导读:本文包含了活性非活性转换论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:溶菌酶,疏水作用,聚电解质,结构
活性非活性转换论文文献综述
高杲[1]（2008）在《与不同疏水性的聚电解质相互作用中溶菌酶的结构活性转换和可控释放的研究》一文中研究指出近年来,聚合物和蛋白质之间的相互作用成为研究热点。蛋白质是一种非周期性的聚合物,分子内部通过各种非共价和共价作用力,如静电、疏水作用、氢键、范德华力、二硫键等维持其天然态结构。球蛋白与带相反电荷的聚合物相互作用后,聚合物和蛋白质之间可以发生静电、疏水和氢键等相互作用,根据溶液中各自组分的浓度以及溶液pH和离子强度的不同,二者可以生成可溶性的复合物、凝聚物或沉淀。目前的多数研究集中在依靠静电作用稳定的聚合物—蛋白质复合物,虽然静电作用对蛋白质的结构和活性破坏较小并容易释放,但复合物的稳定性较差,而疏水作用则对复合物的稳定性有促进作用。因此我们采用含有疏水侧链或者疏水嵌段的聚合物,通过可控的静电、疏水相互作用,调整其与溶菌酶蛋白的相互作用,得到了稳定的聚合物蛋白质复合物粒子,并通过一定的研究方法,实现了溶菌酶分子的可逆复性和可控释放。具体的研究工作包括两个方面:第一部分利用光散射、紫外、圆二色光谱等技术研究了卵清溶菌酶在与马来酸—异丁烯交替共聚物(PIMA)和马来酸—十四烯交替共聚物(PTMA)形成复合物以及释放的过程中的结构和活性变化。在pH 7.4时,两个交替共聚物和溶菌酶之间都有静电吸引力;而PTMA和溶菌酶之间还有较强的疏水作用力。这就导致了PIMA只是部分破坏,而PTMA完全破坏溶菌酶的叁级结构并使溶菌酶完全失去活性。加入氯化钠或者盐酸胍(GdHCl)到共聚物-溶菌酶复合物溶液中可以使溶菌酶释放,释放后的溶菌酶仍可以恢复其天然结构和活性。第二部分主要研究了聚羧化磺化异戊二烯-聚异戊二烯-聚环氧乙烷嵌段共聚物(SCIEO)和溶菌酶形成的复合物粒子以及溶菌酶的释放。SCIEO和溶菌酶形成的复合物粒子在水溶液中有较好的分散性。在复合物中,溶菌酶的二级和叁级结构都受到影响,活性只有20%左右。一定浓度的NaCl可以通过静电屏蔽效应解离SCIEO-溶菌酶复合物,并且释放出的溶菌酶完全恢复了天然结构和活性。在生理pH和离子强度条件下的释放结果表明,溶菌酶的释放和取样次数有关,而和取样间隔无关,证明了复合物粒子与溶菌酶分子之间建立了平衡。当自由溶菌酶分子减少的时候,复合物胶束会部分解离使平衡重新建立。我们的研究表明聚合物可以通过疏水作用与蛋白质形成更稳定的复合物,同时蛋白质的结构也被更严重地破坏,但是释放后的溶菌酶仍然可以恢复其天然结构和活性。这个结论对利用聚合物分离和纯化蛋白质、固定和稳定酶、促进蛋白质折迭、包埋与控制释放蛋白质的研究将会有所帮助。(本文来源于《复旦大学》期刊2008-05-22）
谭雪莲[2]（2008）在《配合物型电化学活性—非活性转换分子信标的设计及其性质研究》一文中研究指出DNA电化学传感器是由特定序列的DNA和电化学识别物质组成的。特定序列的DNA起着选择性识别特异靶基因的作用,根据电化学识别物质在杂交前后的电化学信号变化可以测得靶基因是否存在和含量的多少。这种利用DNA双链的碱基互补配对原则发展起来的DNA生物传感技术,受到生物分析工作者的高度重视。同时电化学检测方法以其灵敏度高、轻巧便宜、携带方便、耗能少、能与现代微电子技术联用、易于实现微型化等优点,受到了研究者们的广泛关注。DNA电化学传感器在疾病控制,环境检测和药物筛选等方面的研究必将具有深远的意义和应用价值。分子灯塔也叫分子信标,它是近几年兴起的利用核酸杂交技术对核酸分子进行检测的新技术,具有快速、简便的特点。它的建立为研究核酸分子的组成、含量提供了快速、特异、方便的新手段,在基因检测领域有着广阔的应用前景。传统的分子信标(Molecular Beacons,MB)是基于荧光共振能量转移原理设计的寡核苷酸探针。随着对MB特性的深入研究,MB已被设计成各种形式和不同功能的探针,并成功地应用于PCR实时监控、基因突变的快速分析、DNA和RNA的检测、DNA杂交的动力学研究以及DNA/蛋白质相互作用研究等。本论文利用电化学技术,结合分子信标技术制备配合物型电化学活性—非活性转换分子信标,并对其热力学和电化学行为进行研究。该配合物型电化学活性—非活性转换分子信标既保留了分子信标本身的高灵敏性,高特异性;又引入了电化学检测方便可靠的优点,具有较高的专一性和灵敏度;同时形成配合物型电化学活性-非活性转换分子信标大大提高了电化学分子信标的热稳定性,改善了电化学分子信标的熔链温度,为实时PCR检测及在溶液中直接进行生物分子识别提供了思路。这种配合物型电化学活性—非活性转换分子信标为基因诊断,蛋白分析和PCR实时监控及基因芯片的研制提供了很好的思路和有效的依据。本论文分为四章:第一章绪论主要介绍分子信标的结构、原理、主要影响因素、应用以及发展前景;同时概述了电化学分析方法的特点、分类和在DNA检测中的应用,介绍了电化学和分子信标结合的最新进展及展望。最后阐述了本论文的研究目的和意义以及新颖之处。第二章配合物型电化学活性—非活性转换分子信标(M~(n+)-CAs-MB)的设计及表征本章详细阐述了高热稳定电化学活性—非活性分子信标的设计和合成:将具有灵敏电化学响应信号的胭脂红酸偶联到分子信标上,作为电化学活性-非活性信号分子,利用分子信标发卡结构和它与目标序列作用后发生构型改变,使胭脂红酸分子可在缔合状态和解离状态(OFF/ON)间变化,从而令其具有在电化学活性—非活性间切换的能力,用于构建新型非固定性电化学分子信标;再加入金属离子形成配合物,以提高分子信标的热稳定性。同时利用紫外—可见光谱对胭脂红酸金属配合物以及胭脂红酸金属配合物型电化学活性—非活性转换分子信标进行表征。结果表明,金属离子的加入有效地提高了电化学分子信标的热稳定性。由于金属、配体可以改变的特点,因此对电化学分子信标的结构设计具有广泛的灵活性。而这一系列的研究工作对电化学活性—非活性转换分子信标的发展具有重要的意义。第叁章配合物型电化学活性—非活性转换分子信标(M~(n+)-CAs-MB)热力学研究热力学研究可以对反应过程的热行为及影响因素进行深入的了解和探索,目前有关分子信标热力学方面的研究已有报道。本章对设计的配合物型电化学活性—非活性转换分子信标进行了详细的热力学探究,计算了配合物型电化学活性—非活性转换分子信标的热力学参数,同时,对不同配合物组成的电化学活性—非活性转换分子信标的差异性进行了研究;从理论上推导了不同金属离子配合物组成的电化学活性—非活性转换分子信标对热稳定性的影响,结果证明金属配合物型电化学活性—非活性转换分子信标具有高的热稳定性,可直接在溶液中进行杂交识别,实现对活体细胞进行直接电化学识别检测,以及实时PCR电化学检测。第四章配合物型电化学活性—非活性转换分子信标(M~(n+)-CAs-MB)分子信标的电化学行为研究将电化学检测技术与高特异性的分子信标技术结合是DNA分析检测的趋势,而如何将电化学分子信标用于溶液检测,提高热稳定性,进行实时PCR检测是关键所在。本章对热稳定电化学活性—非活性转换分子信标进行了电化学行为研究,结果表明金属离子的加入改善了电化学活性—非活性转换分子信标的热稳定性,提高了其熔链温度Tm。同时金属离子的加入并没有改变分子信标的杂交过程。另外,金属离子对分子信标热循环的回环率也有一定影响:金属离子地加入使得电化学分子信标在开始阶段受热循环的影响明显减小。(本文来源于《华东师范大学》期刊2008-05-01）
张帆[3]（2008）在《DNA电化学活性—非活性转换分子信标的制备及其应用研究》一文中研究指出随着基因结构与基因功能研究的不断深入,特别是“人类基因组项目”的完成,人类疾病的DNA诊断及基因治疗的研究正进入一个新的纪元,而研究的基础,很大一部分在于对致病基因序列的识别以及确定。传统的DNA序列测定法消耗时间长,劳动强度大;而新兴的以Watson-Crick碱基互补配对原则为基础的DNA生物传感器为分子生物学研究提供了全新的基因检测技术。其中,建立在DNA分子杂交基础上的DNA生物传感器,与一些新的标记方法如荧光法、化学发光法和电化学法等相结合,使DNA传感器既免去了放射性标记对人体的危害以及昂贵的价格,又节省了传统方法操作花费的时间,具有操作简便、快速灵敏、特异性好和无污染等特点,并且具有分子识别、分离纯化基因等功能。对此类DNA生物传感器的研究现已成为基因研究中最具有吸引力的前沿课题之一。本论文的创新之处有二:首先,分子信标技术优化了DNA链,设计为分子信标构型的DNA链,其特殊的“发卡”结构使得单纯基于DNA杂交基础上的分子探针,在检测之前多了一个使“发卡”打开后再与目标分子进行杂交的这样一个过程,从而在一定程度上增加了杂交反应发生的难度;而纳米金颗粒的引入,由于其对单链DNA的吸附作用,在杂交反应的同时增加一个脱附的过程,进一步加大了杂交反应的发生难度,这两项技术都大大提高了DNA分子信标的特异性;其次,本论文设计了一种新型的电化学分子信标模型,它不同于传统的、一端组装在电极表面的电化学分子信标。传统的分子信标是通过检测分子信标杂交前后,由于构型变化而引起的连接在其末端信号分子与电极表面距离的变化,从而导致的电化学信号的差异来间接进行目标分子的检测。论文中使用的新型电化学分子信标是非固定型的,完全在溶液中而不是在电极表面进行杂交反应。其信号的发生是基于分子的电化学活性-非活性转换来实现的:它们在分子信标闭合状态下没有电化学活性,而当分子信标打开之后,则可以表现出电化学活性。这种类型的电化学信标既有荧光分子信标简便快捷、易控制的特点,又有成本廉价、易于改装成小型化的便携装置的独特优势,目前尚未见有类似报道。论文分为四章:第一章:绪论首先,介绍了DNA电化学生物传感器,着重介绍了DNA电化学检测。接着介绍了分子信标技术,从荧光分子信标和电化学分子信标两个方面,分别对近年来分子信标检测目标分子的原理、方法、应用及发展趋势等方面做了综述;并对纳米金颗粒的特性及在生物分析中的应用作了简介。最后阐述了本论文的目的意义及创新之处。第二章:新型电化学活性-非活性转换分子信标的研制及其应用本章中,首先提出了一种基于电化学活性-非活性分子转换的新型分子信标。此类分子信标本身在实验选定条件下无电化学信号,与完全互补序列杂交后产生电化学信号,论文采用碳纳米管修饰电极对杂交前后的电化学信号进行检测。实验发现该分子信标的电化学信号强度与完全互补序列的浓度在(6.0×10~(-8)mol/L-1.4×10~(-6)mol/L)范围内成线性关系,相关系数为0.9972,检出限为1×10~(-8)mol/L;其中,完全非互补序列的电化学响应信号与空白信号基本相同,且对一、二、叁碱基错配序列的响应信号与完全互补序列的响应信号差别明显,表明分子信标可以实现对目标DNA的定量检测和在一定程度上鉴别碱基错配。第叁章:基于纳米金颗粒的高特异性DNA电化学活性.非活性转换分子信标体系的研制及其应用本章通过柠檬酸叁钠还原氯金酸的方法制备纳米金颗粒,利用其与单链DNA和双链DNA的不同相互作用,构建高特异性的DNA电化学分子信标。实验发现,完全非互补序列的电化学响应信号与空白信号基本相同,完全互补序列与一、二、叁碱基错配序列电化学响应差别明显,且单碱基错配序列的电化学响应信号仅为完全互补序列的10%左右,与以往的方法相比,二者的电信号差别明显扩大。这说明纳米金颗粒与单链DNA和双链DNA的不同相互作用大大提高了杂交反应的特异性,完全有可能实现对单碱基突变基因片段的检测,为临床医学诊断提供了一种行之有效的突变基因检测方法。第四章:纳米金颗粒增强DNA电化学活性-非活性转换分子信标特异性的作用机理研究本章运用电化学方法对纳米金颗粒提高DNA检测特异性的机理进行了更深一步的考察研究。实验发现,纳米金颗粒与单链DNA的结合力确实远高于双链DNA,并且认为分子信标环状部分的单链DNA序列与其完全互补DNA序列形成双链DNA的作用力要强于分子信标与纳米金颗粒之间的作用力。另外,分子信标的识别能力还与错配碱基的类型及在分子信标中的位点有关。该方法对核酸特定顺序的测定及基因突变的检测提供了新的理论依据。(本文来源于《华东师范大学》期刊2008-05-01）
活性非活性转换论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
DNA电化学传感器是由特定序列的DNA和电化学识别物质组成的。特定序列的DNA起着选择性识别特异靶基因的作用,根据电化学识别物质在杂交前后的电化学信号变化可以测得靶基因是否存在和含量的多少。这种利用DNA双链的碱基互补配对原则发展起来的DNA生物传感技术,受到生物分析工作者的高度重视。同时电化学检测方法以其灵敏度高、轻巧便宜、携带方便、耗能少、能与现代微电子技术联用、易于实现微型化等优点,受到了研究者们的广泛关注。DNA电化学传感器在疾病控制,环境检测和药物筛选等方面的研究必将具有深远的意义和应用价值。分子灯塔也叫分子信标,它是近几年兴起的利用核酸杂交技术对核酸分子进行检测的新技术,具有快速、简便的特点。它的建立为研究核酸分子的组成、含量提供了快速、特异、方便的新手段,在基因检测领域有着广阔的应用前景。传统的分子信标(Molecular Beacons,MB)是基于荧光共振能量转移原理设计的寡核苷酸探针。随着对MB特性的深入研究,MB已被设计成各种形式和不同功能的探针,并成功地应用于PCR实时监控、基因突变的快速分析、DNA和RNA的检测、DNA杂交的动力学研究以及DNA/蛋白质相互作用研究等。本论文利用电化学技术,结合分子信标技术制备配合物型电化学活性—非活性转换分子信标,并对其热力学和电化学行为进行研究。该配合物型电化学活性—非活性转换分子信标既保留了分子信标本身的高灵敏性,高特异性;又引入了电化学检测方便可靠的优点,具有较高的专一性和灵敏度;同时形成配合物型电化学活性-非活性转换分子信标大大提高了电化学分子信标的热稳定性,改善了电化学分子信标的熔链温度,为实时PCR检测及在溶液中直接进行生物分子识别提供了思路。这种配合物型电化学活性—非活性转换分子信标为基因诊断,蛋白分析和PCR实时监控及基因芯片的研制提供了很好的思路和有效的依据。本论文分为四章:第一章绪论主要介绍分子信标的结构、原理、主要影响因素、应用以及发展前景;同时概述了电化学分析方法的特点、分类和在DNA检测中的应用,介绍了电化学和分子信标结合的最新进展及展望。最后阐述了本论文的研究目的和意义以及新颖之处。第二章配合物型电化学活性—非活性转换分子信标(M~(n+)-CAs-MB)的设计及表征本章详细阐述了高热稳定电化学活性—非活性分子信标的设计和合成:将具有灵敏电化学响应信号的胭脂红酸偶联到分子信标上,作为电化学活性-非活性信号分子,利用分子信标发卡结构和它与目标序列作用后发生构型改变,使胭脂红酸分子可在缔合状态和解离状态(OFF/ON)间变化,从而令其具有在电化学活性—非活性间切换的能力,用于构建新型非固定性电化学分子信标;再加入金属离子形成配合物,以提高分子信标的热稳定性。同时利用紫外—可见光谱对胭脂红酸金属配合物以及胭脂红酸金属配合物型电化学活性—非活性转换分子信标进行表征。结果表明,金属离子的加入有效地提高了电化学分子信标的热稳定性。由于金属、配体可以改变的特点,因此对电化学分子信标的结构设计具有广泛的灵活性。而这一系列的研究工作对电化学活性—非活性转换分子信标的发展具有重要的意义。第叁章配合物型电化学活性—非活性转换分子信标(M~(n+)-CAs-MB)热力学研究热力学研究可以对反应过程的热行为及影响因素进行深入的了解和探索,目前有关分子信标热力学方面的研究已有报道。本章对设计的配合物型电化学活性—非活性转换分子信标进行了详细的热力学探究,计算了配合物型电化学活性—非活性转换分子信标的热力学参数,同时,对不同配合物组成的电化学活性—非活性转换分子信标的差异性进行了研究;从理论上推导了不同金属离子配合物组成的电化学活性—非活性转换分子信标对热稳定性的影响,结果证明金属配合物型电化学活性—非活性转换分子信标具有高的热稳定性,可直接在溶液中进行杂交识别,实现对活体细胞进行直接电化学识别检测,以及实时PCR电化学检测。第四章配合物型电化学活性—非活性转换分子信标(M~(n+)-CAs-MB)分子信标的电化学行为研究将电化学检测技术与高特异性的分子信标技术结合是DNA分析检测的趋势,而如何将电化学分子信标用于溶液检测,提高热稳定性,进行实时PCR检测是关键所在。本章对热稳定电化学活性—非活性转换分子信标进行了电化学行为研究,结果表明金属离子的加入改善了电化学活性—非活性转换分子信标的热稳定性,提高了其熔链温度Tm。同时金属离子的加入并没有改变分子信标的杂交过程。另外,金属离子对分子信标热循环的回环率也有一定影响:金属离子地加入使得电化学分子信标在开始阶段受热循环的影响明显减小。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
活性非活性转换论文参考文献
[1].高杲.与不同疏水性的聚电解质相互作用中溶菌酶的结构活性转换和可控释放的研究[D].复旦大学.2008
[2].谭雪莲.配合物型电化学活性—非活性转换分子信标的设计及其性质研究[D].华东师范大学.2008
[3].张帆.DNA电化学活性—非活性转换分子信标的制备及其应用研究[D].华东师范大学.2008