增加，通过激活促细胞凋亡的程序，相对抑制抗凋亡蛋白BclZ的表达而诱导肝细胞凋亡。与肝脏结构受损，功能下降是一致的。早期应用地塞米松处理脓毒血症对肝脏有一定的保护作用，其机制可能是抑制了脓毒血症早期细胞因子TNF－口的释放以及由此导致的细胞凋亡的发生。
吴红红, 高继玲, 张建龙, 王红梅, 玛依努尔.伊明尔艾山[2]2006年在《脓毒血症过程肝脏结构和功能关系的研究》文中研究指明目的:研究脓毒血症时肝脏功能降低的机制及糖皮质激素的作用机制。方法:将24只雄性Wistar大鼠随机分为4组,其中6只作为对照组,另外18只采用盲肠结扎穿孔术(CLP)致脓毒血症模型,其中12只于术后60、180min时限又分为2组作实验组,另6只于术后即给予糖皮质激素地塞米松(5 mg/kg)作为干预组。各组均测定肝组织TNF-α和Bcl-2蛋白表达及肝细胞凋亡的情况,同时测定肝脏功能的变化。结果:CLP术后肝组织中TNF-α水平持续升高,与对照组相比有统计学差异(P<0.01)。血清TNF-α含量变化与肝组织TNF-α的表达具有一致性。CLP术后肝细胞凋亡数目与对照组相比有统计学差异,并呈进行性增加(P<0.01)。肝细胞的凋亡数目与肝组织TNF-α的表达也呈现一致性。CLP术后肝组织Bcl-2蛋白与TNF-α蛋白相比表达较弱,但与对照组仍有统计学差异(P<0.01)。血浆中ALT/AST呈异常改变,同时术后肝脏组织结构紊乱。结论:由CLP所致的脓毒血症过程中,肝脏组织TNF-α蛋白的表达和血浆中TNF-α蛋白的含量进行性增加,通过激活促细胞凋亡的程序,相对抑制抗凋亡蛋白Bcl-2的表达而诱导肝细胞凋亡。与肝脏结构受损、功能下降是一致的。早期应用地塞米松处理脓毒血症对肝脏有一定的保护作用,其机制可能是抑制了脓毒血症早期细胞因子TNF-α的释放,以及由此导致的细胞凋亡的发生。
肖月[3]2017年在《调节TLR9信号通路或中性粒细胞表面TLR9表达对小鼠全身性炎症应答综合征的影响》文中研究表明组织损伤或细菌感染可以诱导机体产生全身性炎症应答综合征(SIRS),其中由感染引起的SIRS也称为脓毒症(Sepsis),这种病症的高致死率一直是临床急需解决的难题。Toll样受体9(TLR9)信号通路介导的炎症应答在SIRS或脓毒症发生发展中起重要作用。本文采用灼伤诱导SIRS样小鼠模型和大肠杆菌腹腔感染诱导脓毒血症样小鼠模型,观察TLR9信号通路在疾病发生发展中的作用,并分别采用免疫抑制性脱氧寡核苷酸AAAG ODN及小分子化合物琥珀酸盐对模型小鼠的炎症应答进行干预,结果发现:AAAG ODN经腹腔注射可明显提高SIRS模型小鼠生存率,这种作用与TLR9信号通路下游干扰素调节因子5(IRF5)核内转位受阻有关;琥珀酸盐经尾静脉注射可明显提高脓毒症模型小鼠的生存率,这种作用与血循环中白细胞及感染局部腹腔灌洗细胞中的中性粒细胞表面TLR9(s TLR9)水平上调有关。综上,调节TLR9信号通路介导的炎症应答及s TLR9在中性粒细胞上的表达可控制损伤或感染引起的全身炎症反应,为临床挽救SIRS或脓毒症病人提供了有价值的实验数据。
荆喜中[4]2016年在《野生型小鼠脓毒血症模型的建立及应用研究》文中研究表明目的:脓毒血症及其引发的脓毒症休克和多器官衰竭是临床医生和研究者共同关注的问题,目前普遍认为脓毒血症病理机理的根本原因是机体炎症反应和抗炎反应失衡。腺苷A2A受体可介导抑制免疫反应的信号,减轻组织损伤,已有研究报道,腺苷A2A受体拮抗剂能有效提高脓毒血症小鼠生存率。在炎症的发生发展过程中,内皮细胞和炎症细胞都参与疾病过程,A2A受体拮抗剂对脓毒血症的调节作用是否与内皮细胞的功能有关还未见报道。因此,本课题将利用内皮细胞腺苷A2A受体特异性敲除小鼠,采用盲肠结扎穿孔手术(CecalLigation and Puncture,CLP)建立小鼠脓毒血症模型,并与A2A受体拮抗剂的治疗作用进行比较,探讨A2A受体拮抗剂对脓毒血症的调控作用与内皮细胞功能的相关性。方法:1.小鼠脓毒血症模型建立。选取9~12W的C57BL/6J雄性小鼠,通过结扎盲肠50%和75%后穿孔手术,建立脓毒血症模型。模型建立后,统计小鼠生存率;细菌培养检测血液和腹腔液载菌量的变化;血常规仪检测白细胞数、中性粒细胞数、单核细胞、淋巴细胞、血小板数目变化;血生化仪检测谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、血清尿素氮(BUN)水平;Luminex仪检测细胞因子GM-CSF、INF-γ、IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-12、IL-15、IL-17、MIP-1α、MIP-1β、MIP-2表达;ELISA检测内皮功能紊乱分子血栓调节蛋白(Thrombomodulin,TM)、E-选择素(E-selection)、血管细胞间黏附分子-1(VCAM-1)、可溶性细胞黏附因子-1(sICAM-1)、内皮细胞生长因子(vegf)及其受体vegfr-1;he染色检测clp术后小鼠肺、肝、肾组织血栓形成及其它病理变化。2.腺苷a2a受体拮抗对脓毒血症的治疗作用。根据c57bl/6j野生型小鼠术后变化指标,利用内皮细胞上腺苷a2a受体特异性敲除小鼠(a2afloxp/floxpcdh5cre/+)和背景对照小鼠(a2afloxp/floxp)进行clp实验,同时对a2afloxp/floxp小鼠术后给予腺苷a2a受体抑制剂kw6002(10mg/kg,s.c.)和溶剂,进行a2a受体拮抗剂对小鼠脓毒血症治疗机制的研究。术后统计小鼠生存率;检测血液和腹腔液16h和48h载菌量变化;血常规和血液生化指标;细胞因子il-1α、il-1β、il-2、il-4、il-6、il-10、il-12、il-15、il-17和趋化因子mip-1α、mip-1β、mip-2水平;内皮功能紊乱标志物tm、e-selection、vcam-1、sicam-1、vegf、vegfr-1的变化;肺、肝、肾组织病理检测血栓形成等病理变化;综合以上数据评价腺苷a2a受体抑制对脓毒血症的治疗作用与小鼠内皮细胞腺苷a2a受体敲除的相关性。结果:1.c57bl/6j小鼠脓毒血症模型建立小鼠进行clp手术,其生存率与盲肠结扎位点相关,结扎小鼠盲肠75%术后4天小鼠全部死亡,结扎小鼠盲肠50%术后12天生存率约为40%;采用50%结扎手术,与假手术组比,临床血液指标检测显示,术后16h和48h与假手术组相比白细胞、中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞明显下降;血生化指标显示谷丙转氨酶(alt)和谷草转氨酶(ast),血清尿素氮(bun)明显升高;细胞因子检测结果显示,促炎因子il-1α、il-6、tnf-α和抗炎因子il-10以及趋化因子mip-1α、mip-1β、mip-2明显上升,其它因子未见明显变化;内皮功能紊乱标志物检测显示sicam-1、e-slectin、vegf、vegfr1和tm呈上升趋势,vcam-1未见明显变化。组织病理检测可见clp术后小鼠肺组织间质充血,有弥散性血管内凝血(dic)和血栓形成,肝脏和肾脏也出现充血和血栓,但没有肺脏病变明显。2.腺苷a2a受体拮抗对脓毒血症治疗作用a2afloxp/floxpcdh5cre/+小鼠是血管内皮腺苷受体条件性敲除小鼠,在生理正常条件下不影响渗透功能,在clp疾病状况下,给予evansblue显示肝、肾、肺组织的渗透下降。利用a2afloxp/floxpcdh5cre/+小鼠和a2afloxp/floxp小鼠进行clp实验,同时对a2afloxp/floxp小鼠术后皮下给予腺苷受体抑制剂kw6002(10mg/kg)和溶剂。结果显示:(1)小鼠死亡率:a2afloxp/floxp小鼠12天死亡率95%,a2afloxp/floxpcdh5cre/+小鼠12天死亡率55%,血管内皮腺苷受体a2a敲除小鼠进行clp实验明显比对照小鼠的死亡率降低。a2afloxp/floxp小鼠溶剂组小鼠死亡率85%,给抑制剂组为38%,a2a抑制剂给予clp术后小鼠与对照组相比,明显降低死亡率。(2)血液中载菌量检测:a2afloxp/floxpcdh5cre/+小鼠术后16h,比a2afloxp/floxp小鼠明显下降,术后48h也显示相似的下降趋势;a2afloxp/floxp小鼠术后给予抑制剂组术后16h的载菌量比溶剂组显示下降趋势,术后48h也显示相似的下降趋势。腹腔载菌量检测,a2afloxp/floxpcdh5cre/+小鼠术后16h,比a2afloxp/floxp小鼠明显下降,术后48h也显示相似的下降趋势;a2afloxp/floxp小鼠术后给予抑制剂组术后16h的载菌量比溶剂组显示下降趋势,术后48h也显示相似的下降趋势。(3)血常规检测:a2afloxp/floxpcdh5cre/+小鼠和a2afloxp/floxp小鼠比较,术后16h、48h白细胞数未见明显变化;白细胞分类中中性粒细胞数在术后16h出现下降趋势,其它单核细胞数和淋巴细胞数上都未见明显变化。a2afloxp/floxp小鼠术后给予抑制剂组与溶剂组比较,术后16h、48h白细胞数未见明显变化;白细胞分类中中性粒细胞数在术后16h出现下降趋势,单核细胞数和淋巴细胞数上都未见明显变化。(4)血生化指标检测:a2afloxp/floxpcdh5cre/+小鼠和a2afloxp/floxp小鼠比较,术后16h,48h肝转氨酶ast和尿素氮bun出现下降趋势,谷丙转氨酶alt未见明显变化趋势,但是a2afloxp/floxp小鼠术后给予抑制剂与溶剂比较,术后16h,48halt,ast,bun未见明显变化趋势。(5)细胞因子检测:a2afloxp/floxpcdh5cre/+小鼠和a2afloxp/floxp小鼠比较,术后16h,炎症因子il1α、il10、il6、mip1β、mip2明显下降,其它因子mip1α、tnfα水平无明显变化;术后48h检测的炎症因子,未见明显变化。a2afloxp/floxp小鼠术后给予抑制剂组与溶剂组比较,术后16h,il1α、il10、il6、mip1β、mip2明显下降,其它因子mip1α、tnfα水平无明显变化;术后48h检测的炎症因子,未见明显变化。(6)内皮功能相关标志物检测:a2afloxp/floxpcdh5cre/+小鼠和a2afloxp/floxp小鼠比较,术后16h,tm、tf呈下降趋势,vegf未见明显变化;术后48h,tm维持下降趋势,vegf出现下降趋势,tf未见明显变化。a2afloxp/floxp小鼠术后给予抑制剂组与溶剂组比较,术后16h,tm、tf、vegf出现明显的下降趋势,术后48h,tm维持下降趋势,TF、VEGF未见明显变化。(7)组织病理检测:术后16hA2Afloxp/floxp小鼠肺脏充血,有较大血栓形成在血管内,A2Afloxp/floxp cdh5cre/+小鼠肺组织间隔可见血栓形成,抑制剂组较溶剂组充血和血栓情况减轻。48h各组小鼠肺组织血管内和肺间隔均可见较为严重的血栓形成;肝组织16h病理检测可见,A2Afloxp/floxp小鼠和A2Afloxp/floxp cdh5cre/+小鼠以及溶剂组和伊曲茶碱组肝脏血管内均偶尔可见充血和血栓形成。肾组织病理检测各组小鼠基本正常,A2Afloxp/floxp组和溶剂组小鼠出现肾组织内充血及血栓形成,A2Afloxp/floxp cdh5cre/+小鼠以及伊曲茶碱组肾脏较少充血和血栓形成。结论:1.C57野生型小鼠CLP手术后形成脓毒血症特征,血液出现大量细菌,损伤肝、肾功能,IL-6等促炎因子和趋化因子升高,内皮功能相关标志物TM、VEGF发生变化。2.腺苷A2A受体抑制剂能改善小鼠脓毒血症的生存,降低血液中细菌量,抑制IL6、IL1α、IL10、MIP1α、MIP1β、MIP2升高,降低VEGF、TM和E-slectin和TF水平。3.血管内皮腺苷A2A受体敲除小鼠进行CLP实验,也能改善小鼠脓毒血症的生存,降低血液细菌载量,保护肝肾功能,抑制IL6、MIP2的升高,降低TM、E-slectin、VEGFR1和TF水平。4.腺苷A2A受体抑制剂对小鼠脓毒血症有治疗作用,这种治疗作用与内皮的腺苷受体抑制具有紧密的相关性。
李华福[5]2018年在《G+/G-尿源性脓毒血症早期淋巴细胞亚群以及相关指标改变的临床研究》文中提出[目的]探讨革兰氏染色阳性菌/革兰氏染色阴性菌尿源性脓毒血症早期淋巴细胞亚群以及相关指标改变。[方法]选取70例革兰氏染色阳性菌引起尿源性脓毒血症病人(革兰氏阴性组)和81例革兰氏染色阳性菌引起脓毒血症病人(革兰氏阳性组)作为研究对象。检测以上研究对象血常规、降钙素原、T淋巴细胞亚群计数、凝血五项、C反应蛋白、白蛋白以及肌酐,并对以上所测定的指标进行差别分析,同时做鉴别诊断的ROC曲线分析各指标的敏感性以及特异性。[结果]CD8+T淋巴细胞、白细胞、血小板、尿白细胞以及肌酐在两组之间均未发现显着差异(P>0.05)。与革兰氏阳性组对比,革兰氏阴性组CD4+T淋巴细胞、CD3+T淋巴细胞、血红蛋白、白蛋白均明显下降(P<0.05);降钙素原、C反应蛋白以及凝血五项均明显上升(P<0.05)。CD4+T淋巴细胞、CD3+T淋巴细胞、血红蛋白、白蛋白、降钙素原、C反应蛋白以及凝血五项对于鉴别两组均有较高的敏感性和特异性,降钙素原诊断的敏感性和特异性最高,分别达到0.753和0.629。[结论]对于尿源性脓毒血症而言,革兰氏染色阴性菌较革兰氏染色阳性菌对患者的免疫、造血、肝功能以及凝血的状况造成更大的影响。通过检测患者降钙素原和C反应蛋白能够为我们提高尿源性脓毒血症种类早期鉴别诊断具有一定的价值。
吴昆鹏, 陈莹, 言彩红, 黄治家, 吴正茂[6]2015年在《辛伐他汀对脓毒血症大鼠心肌肿瘤坏死因子-α和高迁移率族蛋白-1表达的影响及机制》文中认为目的探讨辛伐他汀保护脓毒血症大鼠心肌损伤的可能机制。方法 SD大鼠45只随机分为对照组、脓毒血症组和辛伐他汀+脓毒血症组(观察组)各15只,对照组和脓毒血症组给予生理盐水灌胃2周,观察组给予辛伐他汀(20mg/kg)灌胃2周;脓毒血症组和观察组大鼠行盲肠结扎穿孔法制作脓毒血症模型,对照组大鼠不做处理;术后48h取各组大鼠心肌,行组织病理学检查观察心肌组织的病理改变情况,采用ELISA法检测心肌组织肿瘤坏死因子-α表达水平,采用Western blot法检测心肌组织高迁移率族蛋白-1表达水平,采用TUNEL法检测心肌凋亡指数。结果脓毒血症组大鼠心肌纤维水肿、疏松,间质充血水肿,胶原纤维增多,部分内皮细胞水肿脱落,观察组心肌组织改变较脓毒血症组轻;脓毒血症组心肌组织肿瘤坏死因子-α[(47.34±0.47)ng/L]、高迁移率族蛋白-1[(0.85±0.01)μg/L]水平和心肌凋亡指数[(21.57±2.67)%]明显高于观察组[(28.16±1.40)ng/L、(0.42±0.02)μg/L、(7.82±1.04)%]和对照组[(21.54±0.83)ng/L、(0.20±0.03)μg/L、(2.58±0.82)%](P<0.05),观察组高于对照组(P<0.05)。结论辛伐他汀可减少脓毒血症大鼠心肌组织肿瘤坏死因子-α、高迁移率族蛋白-1表达水平及心肌凋亡,对脓毒血症心肌抑制有保护作用。
卢海源[7]2014年在《Cs菌丝粉对大鼠脓毒性急性肾损伤中klotho蛋白表达的影响》文中认为目的通过检测脓毒血症急性肾损伤大鼠肾组织中klotho蛋白的表达情况，并应用Cs菌丝粉干预，来研究klotho蛋白在脓毒血症急性肾损伤发病机制中的作用。方法选取健康雄性SD大鼠72只（等级：SPF），体重250g左右，4周龄，随机分为空白对照组（n=16）、CLP组（模型组）（n=28）、Cs菌丝粉干预组（n=28）。对照组普通进食水，开腹后找到盲肠只作轻轻挤压，不结扎穿刺，模型组普通进食水，行CLP术；干预组为Cs菌丝粉干预组，于术前1周开始冬虫夏草[Cs]组5g／（kg·d）灌胃，行CLP术。对照组术前15min、术后3h皮下注射生理盐水20mg/kg，后2组分别于术前15min、术后3h皮下注射盐酸左氧氟沙星20mg/kg，术后为补充手术过程中丢失体液量给以生理盐水5ml/kg皮下注射。每组分别于术后6h、12h、24h通过腹主动脉采血（对照组每组每个时间点2只，其余每组每个时间点6只），然后分离血清（用3000r/min离心机离心15min），检测血清肌酐及尿素氮，ELISA法测定肾组织匀浆中的klotho蛋白、MDA、CAT水平；取静脉血做细菌培养；取出肾脏，将右肾放入4%多聚甲醛中固定24至48小时，之后用石蜡包被，通过HE染色观察肾组织病理损伤，免疫组化法检测klotho蛋白表达及定位。每组于术后12小时分别随机取一只老鼠左肾上级约1cm3放入戊二醛中固定，用于电镜检测行电镜检测。每组余10只大鼠观察生物学行为变化及4天、7天存活率。结果1模型组大鼠精神欠佳，运动迟缓；进食水较少；毛发散乱直立。剖腹可见腹水为淡血性，且量较多，明显恶臭味；肠管充血水肿，肠管组织粘连较重，部分盲肠末端发黑。对照组无上述变化。干预组大鼠术后一般状况介于A、模型组之间。2血肌酐：干预组各时间点血肌酐浓度显着低于模型组（P<0.05），于12h后开始下降，24h接近对照组水平（P>0.05），但仍稍高于对照组；与对照组比较，模型组血肌酐浓度则显着升高（P<0.05）。3血尿素氮：与对照组比较，模型组各时间点尿素氮水平均显着升高（P<0.05），干预组各时间点血尿素氮水平较模型组明显降低（P<0.05），但6h时与对照组差异不大（P>0.05），但仍明显高于对照组。4免疫组化肾组织klotho蛋白表达情况：与对照组、模型组相比，干预组肾组织klotho蛋白表达明显上升（P<0.05）。5肾组织匀浆klotho蛋白水平：模型组血klotho蛋白水平明显低于对照组（P<0.05），干预组则明显高于模型组（P<0.05）。6肾组织匀浆MDA水平：模型组明显升高（P<0.05），干预组较模型组明显下降（P<0.05）。7肾组织匀浆CAT含量：干预组较模型组明显升高（P<0.05），模型组较对照组明显下降（P<0.05）。8血细菌培养，对照组无细菌生长，模型组、干预组均可见细菌生长，可检出大肠杆菌、变形杆菌、假单胞菌属和少量格兰阳性球菌。9对照组、模型组、干预组4天存活率分别为100%、30%、40%；干预组与模型组比较差异虽无统计学意义，但干预组死亡大鼠的存活时间可延长24h左右。对照组、模型组、干预组7天存活率分别为100%、20%、30%，模型组、干预组比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论1Cs菌丝粉能增强脓毒性急性肾损伤大鼠koltho蛋白的表达，对肾脏具有一定的保护作用。2氧化应激损伤参与了脓毒性急性肾损伤的发病过程。3Cs菌丝粉能改变脓毒性急性肾损伤大鼠的预后。
杨磊波[8]2014年在《硫化氢对尿源性脓毒血症肾组织细胞因子表达的影响》文中指出目的建立尿源性脓毒血症兔模型；通过应用硫化氢干预,比较兔肾组织细胞因子的表达，明确外源性硫化氢对脓毒血症兔模型肾组织细胞因子的影响，从而揭示硫化氢在尿源性脓毒血症肾组织中发挥作用的可能机制。方法1、家兔左侧输尿管内注入大肠杆菌（ATCC25922），并结扎左侧输尿管远端，模拟上尿路急性梗阻并感染所致脓毒血症兔模型。2、将48只健康雄性家兔随机分成4组，每组12只。正常组（Control组）；假手术组（Sham组）；脓毒血症组（Sepsis组）；硫氢化钠组（NaHS组）。3、每组动物按时间点又分为术后12小时、术后24小时、术后36小时、术后48小时4个时间点。分别于每个时间点观测肛温（RT）、呼吸（RR）、心率（HR）。4、术前、术后12小时、术后24小时、术后36小时、术后48小时分别采血行外周血细胞计数分析（WBC、中性粒细胞）、肾功能（Cr、BUN）测定。5、术后12小时、24小时、36小时、48小时各组家兔肾组织分别行HE染色，光学显微镜下观察形态结构变化。Western blot法检测各组肾组织TNF-α、IL-10的蛋白表达。RT-PCR（reverse translation-PCR）法检测NF-κB的基因表达。结果1、一般情况：sham组的体温、心率、呼吸频率在各个时间点上与control组比较，变化不大（P>0.05）；随造模时间的延长，sepsis组明显高于control、sham组（P<0.05），并呈上升趋势，NaHS组略低于sepsis组（P<0.05）。2、血液检测指标：各组术前的血细胞计数（WBC、中性粒细胞）、Cr、Bun比较，差异无统计学意义。control组的血细胞计数（WBC、中性粒细胞）、Cr、Bun在12h、24h、36h、48h与sham组比较，差异无统计学意义（P>0.05）；随着造模时间的延长，sepsis组明显高于control、sham组（P<0.05），并呈上升趋势，NaHS组与sepsis组比较，有下降趋势，其差异有统计学意义（P<0.05）。3、病理形态学：HE染色光镜下可见sepsis组肾组织大量炎症细胞浸润，肾小球萎缩、肾小囊扩张，肾小管管腔变大。NaHS组较sepsis组上述变化有所减轻。4、Western Blot法检测肾组织TNF-α、IL-10的蛋白表达：Control组肾组织TNF-α的蛋白表达和sham组相比较，差异无统计学意义（P>0.05）；sepsis组明显高于control、sham组，随造模时间延长，呈上升趋势（P<0.05）；NaHS组与sepsis组比较，有下降趋势（P<0.05）。Control组肾组织IL-10的蛋白表达和sham组相比较，差异无统计学意义（P>0.05）；sepsis组明显高于control、sham组，随造模时间延长，呈上升趋势（P<0.05）；NaHS组与sepsis组比较，仍呈现上升趋势（P<0.05）。5、RT-PCR（reverse translation-PCR）法检测NF-κB的基因表达：Control组NF-κB的基因表达和sham组相比较，差异无统计学意义（P>0.05）；sepsis组高于control、sham组，随造模时间延长，呈现上升趋势（P<0.05）；NaHS组与sepsis组比较，有下降趋势（P<0.05）。结论1、成功建立尿源性脓毒血症兔模型。2、外源性硫化氢抑制尿源性脓毒血症模型肾组织NF-κB及TNF-α的表达，上调IL-10来减轻尿源性脓毒血症肾损伤。
马晓辉, 张翠云, 王继东, 李养军[9]2015年在《乌司他丁治疗大鼠脓毒症的量效关系研究》文中研究说明目的观察不同剂量乌司他丁对脓毒症大鼠炎症相关因子的影响。方法 65只雌性SD大鼠随机分为5组:正常组(空白对照)、模型组、乌司他丁U1(10万u/kg)组、乌司他丁U2(30万u/kg)组、乌司他丁U3(60万u/kg)组。脓毒症大鼠造模成功后,按不同剂量经腹腔给药,分别于用药后3、6、12 h给予大鼠取血,ELISA法检测各组大鼠血清TNF-α、IL-1β水平,免疫组化检测肺组织Bcl-2蛋白的表达情况。结果模型组及乌司他丁组各时间点的血清TNF-α、IL-1β均高于正常组(P<0.05);乌司他丁组各时间点血清TNF-α、IL-1β的表达低于模型组(P<0.05);而其中U2组的TNF-α、IL-1β的血清浓度与U1组及U3组的差别有统计学意义(P<0.05)。肺组织切片HE染色可见U2组的炎症反应较模型组明显减轻;免疫组化提示U2组的Bcl-2蛋白表达强于模型组。结论不同剂量乌司他丁均可减轻脓毒症大鼠的炎症反应,且在剂量30万u/kg时疗效最显着。
刘宾[10]2013年在《稀释络合碘对大鼠腹腔内炎症与粘连影响的实验研究》文中进行了进一步梳理目的：观察不同浓度络合碘对脓毒症模型中大鼠腹腔内炎症的治疗作用及腹腔内粘连的影响，为术中使用络合碘液预防和治疗腹腔内炎症与粘连提供实验依据。方法：1.将84只SD实验大鼠适应性分笼喂养一周，按随机数字表随机分为正常生理盐水组（A），1：5稀释络合碘组（B），1：10稀释络合碘组（C），1：20稀释络合碘组（D），模型组（E），假手术组（F）。2.A，B，C，D，E五组大鼠，以7号丝线结扎距盲肠盲端1cm处，用18号针头刺穿盲肠，并挤出少许粪便，建立SD大鼠盲肠结扎穿孔术(Cecal ligation and puncture,CLP)腹膜炎动物模型，观察各组96小时大鼠存活率，F组仅仅打开腹腔，翻动肠管。3.建模24h后，A，B，C，D四组均解除盲肠结扎梗阻，并关闭盲肠穿孔处，分别用生理盐水，1:5稀释络合碘，1:10稀释络合碘，1:20稀释络合碘清洗腹腔，E组仅解除盲肠结扎梗阻及盲肠漏口关闭，六组大鼠在腹腔清洗术后第1天和术后第3天，取血ELISA检测血浆中IL-6，TNFα表达；4.术后第3天，各组均处死3只大鼠取回肠末端组织及肝脏组织行病理观察。5.术后第10天处死各组所有大鼠，参考Nair5级分类法评估大鼠腹腔粘连程度，取腹腔内粘连组织HE染色观察粘连组织病理变化及CollagenⅠ免疫组化表达。结果：1.建模后96小时内，A，B，C，D，E五组均出现有大鼠死亡，其中死亡率以E组最高，高达40%；B，C两组死亡率较低，分别与各组比较有统计学意义（P＜0.05）。2.腹腔清洗术后第1天各组TNF-α及IL-6指标均升高，其中模型组(E组)升高最显着，与其他各实验组比较有差异性具有统计学意义（P＜0.05）；F组TNF-a及IL-6含量正常，与A，B，C，D，E各实验组比较有统计学意义（P＜0.01）。3.腹腔清洗术后第3天，A，B，C，D四组TNF-α及IL-6值均有所下降，其中以1:5稀释络合碘组下降明显，A，B，C，D四组术后第1天与3天前后比较有差异性(P＜0.05)，其中B，C两组有非常显着性差异（P＜0.01﹚，E组术后第3天TNF-α及IL-6稍有上升，与各实验组比较有差异性（P＜0.05或P＜0.01）。4.术后第10天，观察各组大鼠腹腔内粘连情况，A、D组两组腹腔内粘连以Ⅱ～Ⅲ级为主，B，C组以0～Ⅰ级为主，而E组可见大量粘连，并难与腹膜分离，粘连紧密，以Ⅲ～Ⅳ级为主。5.术后第10天，从盲肠与腹壁粘连组织中，CollagenⅠ免疫组化表达来看，A，D两组可见呈棕黄色阳性着色的细胞比较多，呈阳性表达； B，C两组在少部分盲肠黏膜层上皮细胞及炎性细胞胞浆内，可见呈淡黄色细胞，为较低水平的CollagenⅠ阳性表达，为弱阳性；模型组（E组）盲肠组织黏膜层上皮细胞及炎性细胞胞浆内，可见大量深棕色阳性细胞，为CollagenⅠ强阳性表达；F组未见阳性细胞表达。结论：使用1:5-1:10稀释的络合碘清洗大鼠腹膜炎腹腔，能减少术后的炎症反应并能减轻腹腔内粘连。
参考文献：
[1]. 脓毒血症过程TNF-α和肝脏细胞凋亡关系及其机制探讨[D]. 吴红红. 新疆医科大学. 2003
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[6]. 辛伐他汀对脓毒血症大鼠心肌肿瘤坏死因子-α和高迁移率族蛋白-1表达的影响及机制[J]. 吴昆鹏, 陈莹, 言彩红, 黄治家, 吴正茂. 中华实用诊断与治疗杂志. 2015
[7]. Cs菌丝粉对大鼠脓毒性急性肾损伤中klotho蛋白表达的影响[D]. 卢海源. 河北联合大学. 2014
[8]. 硫化氢对尿源性脓毒血症肾组织细胞因子表达的影响[D]. 杨磊波. 南华大学. 2014
[9]. 乌司他丁治疗大鼠脓毒症的量效关系研究[J]. 马晓辉, 张翠云, 王继东, 李养军. 临床肺科杂志. 2015
[10]. 稀释络合碘对大鼠腹腔内炎症与粘连影响的实验研究[D]. 刘宾. 南华大学. 2013