导读:本文包含了组氨酸标记论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:COMT,组氨酸,甲基转移酶,甲基化酶
组氨酸标记论文文献综述
Pedro,AQ,吴霖萍[1]（2017）在《组氨酸标记人可溶性儿茶酚-O-甲基转移酶的生物合成和纯化》一文中研究指出据报道,儿茶酚-O-甲基转移酶(COMT,EC 2.1.1.6)与人类多种疾病(包括帕金森病)有关,这些疾病的最佳治疗方案取决于COMT抑制剂的疗效。因此,有必要研发具有COMT抑制活性的药物,而这些药物的研发需要制备重组COMT。本研究在甲醇诱导毕赤酵母(Pichia pastoris)培养基中发酵制备具有生物学活性的六组氨酸标记的COMT,并利用固定化金属亲(本文来源于《中国医药工业杂志》期刊2017年08期）
Pedro,AQ,吴霖萍[2]（2017）在《组氨酸标记人可溶性儿茶酚-O-甲基转移酶的生物合成和纯化》一文中研究指出据报道,儿茶酚-O-甲基转移酶(COMT,EC 2.1.1.6)与人类多种疾病(包括帕金森病)有关,这些疾病的最佳治疗方案取决于COMT抑制剂的疗效。因此,有必要研发具有COMT抑制活性的药物,而这些药物的研发需要制备重组COMT。本研究在甲醇诱导毕赤酵母(Pichia pastoris)培养基中发酵制备具有生物学活性的六组氨酸标记的COMT,并利用固定化金属亲和色谱纯化目标酶。该酶具有良好的催化活性和选择性。在最(本文来源于《中国医药工业杂志》期刊2017年02期）
靳步昆[3]（2016）在《改性壳聚糖聚乙烯醇亲和膜的制备及其应用于组氨酸标记蛋白的纯化》一文中研究指出亲和膜色谱技术由于具有分离效率高、步骤简单、适合于大规模生产等优点,在蛋白分离纯化过程中具有广阔的应用前景。膜材料的选择对亲和膜的应用具有重要意义。对此,我们开发了一种新型大孔壳聚糖聚乙烯醇膜,并螯合金属离子制备亲和膜,将制备的亲和膜应用于牛血清蛋白(BSA)与组氨酸标记蛋白的纯化中。具体研究内容如下:首先,以壳聚糖聚乙烯醇膜做为载体,以硅胶做为制孔剂,利用环氧氯丙烷活化,偶联间隔臂亚氨基二乙酸,制备出了改性大孔壳聚糖聚乙烯醇膜。通过SEM、FTⅠR、XRD对膜结构表征,结果表明制备的膜具有很好的机械强度与孔径结构,当40 ml制膜混合溶液中加入2 g硅胶时,膜的孔径大小为1.39μm。改性后膜表面官能团N-H_2吸收峰减弱,而酰胺Ⅱ带(δ_(N-H))和酰胺Ⅰ带(δC=O)吸收峰加强。膜的晶体结构在改性后也发生了改变。元素分析仪测得膜上间隔臂连接量约为3.79 mg/g。在此基础上利用亚氨基二乙酸螯合Cu~(2+)、Ni~(2+)制备出亲和膜。结果表明改性前膜对Cu~(2+)、Ni~(2+)的最大螯合量分别为80 mg/g与70 mg/g;改性后膜对Cu~(2+)、Ni~(2+)对的螯合量分别为98 mg/g与80 mg/g。改性后的壳聚糖聚乙烯醇膜对Cu~(2+)、Ni~(2+)的螯合量增加。螯合过程为吸热过程,并且随着Cu~(2+)、Ni~(2+)初始浓度的升高螯合量增加,在Cu~(2+)、Ni~(2+)浓度为0.1 mol/L时达到饱和。改性膜对Cu~(2+)、Ni~(2+)螯合的最佳条件:温度35℃,pH 7、5.8,NaCl离子浓度0.8、1 mol/L。改性膜对金属离子的螯合过程满足Langmuir,Freundlich模型,热力学参数△G0,△H0,△S0分别为-8.57 kJ/mol(288 K),-8.45 kJ/mol(288 K);6.40 kJ/mol,15.91 kJ/mol;0.054 kJ(mol/K),0.085 kJ(mol/K)。结果显示金属离子在改性膜上的螯合为吸热自发过程。动力学分析适合Pseudo second-order kinetics模型。为了研究螯合金属离子亲和膜对组氨酸标记蛋白纯化能力,我们以牛血清白蛋白(BSA)与丝氨酸羟甲基转移酶(SHMT)为目标蛋白,研究了制备的亲和膜对蛋白质的分离能力。BSA吸附实验表明,螯合Ni~(2+)的亲和膜对BSA有最大吸附量为14 mg/g。最佳吸附条件:BSA初始浓度1.2 mg/ml,NaCl离子浓度0.6mol/L,pH 7。螯合Cu~(2+)亲和膜对SHMT的纯化倍数为10.02,最佳纯化条件:温度15℃,pH 8,盐离子浓度0.6 mol/L。螯合Ni~(2+)亲和膜对SHMT纯化倍数为9.01,最佳纯化条件:温度4℃,pH 7,盐离子浓度0.6 mol/L。亲和膜对SHMT的穿透曲线表明,膜上具有良好的孔径结构,有效的减小了轴向扩散效应,提高了亲和配基的利用率;进一步利用洗脱剂洗脱,可得到SHMT洗脱峰;纯化后的SDS-PAGE分析显示,目标蛋白为单一条带。本文制备了新型大孔壳聚糖聚乙烯醇膜,螯合金属离子制得亲和膜。相比于直接吸附金属离子的膜,螯合金属离子的亲和膜可有效减小亲和配基与目标蛋白的空间位阻,增大了吸附量。并将其应用于BSA,SHMT的分离纯化,为今后大规模纯化组氨酸标记蛋白作了探索研究。(本文来源于《武汉科技大学》期刊2016-05-13）
苏林静[4]（2016）在《新型金属氧化物和固定金属亲和材料的设计合成及其在组氨酸标记蛋白分离中的应用》一文中研究指出蛋白作为一类重要的生物分子在生命活动中扮演着重要的角色。实现蛋白的简便分离纯化对了解生物系统有着重要的现实意义。组氨酸标记(His-tagged)蛋白作为一类典型蛋白在各种生理过程中承担着不可或缺的角色,例如细胞内金属组分平衡、解毒、抗菌反应和内源性凝血等。除此以外,His-tagged重组蛋白在蛋白工程领域有着广泛的应用,同时低丰度的生物标志物常被高丰度的His-tagged蛋白(如血红蛋白)所淹没覆盖导致其分析检测困难重重。因此,对生物样品中His-tagged蛋白进行分离纯化在蛋白组学和生命分析等研究领域都有着重要的意义。通常,固定金属亲和色谱(Immobilized metal affinity chromatography,IMAC)和金属氧化物亲和色谱(Metal oxide affinity chromatography,MOAC)技术被认为是目前 His-tagged 蛋白分离纯化的重要有效方法之一。但是,传统的IMAC及MOAC分离材料的固有缺点限制了其在实际His-tagged蛋白分离纯化中的应用,比如,传统的IMAC材料制备修饰步骤繁琐、需要特定的金属离子螯合交联剂以及比表面积低下,金属离子密度不高等缺点。因此,发展具有高吸附量、重复利用性好和制备合成方法简便的新型IMAC(MOAC)材料对于His-tagged蛋白分离研究是很有意义的。本论文中,我们合成制备了叁种新型IMAC(MOAC)材料,考察了其对His-tagged蛋白的分离纯化性能。主要内容如下:1、以钴基金属-有机骨架材料ZIF-67为自模板引入硝酸镍进行表面腐蚀后得到ZIF-67/钴镍双氢氧化物层复合材料,接着再利用ZIF-67对水的不稳定性去除后得到中空钴镍双氢氧化物再经煅烧使得氢氧化物转化为氧化物结构得到具有大比表面积中空结构的钴/镍双氧化物纳米粒子(Hollow Co_3O_4/NiCo_2O_4 nanoparticles,HCNs)材料。对所合成的HCNs材料用粉末X射线衍射、扫描电子显微镜、红外光谱以及X射线光电子能谱等技术进行了表征。最后考察了 HCNs材料对组氨酸标记蛋白的选择性吸附,结果表明HCNs材料对血红蛋白达到1000 mg g-1的吸附容量,连续5次重复利用后仍具有高达80%的吸附分离效果,该材料有望用于组氨酸标记蛋白的选择性分离。2、以铜基金属-有机骨架材料HKUST-1为前驱体,通过一步简单的氢氧化钠溶液湿法处理制备了具有羽毛状的氧化铜纳米片(NPCuO)。表征结果显示NPCuO具有形貌均一、大比表面积特点。以NPCuO作为蛋白吸附剂充分考察了其对血红蛋白的分离富集作用,通过NPCuO表面丰富的金属亲和位点和血红蛋白表面的组氨酸残基螯合配位作用实现了对血红蛋白的分离。实验结果显示NPCuO对血红蛋白具有大于2000 mg g-1的吸附能力、稳定性良好且具有良好的重复利用性,是一款优异的血红蛋白分离介质,有望在实际中得到应用。3、以淀粉、FeCl_3和CuSO_4·5H_2O为原材料,通过微波辅助高温等离子热一锅法合成了铜离子功能化的磁性碳复合材料Cu-Fe/C。对所合成的Cu-Fe/C材料用粉末X射线衍射、扫描电子显微镜、红夕外光谱以及热重分析等技术进行了全面的表征。具有合成简便、磁分离容易,在外部磁铁下能在30s内实现分离、比表面积大以及吸附量大等优点的Cu-Fe/C材料被用作免有机螯合剂亲和吸附材料用于组氨酸标记蛋白的选择性分离,最后初步成功的将其应用于实际人血样中血红蛋白的分离纯化。(本文来源于《广西师范大学》期刊2016-03-01）
吴永慧[5]（2014）在《二氧化硅基纳米吸附剂的制备及其亲和分离组氨酸标记蛋白质》一文中研究指出本文采用SiO2-IDA-Ni2+，NiSiO3，Fe3O4@NixSiOy及NiO微纳米材料作为亲和吸附剂，利用Ni2+与六聚组氨酸的亲和作用，对以六聚组氨酸为标签的蛋白质进行分离、提纯，并结合多种现代分析手段表征其形貌、结构及性能，评价其对蛋白质的分离能力。本论文的主要研究内容及结论如下：(1) SiO2纳米微球的制备，功能化及其亲和分离His-tagged蛋白以正硅酸乙酯（TEOS）水解的方法制备出粒径在200nm左右的SiO2纳米微球，通过环氧基硅烷偶联剂和螯合配体对其表面进行修饰，经吸附Ni2+形成SiO2-IDA-Ni2+纳米微球，用于分离纯化His-tagged融合蛋白。利用SEM、FTIR、TG、BET等分析了纳米微球的表面形貌、结构及组成，并用SDS-PAGE对其分离纯化的His-tagged融合蛋白进行表征，用BCA蛋白定量试剂盒对分离的蛋白量进行了定量分析。结果表明，SiO2-IDA-Ni2+复合微球对His-tagged蛋白具有良好的分离效果，其吸附量可达28.3mg/g。(2)中空NiSiO3纳米微球的制备及其亲和分离His-tagged蛋白以SiO2纳米微球为模板，通过水热处理得到中空结构的NiSiO3纳米微球，采用SEM、HRTEM、XRD和XPS对样品的形貌、结构、性能等进行系统表征。纳米微球内外表面具有较多Ni2+位点，可作为亲和吸附剂直接用于分离纯化His-tagged蛋白质，简化了实验过程。结果表明，中空NiSiO3纳米微球在分离纯化蛋白质方面表现出良好的特异性，分离效果甚好，且多次重复利用之后仍可保持良好的分离效果，具有很好的再生能力。(3) Fe3O4@NixSiOy微球的制备及其亲和分离His-tagged蛋白水热法合成具有磁性的Fe3O4微球，通过溶胶-凝胶法在Fe3O4表面包覆一层SiO2壳层，与NiCl2的碱溶液在高压釜中反应，得到具有层状壳层的Fe3O4@NixSiOy磁性复合纳米微球。采用SEM、HRTEM、XRD、XPS和VSM对其形貌、结构和磁性能进行了表征，将其用于分离纯化His-tagged蛋白质，考察了不同条件对分离效果的影响，并采用SDS-PAGE对所分离的蛋白进行了分析。实验证明，将Fe3O4@NixSiOy纳米微球用于分离纯化蛋白质，在外加磁场作用下，加快了分离速度，且分离效果良好。(4) NiO的制备及其亲和分离His-tagged蛋白质采用水热法合成了表面由纳米片垂直排列堆积的NiO微球，考察了影响其形貌的因素，并对其形貌和性质表征。将其用以分离纯化His-tagged蛋白质，考察了不同条件下的分离效果，用SDS-PAGE对结果进行了表征，并用BCA定量测试进行验证。(本文来源于《河南大学》期刊2014-06-01）
颜红,王冲,周小会,肖守军[6]（2011）在《Ni~Ⅱ-NTA修饰的银纳米粒/多孔硅芯片在线分离组氨酸标记蛋白和MALDI-TOF质谱检测(英文)》一文中研究指出本文通过沉积在多孔硅表面的银纳米粒吸附对氨基苯硫酚和氨基的化学转化得到终端为NiII-Nα,Nα-二(羧甲基)-L-赖氨酸水合物-即NiⅡ-NTA体系的芯片。NiⅡ-NTA修饰的芯片被用于从高浓度的盐和助溶剂的缓冲体系中亲和捕获组氨酸标记的融合蛋白:thioredoxin-urodilatin和SUMO-hu-aprotinin,并进行在线的MALDI-TOF质谱检测,克服了MALDI-TOF质谱中直接点样污染物妨碍样品与基质共结晶的问题,避免了繁琐的离线样品预处理。芯片在线分离、纯化和MALDI-TOF质谱分析体系有望在复杂或原始体液的溶液中分析目标分子。(本文来源于《无机化学学报》期刊2011年08期）
夏海锋,张显,金雄华,刘婷婷,郑志永[7]（2010）在《镍离子亲和层析介质的制备及其用于组氨酸标记蛋白质的纯化》一文中研究指出以交联琼脂糖微球为基质,通过环氧氯丙烷活化,偶联亚胺二乙酸并螯合N i2+,制备得到一种镍离子亲和层析介质。结果发现,在强碱条件下环氧活化率达到了38.0μmol/mL,最终N i2+配基密度达到了30.9μmol/mL,偶联效率为81.3%。利用得到的镍离子亲和介质对基因工程大肠杆菌表达的组氨酸标记3-羟基丁酮还原酶进行了一步层析纯化,酶活回收率达到了58.8%,纯化倍数为2.1,蛋白纯度在85%左右,纯化效果与常用商品介质基本相当。(本文来源于《江南大学学报(自然科学版)》期刊2010年06期）
胡松青,沈兴,陈萍,姚闵,侯轶[8]（2010）在《N-和C-末端组氨酸标记基因重组AxCeSD的柱层析分离特性》一文中研究指出Immobilization metal affinity chromatography(IMAC)and size-exclusive chromatography(SEC)have been widely used in the purification of recombinant protein.In order to apply the column chromatography to the separation and purification of the gene recombinant with histidine-tags,the column chromatographic separation characteristics of N-terminal histidine-tagged(N-AxCeSD)and C-terminal histidine-tagged(C-AxCeSD)gene recombinant protein AxCeSD,one of the subunit involved in the cellulose synthesis in Acetobacter xylinum were studied.In the ring-shaped three-dimensional structure of AxCeSD,N-terminal histidine-tags were located in the inner of ring,while C-terminal histidine-tags were located in the outer.A higher imidazole concentration was necessary for eluting the C-AxCeSD from the IMAC column due to the C-terminal histidine-tags had stronger chelating interaction with the Ni2+ on the IMAC media.Moreover,the retention time for eluting C-AxCeSD from the same SEC gel column was shorter than that for N-AxCeSD,because the larger protein homolog was formed in the C-AxCeSD solution through the inter-molecular hydrogen bonds between the C-terminal histidine-tags.(本文来源于《化工学报》期刊2010年01期）
组氨酸标记论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
据报道,儿茶酚-O-甲基转移酶(COMT,EC 2.1.1.6)与人类多种疾病(包括帕金森病)有关,这些疾病的最佳治疗方案取决于COMT抑制剂的疗效。因此,有必要研发具有COMT抑制活性的药物,而这些药物的研发需要制备重组COMT。本研究在甲醇诱导毕赤酵母(Pichia pastoris)培养基中发酵制备具有生物学活性的六组氨酸标记的COMT,并利用固定化金属亲和色谱纯化目标酶。该酶具有良好的催化活性和选择性。在最
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
组氨酸标记论文参考文献
[1].Pedro,AQ,吴霖萍.组氨酸标记人可溶性儿茶酚-O-甲基转移酶的生物合成和纯化[J].中国医药工业杂志.2017
[2].Pedro,AQ,吴霖萍.组氨酸标记人可溶性儿茶酚-O-甲基转移酶的生物合成和纯化[J].中国医药工业杂志.2017
[3].靳步昆.改性壳聚糖聚乙烯醇亲和膜的制备及其应用于组氨酸标记蛋白的纯化[D].武汉科技大学.2016
[4].苏林静.新型金属氧化物和固定金属亲和材料的设计合成及其在组氨酸标记蛋白分离中的应用[D].广西师范大学.2016
[5].吴永慧.二氧化硅基纳米吸附剂的制备及其亲和分离组氨酸标记蛋白质[D].河南大学.2014
[6].颜红,王冲,周小会,肖守军.Ni~Ⅱ-NTA修饰的银纳米粒/多孔硅芯片在线分离组氨酸标记蛋白和MALDI-TOF质谱检测(英文)[J].无机化学学报.2011
[7].夏海锋,张显,金雄华,刘婷婷,郑志永.镍离子亲和层析介质的制备及其用于组氨酸标记蛋白质的纯化[J].江南大学学报(自然科学版).2010
[8].胡松青,沈兴,陈萍,姚闵,侯轶.N-和C-末端组氨酸标记基因重组AxCeSD的柱层析分离特性[J].化工学报.2010