Cas9蛋白的克隆表达、分离纯化及多克隆抗体制备

论文摘要

目的:获得高纯度Cas9蛋白,制备Cas9蛋白特异性抗体。方法:以Cas9基因序列为模板,设计特异性引物,PCR扩增获得Cas9基因全长序列,利用无缝拼接技术构建pET28a-Cas9重组表达载体;转化E.coli BL21（DE3）,经IPTG诱导表达Cas9蛋白,并利用His-Tag技术分离纯化Cas9蛋白;将纯化获得的Cas9蛋白免疫新西兰大白兔,制备Cas9蛋白多克隆抗体。结果:pET28a-Cas9重组表达载体转化的E.coli BL21（DE3）可表达Cas9蛋白,纯化的Cas9蛋白免疫家兔得到的多克隆抗体效价>1∶256 K。结论:本研究获得了高质量Cas9蛋白及多克隆抗体,为后续CRISPR-Cas9基因编辑的应用奠定了良好的基础。

论文目录

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 刘芳,卢婷,蔡梦迪,吴芳草,陈相好,王彩霞,崔古贞,陈峥宏

关键词: 蛋白,蛋白表达与纯化,多克隆抗体

来源: 贵州医科大学学报 2019年07期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学

专业: 生物学

单位: 贵州医科大学基础医学院微生物学教研室,贵州省普通高等学校病原生物学特色重点实验室,贵州医科大学医学检验学院

基金: 贵州省研究生科研基金立项项目(11348),国家自然科学基金项目(31760318,31500078,31560318,31601012,81460314),贵州省科技计划项目[(2018)1132],大学生创新训练项目(DC201710660022)

分类号: Q51;Q78

DOI: 10.19367/j.cnki.1000-2707.2019.07.003

页码: 757-761+766

总页数: 6

文件大小: 844K

下载量: 521

相关论文文献

• [1].鸡Hsp60基因的克隆表达及多克隆抗体制备[J]. 中国家禽 2018(23)
• [2].寨卡病毒prM蛋白原核表达及其多克隆抗体制备[J]. 中国病原生物学杂志 2018(09)
• [3].猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白1α多克隆抗体的制备及应用[J]. 安徽农业科学 2019(12)
• [4].Ⅱ型鲤疱疹病毒ORF121蛋白的多克隆抗体制备及鉴定[J]. 水产学报 2019(06)
• [5].补体C9分子原核表达与多克隆抗体的制备[J]. 中国兽医杂志 2019(02)
• [6].猪细胞因子信号传导抑制因子1蛋白的表达纯化与多克隆抗体制备[J]. 中国兽医科学 2019(06)
• [7].鸡Shp-Shp-2基因的克隆表达及多克隆抗体制备[J]. 中国家禽 2018(20)
• [8].兔抗人copine-8蛋白多克隆抗体的制备[J]. 细胞与分子免疫学杂志 2018(05)
• [9].口蹄疫病毒3C蛋白多克隆抗体的制备与鉴定[J]. 畜牧与兽医 2019(01)
• [10].TgMIC6的优化表达及其多克隆抗体的制备[J]. 中国病原生物学杂志 2019(02)
• [11].DLL4蛋白真核表达及多克隆抗体制备[J]. 生物技术通报 2018(08)
• [12].纳尔逊海湾病毒S3蛋白纯化及大鼠多克隆抗体制备[J]. 细胞与分子免疫学杂志 2019(05)
• [13].鸡源性HMGB1蛋白的原核表达及多克隆抗体制备[J]. 中国动物传染病学报 2018(02)
• [14].猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白多克隆抗体的制备及其中和活性研究[J]. 黑龙江畜牧兽医 2019(19)
• [15].EB病毒LMP1 C端重组蛋白多克隆抗体的制备和鉴定[J]. 温州医科大学学报 2018(07)
• [16].寨卡病毒E蛋白第三结构域的可溶性表达及多克隆抗体的制备[J]. 中国生物制品学杂志 2019(06)
• [17].猪P58~(IPK)蛋白多克隆抗体的制备[J]. 农业生物技术学报 2019(11)
• [18].猪NLRP6蛋白的原核表达、纯化及其多克隆抗体的制备[J]. 中国畜牧兽医 2019(09)
• [19].牛病毒性腹泻病毒E1蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备[J]. 动物医学进展 2018(11)
• [20].四环素多克隆抗体的制备及鉴定[J]. 黑龙江畜牧兽医 2019(03)
• [21].刚地弓形虫TgPRF的原核表达、多克隆抗体制备与应用[J]. 中国热带医学 2019(07)
• [22].人视黄醇结合蛋白原核蛋白表达和兔多克隆抗体的制备[J]. 细胞与分子免疫学杂志 2019(07)
• [23].制备醛固酮多克隆抗体建立检测血浆醛固酮的化学发光免疫分析法[J]. 中国免疫学杂志 2018(01)
• [24].甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶2 EGF片段多克隆抗体的制备及鉴定[J]. 微生物学免疫学进展 2018(02)
• [25].猪流行性腹泻病毒Nsp7蛋白的表达与多克隆抗体制备[J]. 畜牧与兽医 2017(11)
• [26].人GPC3基因的原核表达及多克隆抗体的制备[J]. 生物技术通报 2017(11)
• [27].猪热休克蛋白40(Hsp40)的原核表达、纯化及多克隆抗体的制备[J]. 中国兽医学报 2019(04)
• [28].兔抗破骨细胞蛋白质酪氨酸磷酸酶多克隆抗体的制备和应用[J]. 吉林大学学报(医学版) 2018(03)
• [29].牛病毒性腹泻病毒的体外培养及其多克隆抗体的制备[J]. 中国生物制品学杂志 2018(11)
• [30].人WWP2蛋白的重组表达和多克隆抗体的制备[J]. 生物技术 2017(06)

标签：蛋白论文;  蛋白表达与纯化论文;  多克隆抗体论文;