于立伟
(黑龙江省鹤岗市人民医院病理科黑龙江鹤岗154101)
【摘要】弹力纤维具一定的弹性,对酸、碱、沸水有抵抗性,但可被胃、胰酶消化。在HE染色标本中,弹力纤维与其他纤维的区别,需用特殊染色方法确认,其中最重要的Weigert型技术为弹力纤维的特异性染色方法。在病理过程中,很多疾病都可以引起弹性纤维的显著变化。观察皮肤组织中弹力纤维的变化,有助于诊断皮肤组织病变。显示与判断心血管疾病,如鉴别心内膜弹力纤维增生症与心内膜心肌纤维化,在动脉硬化、主动脉炎时,观察动脉壁破坏情况等。显示组织内弹力纤维断裂、变性等病变,如慢性支气管炎、肺气肿等。显示与鉴别肿瘤组织,如弹力纤维瘤、乳腺早期导管浸润癌等。弹性纤维的破坏、增生、断裂与崩解,对于研究组织、器官的病变程度有一定的价值。
【关键词】弹力纤维染色;检测;临床应用
【中图分类号】R44【文献标识码】A【文章编号】1007-8231(2015)22-0048-02
弹力纤维多分布于皮肤、血管壁、肺泡壁、韧带、声带、气管、耳廓软骨及某些腺体导管。弹力纤维由两种成分组成,即集合成束的弹力微原纤维(由糖蛋白形成)和均质状的弹力蛋白。弹力纤维具一定的弹性,对酸、碱、沸水有抵抗性,但可被胃、胰酶消化。在HE染色标本中,弹力纤维与其他纤维的区别,需用特殊染色方法确认,其中最重要的Weigert型技术为弹力纤维的特异性染色方法。目前,此染色原理尚不明了,间苯二酚品红液(即碱性品红的铁间苯二酚色淀形成的复合物)与弹力纤维结合并将其染成蓝黑色。现对间苯二酚品红法的实际操作分析如下。
1.材料与方法
1.1材料
来自我院病理科手术后送检的血管组织。
1.2试剂
间苯二酚品红液:①碱性品红2.0g,②间苯二酚4.0g,③蒸馏水200mL,④30%三氯化铁25mL,⑤浓盐酸4mL;①+②+③加热溶解,玻棒搅拌煮沸后慢慢加入④,继续搅拌煮沸3~5min,冷却过滤;滤液倾去不用,将滤纸和沉淀物一起放回烧杯内,温箱中烘干;取出后加95%乙醇200mL,隔水煮至沉淀物完全溶解后取出滤纸,冷却后过滤;补足蒸发的乙醇,最后加入⑤,4℃冰箱保存。
1.3操作
将试剂放入蒸馏水中,在烧杯内加热煮沸溶解,缓慢加入29%三氯化铁(FeCl3)25ml,搅拌,煮沸2分钟后,直接将烧杯放入冷水中,冷却后过滤,将滤液倾去不要,将滤纸和沉淀物一同放入烧杯内置于干燥箱烘干,待其完全干燥时连同滤纸一齐投入烧杯内加95%酒精200ml,(亦可不烘干,直接加无水酒精200ml)小心加温,不时搅拌,直至沉淀物完全溶解,将滤纸取出,冷却过滤,然后补足因蒸发而失散的酒精数量,最后加盐酸4ml即可应用。保存数月,但使用前要过滤。常规切片脱蜡至95%乙醇。入间苯二酚品红液l~2h。95%乙醇分化,镜下控制。VG液30s,速水洗。快速95%乙醇分化,脱水、透明、封固。
2.结果
弹力纤维呈蓝黑色,胶原纤维呈红色,肌纤维和红细胞呈黄色。间苯二酚品红液用时加盖密封,用后即放冰箱保存,六个月后染色能力下降,染色时间可适当延长(但其他组织略有共染)。经强氧化处理,即染色前经酸化高锰酸钾液(见网状纤维染色一节)氧化,草酸漂白,可将三种弹力纤维同时显示。Hart改良法可显示较细的弹力纤维,即将Weigert液以1%盐酸乙醇稀释(1:9)进行过夜染色。许多人使用嗽苏木素法,速度快且效果显著,但系非弹力纤维的特异性染色方法。
3.讨论
在病理过程中,很多疾病都可以引起弹性纤维的显著变化。弹性纤维的破坏、增生、断裂与崩解,对于研究组织、器官的病变程度有一定的价值。这里将应用范围具体说明如下:
3.1显示皮肤组织中弹性纤维的变化
在皮肤组织病变中,特别是真皮的弹性纤维,时常发生改变,出现增生、卷曲、变性、崩解等,使弹性纤维形成聚集成堆的束状,团块状及不规则排列的现象。其病变常见于:弹性纤维痣;弹性纤维增多症;弹性过度性皮肤;皮肤疏松;皮肤环状肉芽肿;肢端角化的弹性纤维变性;硬皮病等。
3.2用于显示与判定心血管疾病
弹性纤维是心脏和血管的主要成分之一。在很多心血管疾病中,都可引起弹性纤维的显著变化。借助于显示弹性纤维的特殊染色方法可观察、研究弹性纤维的增生与破坏情况。
显示及鉴别心内膜弹性纤维增生症与心内膜心肌纤维化,在两种病变时心内膜中的弹性纤维和胶原纤维会出现异常增多,其病理变化在HE染色中两者甚为相似。因此,需要特殊染色进行显示与鉴别。如用弹性纤维染色法显示增生的纤维主要为弹性纤维,即可判定为心内膜弹性纤维增生症,反之,胶原纤维染色显示增生的纤维,主要是胶原纤维则可诊断为心内膜心肌纤维化;显示动脉粥样硬化时,硬化斑块底部的内弹性板崩解、断裂至消失的情况;显示与观察梅毒性主动脉炎时,动脉中层弹性纤维发生灶性破坏的程度;高血压时,小动脉的弹性纤维显著增生,形成多层的病变特点;用于无脉症时,显示在动脉中层的弹性纤维密集排列,弹性层增厚;
3.3用以观察某些病变中的弹性纤维是否增生与破坏
在某些组织、器官病变时弹性纤维常出现增生与破坏。如慢性支气管炎、肺气肿、原发性或继发性肾固缩等,均可致弹性纤维纵行、散乱、断裂、破坏和增生,形成碎片或颗粒。这些病理变化用弹性纤维染色法均可显示出来。
3.4用于显示与鉴别肿瘤组织
3.4.1弹性纤维瘤:在弹性纤维瘤中的纤维组织中,有许多球状或颗粒状变化的弹性纤维,在HE染色中容易忽略,用弹性纤维染色清晰可见瘤体内有丰富的弹性纤维和弹性球,从而确定诊断。
3.4.2乳腺癌:弹性纤维主要见于导管和血管壁的周围,这种现象多见于硬癌和浸润性小叶癌上。如弹性纤维染色法证明在导管癌上伴随出现弹性纤维增生,可支持是早期浸润癌的诊断。
在常规HE染色时,弹性纤维呈亮粉红色,虽然与胶原纤维等在颜色上相似,凭经验一般可以辩认出来。但因病变所致弹性纤维散乱、断裂或异常增生,有时就不易识别。而用显示弹性纤维的特殊染色方法,则可很容易识别,并能准确进行判定与鉴别。在弹性纤维染色中,显示血管的弹性纤维,大多采用VG液复染,这样可使动脉中层的平滑肌染成黄色,中膜中的胶原纤维染成红色,便于对比观察。
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