PK-15细胞源EDC3分子的克隆及生物信息学分析

PK-15细胞源EDC3分子的克隆及生物信息学分析

论文摘要

为了研究猪肾细胞(PK-15)中mRNA脱帽激活因子(EDC3)基因并分析其编码区序列特征,试验采用巢式PCR方法获得PK-15细胞源EDC3基因并进行克隆与测序,利用生物信息学相关在线软件检测PK-15细胞与其他宿主EDC3基因的同源性及构建系统进化树,并对该基因编码蛋白的跨膜结构、信号肽等分子特性进行分析。结果表明:猪EDC3基因全长为1 326 bp,编码440个氨基酸,比预测片段少201 bp;与预测野猪的核苷酸序列同源性达99.0%,氨基酸序列同源性达97.5%;该基因与野猪的亲缘关系最近,处于同一分支,其次是瘤牛、绵羊;EDC3基因编码蛋白的二级结构中无规则卷曲所占比例为59.09%,α-螺旋所占比例为20.68%,该结构蛋白无信号肽与跨膜结构。

论文目录

  • 1 材料
  •   1.1 细胞
  •   1.2 主要试剂
  • 2 方法
  •   2.1 引物的设计与合成
  •   2.2 总RNA的提取与反转录
  •   2.3 EDC3基因的巢式PCR扩增
  •   2.4 克隆与测序
  •   2.5 EDC3基因的序列分析
  •   2.6 PK-15细胞EDC3基因的生物学信息分析
  • 3 结果与分析
  •   3.1 EDC3基因的巢式PCR扩增
  •   3.2 目的基因的测序
  •   3.3 EDC3基因的序列分析
  •   3.4 PK-15细胞EDC3基因序列生物学信息分析
  •     3.4.1 EDC3基因编码蛋白二级结构的预测
  •     3.4.2 EDC3基因编码蛋白信号肽的预测
  •     3.4.3 EDC3基因编码蛋白跨膜结构的预测
  • 4 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 孙勇,李昌红,袁俊,刘娟娟,温贵兰

    关键词: 脱帽激活子基因,猪肾细胞,克隆,生物信息学,基因序列,蛋白质

    来源: 黑龙江畜牧兽医 2019年09期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学

    单位: 贵州大学动物科学学院,贵州省动物疫病与兽医公共卫生重点实验室

    基金: 国家自然科学基金项目(31460668),贵州省科学技术基金项目(黔科合J字[2015]2046号),贵州大学SRT计划项目(贵大SRT字[2016]178号),贵州大学博士基金项目(贵大人基合字[2013]12号),贵州省高层次创新型人才培养项目(黔财教[2017]号)

    分类号: Q78

    DOI: 10.13881/j.cnki.hljxmsy.2018.06.0316

    页码: 7-12+179

    总页数: 7

    文件大小: 834K

    下载量: 175

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