复合酶提取石榴幼果总黄酮工艺优化及其抑制α-葡萄糖苷酶活性

复合酶提取石榴幼果总黄酮工艺优化及其抑制α-葡萄糖苷酶活性

论文摘要

优化复合酶(纤维素酶-果胶酶-木瓜蛋白酶)提取石榴幼果总黄酮的工艺,并测定其抑制α-葡萄糖苷酶活性。以总黄酮得率为评价指标,在单因素实验基础上,D-最优混料设计优化复合酶配比,正交试验设计对料液比、介质pH、酶解温度、酶解时间进行优化,并以PNPG为底物测定总黄酮对α-葡萄糖苷酶的抑制活性。结果显示:复合酶最优配比为:纤维素酶44.2%、果胶酶31.6%、木瓜蛋白酶24.2%,最佳提取条件为:料液比1∶18 (g/mL)、介质pH5.0、酶解温度50℃、酶解时间4.0 h,总黄酮得率为3.38%,其浓度为1.5 mg/mL时,对α-葡萄糖苷酶抑制率达到63.9%,抑制作用的IC50为1.059 mg/mL,在浓度0.15~1.5 mg/mL范围内,石榴幼果总黄酮浓度与其对α-葡萄糖苷酶抑制效果之间呈现一定的正相关关系,其抑制机理属于可逆性抑制和非竞争性抑制。该方法可为石榴幼果总黄酮的提取和应用提供一定的科学依据。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料与仪器
  •   1.2 实验方法
  •     1.2.1 石榴幼果中总黄酮的提取和纯化方法
  •     1.2.2 单因素实验
  •     1.2.3 D-最优混料设计优化复合酶配比
  •     1.2.4 正交试验设计优化
  •     1.2.5 黄酮含量的测定
  •     1.2.6 石榴幼果总黄酮抑制α-葡萄糖苷酶活性
  •       1.2.6.1 PNP (P-Nitrophenol, 对硝基酚) 标准曲线的绘制
  •       1.2.6.2 抑制率的测定
  •       1.2.6.3 酶抑制动力学分析
  •   1.3 数据分析
  • 2 结果与分析
  •   2.1 单因素实验
  •     2.1.1 加酶量
  •     2.1.2 料液比
  •     2.1.3 介质pH
  •     2.1.4 酶解温度
  •     2.1.5 酶解时间
  •   2.2 D-最优混料设计
  •   2.3 正交试验设计
  •   2.4 最佳工艺条件的验证
  •   2.5 石榴幼果总黄酮抑制α-葡萄糖苷酶活性
  • 3 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 王占一,廖成斌,公金艳,张卓,汤锐睿,戴博

    关键词: 石榴幼果,总黄酮,复合酶法,最优混料设计,抑制葡萄糖苷酶活性

    来源: 食品工业科技 2019年09期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑

    专业: 有机化工

    单位: 枣庄学院食品科学与制药工程学院,空军总医院药学部

    基金: 2015年度国家星火计划项目(2015GA740027),山东省自然科学基金(ZR2018LH020),山东省重点研发计划项目(2016GSF202010),山东省高等学校科技计划项目(J18KA305)

    分类号: TQ28

    DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2019.09.031

    页码: 178-183+188

    总页数: 7

    文件大小: 724K

    下载量: 441

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