禽流感病毒荧光免疫层析检测试纸条的研制

论文摘要

禽流感是重要的人兽共患病,建立现场快速灵敏的检测方法是防控其发生和流行的前提和基础。本研究采用不同亚型流感毒株交叉免疫小鼠法来免疫小鼠,通过多个亚型的NP表达蛋白来筛选杂交瘤阳性细胞株,获得分泌针对NP蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞4株。通过抗体的两两配对,基于荧光量子点作为免疫层析抗体的标记探针,借助免疫层析试纸条双抗夹心法原理,筛选出了适用于免疫层析的两株单克隆抗体,研制了禽流感病毒（Avian influenza virus,AIV）荧光免疫层析检测试纸条[A lateral-flow immunoassay strip with quantum dots（QDs）against AIV,AIV-QD-LFIA],并对该试纸条进行了特异性、敏感性、可重复性及可靠性分析。试验结果显示:本研究所建立的AIV-QD-LFIA试纸条检测禽流感标准抗原H5N1-HK的敏感性达到104EID50,检测标准抗原H9N2-HK的灵敏度为102EID50,比商品化的禽流感病毒抗原检测卡灵敏度高100倍,比国家标准实时荧光RT-PCR（rRT-PCR）灵敏度低约100倍;可特异性地检测出H5亚型、H7亚型、H9亚型、H1亚型、H3亚型等A型流感病毒,与IBV、NDV等常见禽呼吸道传染病病原无交叉反应,且经过了国家流感中心标准样本盘的样品测试,特异性强;同时该法具有良好重复性,连续4周检测20个样品重复结果均为阳性;小规模田间试验显示该法用于禽流感病毒的普查监测结果可靠。可见本研究所建立的AIV-QD-LFIA试纸条可满足禽流感病毒快速、高灵敏的检测需求,具有广阔的应用空间。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 孙洁,陈兵,杨春华,吴峰,陈雨,郑晓聪,王津津,陶虹,丁晶,于力,秦智锋

关键词: 禽流感病毒,荧光免疫层析检测试纸条,检测

来源: 上海畜牧兽医通讯 2019年04期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心,深圳市检验检疫科学研究院,江西出入境检验检疫局,清华大学深圳研究生院,武汉轻工大学

基金: 国家重点研发计划(2016YFD0501103),深圳市知识创新计划基础研究布局项目(JCYJ20160323163102764)

分类号: S852.65

DOI: 10.14170/j.cnki.cn31-1278/s.2019.04.001

页码: 2-7

总页数: 6

文件大小: 684K

下载量: 300

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