导读:本文包含了蛋白定位论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:蛋白,酵母,细胞,荧光,拟南芥,刺激素,免疫。
蛋白定位论文文献综述
金雪,宋敬臻,谢志平[1]（2019）在《酿酒酵母GPCR蛋白Ste2亚细胞定位信号探索》一文中研究指出G蛋白偶联受体(G protein-coupled receptor,GPCR)家族蛋白在细胞感受各种胞外信号过程中发挥重要作用。Ste2是酵母细胞中GPCR蛋白之一。大量文献报道了Ste2蛋白突变体对其功能和表达的影响,但关于Ste2亚细胞定位的研究相对较少。这项工作的目的在于确定Ste2亚细胞定位,探究Ste2不同跨膜域、胞内外环状结构域和N端、C端对其亚细胞定位的影响。构建了一系列结构域删除或替换突变体,通过荧光显微镜观察判断不同结构区域对Ste2亚细胞定位的影响,并通过与已知的细胞器标记蛋白共定位观察验证亚细胞定位判读结果。结果显示:野生型Ste2荧光信号出现在质膜和液泡内腔; C端缺失突变体荧光信号出现在质膜和内质网。在N端、C端、各环状结构域序列采用动物GPCR蛋白ORI7、OR17-40相应结构域替换的突变体中,C端替换导致液泡内腔信号消失,质膜信号强于野生型; N端和部分环状结构域替换不同程度减弱或消除了质膜定位,液泡腔内信号类似于野生型;部分突变体在胞内出现点状分布的荧光信号。由此推断:Ste2 N端,第一、第二胞外环状结构域和第叁胞内环状结构域可能具有影响Ste2运输定位到质膜的功能;而C端则可能在Ste2离开细胞膜进入液泡的过程中发挥作用。初步确定了Ste2的不同结构区域对其定位的影响,为深入研究GPCR蛋白的亚细胞定位机制奠定基础。(本文来源于《中国生物工程杂志》期刊2019年11期）
吴锐,潘兹书[2]（2019）在《猪瘟病毒Core蛋白核仁定位序列鉴定》一文中研究指出黄病毒科病毒核衣壳蛋白的核仁定位在病毒颗粒包装与病毒复制中发挥重要作用。为鉴定黄病毒科的猪瘟病毒Core蛋白核仁定位序列,本研究构建了将Core蛋白、截短突变体和氨基酸位点突变体分别与增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein, EGFP)融合的真核表达质粒,转染至PK15细胞后进行表达和定位分析,结果显示Core蛋白核仁定位序列为PESRKKL,其关键氨基酸为R76K77,对理解猪瘟病毒Core蛋白结构与功能和为后续研究Core蛋白在病毒复制及颗粒包装中的作用有重要意义。(本文来源于《微生物与感染》期刊2019年05期）
刘开美,韩崇旭[3]（2019）在《尿培养联合β_2-微球蛋白诊断单纯性尿路感染定位的价值》一文中研究指出目的探讨尿培养和尿β2-微球蛋白(β2-MG)对单纯性尿路感染定位的诊断价值。方法选择江苏省苏北人民医院143例泌尿科确诊为单纯性尿路感染的患者,将上尿路感染的52例患者设为上尿路组,91例下尿路感染患者设为下尿路组,同期体检人群22例为对照组。治疗前行中段尿培养和尿β2-MG检测。结果上尿路组尿培养阳性率为78. 8%,β2-MG升高患者比例84. 6%,主要致病菌为金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌和铜绿假单胞菌;下尿路组尿培养阳性率为90. 1%,β2-MG升高患者比例5. 5%,主要致病菌为大肠埃希菌、粪肠球菌和白色假丝酵母菌;对照组尿培养阳性率为4. 5%,β2-MG升高患者比例4. 5%。上、下尿路组尿培养结果差异无统计学意义(P> 0. 05),但β2-MG差异有统计学意义(P <0. 01)。结论尿培养联合β2-MG对单纯性上下尿路感染的定位、菌群分布和经验用药有很好的诊断价值。(本文来源于《实用临床医药杂志》期刊2019年20期）
张正坦,朱婧,谢志平[4]（2019）在《酿酒酵母全基因组SNARE蛋白的亚细胞定位研究》一文中研究指出在真核细胞中,内质网、高尔基体、质膜等膜结构间的蛋白质运输主要通过囊泡出芽和融合实现。SNARE蛋白家族在介导囊泡与目的膜结构融合过程中发挥关键作用。在模式生物酿酒酵母中,对全基因组SNARE蛋白的系统研究仍有不足。此研究构建了一套用于标记酿酒酵母基因组全部24种SNARE的工具质粒。该系列质粒既能呈现出良好的定位特征,又避免了过度表达造成的定位异常。通过与细胞器标记共定位验证了SNARE蛋白的亚细胞定位。结果发现3种SNARE的定位与之前报道不符:Bos1定位于早高尔基体,Snc1和Bet1定位于晚高尔基体/早内体。另外,Sec9定位于芽尖和芽颈,这是首次观察到Sec9在活酵母细胞中的定位。这项工作首次全面的检验了酵母SNARE家族蛋白的亚细胞定位,为后续SNARE蛋白功能研究提供了新线索,并为相关研究提供了一套工具质粒。(本文来源于《中国生物工程杂志》期刊2019年10期）
徐丽,温贵兰,管国丹,张升波,李昌红[5]（2019）在《猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白2分段真核表达及其细胞定位分析》一文中研究指出为探讨非结构蛋白2(non-structural protein 2,NSP2)在猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)复制过程中的作用及机制,本研究构建真核重组质粒pc DNA 3.1-5'Flag-NSP2-147-323,并瞬时转染至HEK293T中,同时设置完整NSP2基因序列重组质粒作为对照,转染48 h后分别用不同的抗体进行间接免疫荧光监测。结果显示,转染对照组中细胞核周围可见特异性荧光,而转染真核重组质粒pc DNA 3.1-5'Flag-NSP2-147-323后,不仅在细胞核周围,在细胞核内也可以观察到特异性荧光。本研究成功构建真核重组质粒pc DNA 3.1-5'Flag-NSP2-147-323,并可在HEK 293T细胞中正确表达,为进一步研究NSP2在PRRSV复制过程中的作用提供依据和基础。(本文来源于《中国动物传染病学报》期刊2019年05期）
吕辉,杨晓霞,韦启鹏[6]（2019）在《微管相关蛋白tau在小鼠卵巢颗粒细胞中的定位及功能》一文中研究指出目的:探究小鼠卵巢颗粒细胞中微管相关蛋白的表达及功能定位。方法:选取雌性小鼠发生6周成年(成年组,6只)与未成年(未成年组,6只),培养卵巢颗粒细胞,将加入促卵泡刺激素(FSH)培养的颗粒细胞作为FSH组,不加FSH培养的颗粒细胞作为非FSH组。免疫组化染色法观察颗粒细胞中微管相关蛋白tau表达,将tau融合蛋白转染到颗粒细胞上,荧光显微镜下观察tau蛋白在颗粒细胞中的定位。结果:小鼠卵巢颗粒细胞tau蛋白表达阳性数成年组高于未成年组,FSH组高于非FSH组(P<0.05);未成年小鼠中FSH组阳性数高于非FSH组(P<0.05)。成年组小鼠卵巢颗粒细胞中tau蛋白聚集于细胞核,呈放射状。结论:微管相关蛋白tau在成年小鼠卵巢颗粒细胞中高表达,其定位主要集中于细胞核,影响颗粒细胞增殖分化,通过观察tau蛋白表达及定位,可反映微管形成及形态变化。(本文来源于《中国计划生育学杂志》期刊2019年09期）
王文青,蒋保余,曲自刚,刘保红,肖星星[7]（2019）在《柔嫩艾美耳球虫穿孔素样蛋白基因的原核表达与亚细胞定位》一文中研究指出为了研究柔嫩艾美耳球虫(E. tenella)穿孔素样蛋白(Et PLP)在球虫感染中与宿主相互作用关系,首次成功获得EtPLP1(1 932 bp)和EtPLP2(4 215 bp)2个目的基因。通过表达纯化得到2个大小分别为37和67ku的目的蛋白,Western-blot结果显示其反应原性良好。通过免疫荧光技术,观察到EtPLP1定位在子孢子顶端。m RNA转录水平检测结果显示,EtPLP1在子孢子阶段的表达量最高,其次是第1代裂殖子阶段,EtPLP2m RNA水平在第1代裂殖子阶段表达量最高,其次是第2代裂殖子阶段;它们在其他阶段表达量极低或不表达。结果表明EtPLP1和EtPLP2可能参与虫体入侵与逸出宿主细胞,为EtPLPs蛋白功能研究奠定了基础。(本文来源于《中国兽医科学》期刊2019年11期）
李琴,张琳琳,黄鹰[8]（2019）在《粟酒裂殖酵母蛋白Atp4定位和功能的研究》一文中研究指出研究粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)中Atp4的定位和参与线粒体功能的机制。借助于基因敲除、荧光显微镜观察、线粒体提取、生化试剂处理和Western blotting等技术开展研究。在甘油培养基上,Δatp4突变菌株表现出生长缺陷,是线粒体呼吸缺陷菌;Fluorescence microscope观察到用GFP标记的Atp4和线粒体是共定位的;采用生化试剂TritonX-100和蛋白酶K处理以及碳酸钠处理Atp4-Flag和yHL6381线粒体,结果表明Atp4定位在线粒体内膜;Western blotting实验结果表明Atp4缺失导致Cob1、Cox1、Cox2和Atp6表达量剧烈下降,Cox3和Cox4蛋白表达量也有略微下降。综上所述,Atp4在线粒体内膜发挥功能,对于维持线粒体编码蛋白的正常表达至关重要,是线粒体呼吸链功能的发挥所必需的。(本文来源于《生物技术通报》期刊2019年08期）
齐欣,丁庆倩,苏晨,徐伟亚,牟永莹[9]（2019）在《拟南芥膜定位蛋白At CP2调控抗冻性的功能分析》一文中研究指出COR家族成员在调控植物响应低温胁迫过程中发挥重要作用。从拟南芥中克隆一个新的低温胁迫响应基因At CP2,其属于COR基因家族中的COR413亚家族,编码区612 bp,编码203个氨基酸,分子量22.75k Da,等电点9.44。亚细胞定位和基因表达模式分析结果表明:At CP2定位在叶绿体膜上,对ABA、PEG、Na Cl和低温四种非生物胁迫均有响应。基因功能分析结果显示:功能缺失性突变体cp2冷处理后存活率明显高于野生型拟南芥(WT),相对电导率和MAD均低于WT,证明At CP2基因负向调控植物抗冻性。蛋白质组及qRT-PCR分析结果证明At CP2通过负向调控4个ABA及低温胁迫相关基因(包括ABA2、KIN1、COR47和COR15B)的表达影响植物抗冻性。总之,At CP2基因的功能分析结果对了解COR413基因家族的功能提供了参考。(本文来源于《中国农业科技导报》期刊2019年09期）
狄安洁,吴庆瑜,谭剀,徐双悦,兰天舒[10]（2019）在《对细胞膜质蛋白共定位染色方法的改良》一文中研究指出[目的]将流式细胞术染色方法进行改良用于T细胞膜质蛋白共定位的共聚焦显微镜检测,在共定位表达于细胞膜上的CD4和细胞质内表达的TIPE2蛋白较常规镜检免疫荧光染色法可提高实验效率。[方法]取小鼠脾脏T细胞,用流式细胞术的染色方法代替实验室常规免疫染色法,对细胞膜上的CD4与细胞质内的TIPE2蛋白进行染色,制片并在激光共聚焦显微镜下观察。[结果]小鼠脾脏CD4+T细胞上出现了TIPE2蛋白的共表达,符合实验预期,同时实验效率从原有10%提高到90%。[结论]采用该染色方法后突破了常规免疫荧光染色必须要在载玻片上进行的局限,简化了操作,保证了实验的有效性,提高实验效率。(本文来源于《生物技术》期刊2019年04期）
蛋白定位论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
黄病毒科病毒核衣壳蛋白的核仁定位在病毒颗粒包装与病毒复制中发挥重要作用。为鉴定黄病毒科的猪瘟病毒Core蛋白核仁定位序列,本研究构建了将Core蛋白、截短突变体和氨基酸位点突变体分别与增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein, EGFP)融合的真核表达质粒,转染至PK15细胞后进行表达和定位分析,结果显示Core蛋白核仁定位序列为PESRKKL,其关键氨基酸为R76K77,对理解猪瘟病毒Core蛋白结构与功能和为后续研究Core蛋白在病毒复制及颗粒包装中的作用有重要意义。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
蛋白定位论文参考文献
[1].金雪,宋敬臻,谢志平.酿酒酵母GPCR蛋白Ste2亚细胞定位信号探索[J].中国生物工程杂志.2019
[2].吴锐,潘兹书.猪瘟病毒Core蛋白核仁定位序列鉴定[J].微生物与感染.2019
[3].刘开美,韩崇旭.尿培养联合β_2-微球蛋白诊断单纯性尿路感染定位的价值[J].实用临床医药杂志.2019
[4].张正坦,朱婧,谢志平.酿酒酵母全基因组SNARE蛋白的亚细胞定位研究[J].中国生物工程杂志.2019
[5].徐丽,温贵兰,管国丹,张升波,李昌红.猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白2分段真核表达及其细胞定位分析[J].中国动物传染病学报.2019
[6].吕辉,杨晓霞,韦启鹏.微管相关蛋白tau在小鼠卵巢颗粒细胞中的定位及功能[J].中国计划生育学杂志.2019
[7].王文青,蒋保余,曲自刚,刘保红,肖星星.柔嫩艾美耳球虫穿孔素样蛋白基因的原核表达与亚细胞定位[J].中国兽医科学.2019
[8].李琴,张琳琳,黄鹰.粟酒裂殖酵母蛋白Atp4定位和功能的研究[J].生物技术通报.2019
[9].齐欣,丁庆倩,苏晨,徐伟亚,牟永莹.拟南芥膜定位蛋白AtCP2调控抗冻性的功能分析[J].中国农业科技导报.2019
[10].狄安洁,吴庆瑜,谭剀,徐双悦,兰天舒.对细胞膜质蛋白共定位染色方法的改良[J].生物技术.2019
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