百合谷胱甘肽-S-转移酶基因(LotGSTL)的克隆及原核表达

百合谷胱甘肽-S-转移酶基因(LotGSTL)的克隆及原核表达

论文摘要

采用RACE技术,克隆OT百合‘Robina’(Lilium OT hybrids’Robina’)中编码谷胱甘肽转移酶基因LotGSTL,对其进行了生物信息学分析,研究了该基因在不同组织中的表达特性,并对该基因进行原核表达。结果显示:该基因全长800 bp,ORF为717 bp,编码238个氨基酸。氨基酸序列比对及系统分析表明,该基因与拟南芥的两个Lambda类GST基因聚为一类,初步确定为百合Lambda类GST基因,命名为LotGSTL。生物信息学分析表明,LotGSTL蛋白含有典型的GST蛋白保守结构域,为亲水性蛋白,无跨膜结构,分子量为27 278.2 Da,理论等电点为5.2,分子式为C1257H1933N309O361S4,可能存在14个磷酸化位点。建立了稳定的LotGSTL1原核表达体系,原核表达的LotGSTL1蛋白大约为27 kD,与预测的蛋白相对分子量一致。分析了LotGSTL基因在不同器官中的表达模式,发现其在花、叶、根、鳞茎中表达量均较高,而茎中表达量较低,相对表达量依次为:花>叶>根>鳞茎>茎。该研究将为解析百合LotGSTL基因的抗逆功能提供帮助,对于未来百合抗逆分子育种的研究有所帮助。

论文目录

  • 1 结果与分析
  •   1.1 百合GST基因的克隆
  •   1.2 百合GST基因序列同源性分析
  •   1.3 百合GST蛋白生物学信息分析
  •   1.4 百合GST的原核表达
  •   1.5 GST在百合不同部位的相对表达量分析
  • 2 讨论
  • 3 材料与方法
  •   3.1 材料
  •   3.2 百合总RNA提取及其c DNA合成
  •   3.3 百合GST基因的克隆
  •   3.4 百合GST基因生物学信息分析
  •   3.5 百合GST基因的原核表达
  •   3.6 百合GST基因表达模式分析
  • 作者贡献
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 边晓天,邵杨,张克中,崔金腾,葛伟,贾月慧

    关键词: 百合,谷胱甘肽转移酶基因克隆,原核表达

    来源: 分子植物育种 2019年20期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,园艺

    单位: 北京农学院园林学院,北京农学院城乡生态环境北京实验室,北京乡村景观规划设计工程技术研究中心,北京农学院植物科技学院

    基金: 北京市自然科学基金-市教委联合资助项目(KZ201810020029),北京林果业生态功能提升协同创新中心(PXM2016-014207-000038),北京市科技计划(KZ201810020029)共同资助

    分类号: Q943.2;S682.29

    DOI: 10.13271/j.mpb.017.006611

    页码: 6611-6618

    总页数: 8

    文件大小: 2086K

    下载量: 210

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