塞内卡病毒A结构蛋白VP1诱导PK-15细胞凋亡

塞内卡病毒A结构蛋白VP1诱导PK-15细胞凋亡

论文摘要

塞内卡病毒A(SVA)作为一种新发病病原,致病机制仍不清楚。通过显微镜观察发现,SVA感染PK-15细胞后能使细胞产生明显的细胞病变(CPE),同时伴随着严重的细胞凋亡。为了深入研究SVA诱导凋亡的情况,在验证SVA各蛋白真核质粒正常表达后,通过Annexin V-FITC/PI双染流式方法检测SVA各蛋白诱导凋亡的情况,Annexin V-FITC/PI和Hoechst染色后显微镜观察磷脂酰丝氨酸和核凝聚程度,通过Western blotting和RT-PCR技术分析SVA-VP1对凋亡通路中主要调控分子Caspase3、Caspase8和Bax蛋白质和mRNA水平的影响,发现SVA-VP1能够显著诱导细胞发生早期和晚期凋亡,并且能够促进凋亡蛋白Caspase3、Caspase8及Bax蛋白和mRNA水平的上调。本研究结果为深入研究SVA调控宿主细胞凋亡的分子机制和致病机制奠定了理论基础。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 Western blotting
  •     1.2.2 显微镜观察
  •     1.2.3 流式细胞术
  •     1.2.4 Annexin V-FITC/PI荧光染色
  •     1.2.5 Hoechst-33258 荧光染色
  •     1.2.6 RNA的提取及反转录
  • 2 结 果
  •   2.1 SVA诱导PK-15细胞发生细胞病变
  •   2.2 SVA蛋白真核质粒在PK-15细胞中正常表达
  •   2.3 SVA-VP1具有凋亡功能
  •   2.4 SVA-VP1诱导细胞发生早期和晚期凋亡
  •   2.5 SVA-VP1促进凋亡蛋白Caspase3、Bax和Caspase8的蛋白和mRNA水平上调
  • 3 讨 论
  • 4 结 论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 王咏,毛箬青,张克山,郑海学,刘湘涛

    关键词: 塞内卡病毒,细胞,细胞凋亡,流式细胞术

    来源: 畜牧兽医学报 2019年04期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室

    基金: 国家自然科学基金重点项目(U1501213),云南省重点研发计划项目(2018BB004)

    分类号: S852.65

    页码: 811-820

    总页数: 10

    文件大小: 1363K

    下载量: 305

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