结核分枝杆菌利福平分子药敏结果与其表型药敏差异的研究

结核分枝杆菌利福平分子药敏结果与其表型药敏差异的研究

论文摘要

目的:分析结核分枝杆菌利福平耐药的分子药敏(Xpert MTB/RIF)检测与在表型药敏(Bactec MGIT 960)检测结果不一致的机制。方法:从2015年10月-2018年4月在长沙医学院第一附属医院进行Xpert MTB/RIF检测的8274位患者中筛选出Xpea MTB/RIF检测利福平耐药而Bactec MGIT 960利福平敏感的患者39例,以及Xpert MTB/RIF检测利福平敏感而BaetecMGIT960利福平耐药的患者7例,共46例患者标本复苏其分离株,然后提取基因组DNA并进行rpoB的利福平耐药决定区域(rifampiein resistance determining region,RRDR)测序,同时对所有复苏的分离株进行最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)测定,观察不同突变菌株的耐药程度。结果:46例患者中有2例菌株复活失败、2例菌株丢失,剩下42例菌株完成测序,其余有5株菌株RRDR区未发生突变,剩余的37株在rpoB基因的RRDR区有不同位点及不同类型的变异,其中有2株在508和509位点发生缺失突变,其它突变的位点有511、516、526、531、533。多数突变位点集中在526位,突变类型包括His526Asn、H/s526Leu、His526Gly、His526Cys四种,其余位点突变形式为Leu5llPro、Asp516Tyr、Leu533Pro。在511、516、526、533位点突变中,MIC测定除了一株突变类型为H/s526Leu的菌株为32μg/ml外,其余位点突变均表现为低水平耐药或敏感,而531位点突变中Ser531Trp、Ser531Leu均表现为高水平耐药。结论:基于rpoB测序和MIC测定的结果显示特定rpoB基因突变可能导致结核分枝杆菌利福平耐药水平的改变,结核分枝杆菌利福平耐药(xpert MTB/RIF)检测与(Bactec MGIT 960)检测结果不一致。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 菌株来源
  •     1.1.1 结核分枝杆菌标准株
  •     1.1.2 临床菌株
  •   1.2 试剂与仪器设备
  •     1.2.1 主要试剂
  •     1.2.2 主要仪器设备
  •     1.2.3 分枝杆菌液体培养及药敏试验
  •     1.2.4 菌株复苏及灭活
  •     1.2.5 DNA提取
  •     1.2.6 引物设计及DNA测序
  •     1.2.7 MIC检测
  • 2 结果
  •   2.1 患者基本情况
  •   2.2 DNA测序分析
  •     2.2.1 基因突变
  •     2.2.2
  •     2.2.3 突变位点分析
  •     2.2.4 Xpert MTB/RIF定量分析
  •   2.3 rpoB不同突变类型菌株MIC的测定结果
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 李敏,李大兴,杨奇,吴金娣,王洪瑛

    关键词: 肺结核,利福平,基因,分子检测,最低抑菌浓度

    来源: 长沙医学院学报 2019年03期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 基础医学

    单位: 长沙医学院,娄底市中医院

    分类号: R378.911

    页码: 10-14+9

    总页数: 6

    文件大小: 2392K

    下载量: 33

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