女性人乳头瘤病毒感染基因类型分析

女性人乳头瘤病毒感染基因类型分析

余舍(广东省茂名市人口和计划生育综合服务中心525000)

【摘要】目的了解本地区体检女性人群生殖道HPV感染率、多重感染和亚型分布情况,为预防HPV感染和宫颈癌提供依据。方法采用PCR体外扩增和DNA反向点杂交相结合的基因芯片技术进行HPV基因分型。结果1321例21-66岁的健康检查者中,共检出阳性患者162例,阳性率为12.3%,其中高危型占68.7%,低危型占31.3%,检出前五位的亚型分别为HPV16(14.7%)、58(10.8%)、52(10.4%)、11(10.0%)、6(9.7%),未检出MM4、44、73、83型。HPV阳性者中多重感染率为40.2%,以二重感染常见(25.3%),不同年龄段人群HPV阳性率有差异,21-30岁人群阳性率最高为20.1%。结论本地区HPV感染主要见于21-30岁妇女,主要为单一基因型、高危型感染、常见亚型为16、58、5、11、6型。

【关键词】人乳头瘤病毒基因芯片检测基因分型

【中图分类号】R730.2【文献标识码】A【文章编号】2095-1752(2013)19-0123-02

人乳头状瘤病毒是一种双链嗜上皮无包膜的小DNA病毒,属乳多空病毒科,在人和动物中分布广泛。目前发现HPV有100多个基因型,约40个型别涉及到生殖道感染[1]。宫颈癌病因学研究表明,高危型HPV与宫颈癌及宫颈上皮内高度病变(CIN2/3)的发生密切相关,从发病机制来说宫颈癌是一种性传播疾病,有相当一部分为亚临床感染。通过阻断HPV的传播可以预防宫颈癌的发生,关键是筛查和早期控制HPV感染。目前预防性疫苗主要针对高危型HPV-16HPV-18.其研发的数据是基于欧美国家的HPV流行病学资料。然而地区不同,HPV的人群感染率不同,优势型别也不同。并且现有的疫苗对其它型别的交叉预防能力有限,因此特定地区的HPV流行病学资料的获得很有必要。HPV基因芯片技术一次可检测23种常见HPV基因型,检测通量大,结果准确。是HPV基因分型和调查其分子流行病学特征的理想方法[2]。

1资料与方法

1.1一般资料:2010年3月1日至2012年10月31日,到本中心健康体检的1321例妇女。年龄21-66岁,平均年龄38岁。

1.2仪器与试剂:HPV分型基因芯片检测系统(亚能生物技术有限公司,深圳)。试剂选用深圳亚能生物技术有限公司生产的HPV基因分型检测试剂盒。可检测23种HPV基因型别,包括18种高危型:HPV16、18、30、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、82、83;5种低危型HPV6、11、42、43、81。

1.3样本采集:采样前先用面拭子将宫颈口过多的分泌物轻轻擦拭干净,后用宫颈刷置于宫颈口轻轻旋转4-5圈,取出宫颈刷置于保存液中密闭送检,或置-20℃保存待测。

1.4检测方法:通过HPVDNA的提取、扩增、杂交、洗膜、显色、结果判读、保存及打印,对所有检测数据进行统计学处理。

2结果

2.1感染率和型别分布所采集的1321例标本中检出HPV阳性162例,阳性率12.3%,23种亚型被检出19种,MM4、73、83、44未检出。高危型检出率占68.7%,低危型检出率占31.3%,对多重感染者,各亚型的阳性率重复计算,亚型检出率见表1。

表1HPV感染亚型分布表

3讨论

宫颈癌是世界上妇女第二位最容易发生的癌症,每年新增约50万例,每年因宫颈癌死亡人数达27万,我国每年新发病例约13万,占世界新发病例总数的26%。且近年来呈现地区增长及发病年轻化趋势[3]。严重影响着妇女的生活和健康。现有研究表明,HPV致癌机制可能是:在机体免疫力低下时HPV整合到机体的核染色体基因组上,致使抑癌基因p53失活,进而引起细胞增殖调节失控。宫颈癌的发生过程可归结为:持续性高危型HPV感染,宫颈上皮不典型增生,宫颈原位癌,宫颈癌,这一过程大概需十年左右。因此,早期发现HPV感染尤其是高危型感染,并进行积极有效的治疗,将会大大降低宫颈癌发生率。国外HPV感染以HPV1618为主,而我国在HPV型别及感染率与国外有较大差异,且国内不同地域之间亦有差异。周明君[4]对许昌地区HPV感染别型分析,阳性率为18.8%;常见亚型为HPV16、58、52、11、6。王颖等[5]对福建地区健康体检人群HPV调查,HPV感染率为11.3%,感染前五位的型别为HPV52、58、16、18、68;娄咏崴等[6]对吉林、黑龙江地区HPV感染状况分析,阳性率是39.9%,高危亚型以HPV16、58、52为主,低危型以HPV6、11为主。本研究发现,占检出前五位的是HPV16(14.7%)、HPV58(10.8%)、HPV52(10.4)HPV11(10.0%)\HPV6(9.7%),跟据上述研究,HPV16感染率最高,其次58型国内感染率较高,其他型别的HPV感染率存在较大地区差异,其中HPV18和45型在国内报道中感染率较低,而其分别在欧美和非洲西部较常见。证明HPV感染的基因型存在明显的人群和地域差异。本研究阳性率较周明君[4],娄咏崴等[6]报道的阳性率偏低,和王颖等[5]报道相近,这可能和受检人群来源不同有关。

本研究发现单一型感染占HPV感染者的59.8%,多重感染占40.2%,说明本地区多重感染占相当大的比例,有报道称HPV多重感染对宫颈病变的发展有促进作用[7],这需要我们提高警惕做好多重感染者的防治工作。

本组资料女性HPV感染高峰年龄为21-30岁,有研究表明HPV感染高峰期为18-30岁,随年龄的增加,感染的风险逐渐降低[8]。这和本研究结果较为符合,其原因可能与年青妇女性生活频繁有关。

目前HPV疫苗用于预防和治疗HPV感染已成为研究的热点。但现有的疫苗具有“型特异性”,仅对HPV16、18、6、11亚型感染有效。而不同HPV亚型对不同种族人群致癌性的强弱也明显不同。了解分析本地区HPV流行的主要型别,不仅对HPV感染亚型的检测更有针对性,而且可对本地区HPV感染的防治及疫苗研发提供重要依据。

参考文献

[1]ChanPK,MakKH,CheungJL,etal.GenotypespectrumofcervicalhumanpapillomavirusinfectionamongexuallytransmitteddiseaseclinicpatientsinHongKong[J].JMedVirol,2002,68(2):273.

[2]吕晓萍,李体远,戴勇,等.人乳头状瘤病毒快速导流杂交与传统杂交法比较基因型分型及临床应用[J].中华医院感染学杂志,2005,15(6):618-621.

[3]万磊,万建平,张燕玲,等.子宫颈癌年轻化趋势的临床分析[J].中国肿瘤临床,2004,31(10):548.

[4]周明君.许昌地区妇女宫颈人乳头瘤病毒感染型别分布特征分析[J].中国优生与遗传杂志,2012,20(5):124-125.

[5]王颖,黄毅,陈渝.福建地区人乳头瘤状病毒流行病学调查研究[J].检验医学与临床,2012,9(24):3099-3101.

[6]娄咏崴,谷振环.吉林地区、黑龙江地区人乳头瘤病毒感染状况分析[J].中国实验诊断学,2012,16(12):2279-2280.

[7]LeeSA,Kang,DSeoSS,etal.MutiplHPVinfectionincervicalcancerscreenedbyHPVDNAChip[J].cancerLett,2003,198(2):187-192.

[8]温贵华,刘晋洪,黄玲,等.深圳市HIV阳性人群HPV病毒载量分析[J].中国公共卫生,2009,25(7):795-796.

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