导读:本文包含了白喉毒素基因论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:白喉,毒素,基因治疗,基因,转录,腺癌,抗体。
白喉毒素基因论文文献综述
程金章,杨景朴,仲炜,王海涛,赵胤[1]（2018）在《抗CD133单链抗体/白喉毒素DAB389融合蛋白的基因构建、表达、纯化及鉴定》一文中研究指出目的构建抗CD133单链抗体(scFV)/白喉毒素DAB389融合蛋白,在大肠杆菌里表达,并鉴定及纯化。方法采用PCR的方法,扩增融合基因DAB389-Linker-CD133(scFV),并插入到原核表达载体pET28a中,构建了重组表达载体pET28a-DAB389-CD133,融合蛋白在BL21(DE3)中表达,表达产物经SDS-PAGE鉴定,通过Ni柱纯化目的蛋白,获得了纯度达95%的DAB389-Linker--CD133(scFV)融合蛋白。Western blot鉴定蛋白活性。流式细胞仪检测能否与CD133抗原特异性结合。结果扩增的片段与理论值一致,序列分析正确;纯化得到纯度为95%的重组蛋白。Western blot分析能特异性地与抗白喉抗体结合。流式细胞仪检测能与CD133抗原特异性结合。结论成功构建了抗CD133单链抗体(scFV)/白喉毒素DAB389融合蛋白,具有结合抗原和免疫毒素双重活性,为进一步靶向治疗奠定了基础。(本文来源于《中国实验诊断学》期刊2018年09期）
周宇,赵兆,袁涛,李晓容,李春阳[2]（2014）在《白喉毒素无毒突变体CRM197基因的克隆与表达》一文中研究指出目的构建白喉毒素(Diphtheria toxin)无毒突变体CRM197(Cross-reacting materials 197)的原核表达载体,并在大肠杆菌中表达重组蛋白。方法以白喉杆菌(ATCC39255)基因组DNA为模版,采用聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction,PCR)扩增CRM197基因,插入表达载体pET11b中,构建重组原核表达质粒pET11b-CRM197。经双酶切及测序鉴定正确后,重组质粒被转化入大肠杆菌Rosetta 2(DE3)pLysS,IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE和Western blot进行鉴定。结果重组表达质粒经双酶切及测序鉴定,结果表明与预期一致;表达的重组蛋白相对分子质量约58 000,并可与鼠抗CRM197单克隆抗体特异性结合。结论已成功构建了重组原核表达载体pET11b-CRM197,重组的CRM197蛋白在大肠杆菌中得到了表达,为以该重组突变体作蛋白载体制备结合疫苗奠定了基础。(本文来源于《微生物学免疫学进展》期刊2014年03期）
张景锋,卫恒习,李莉,张守全[3]（2012）在《白喉毒素A基因表达载体pEGFP-N1-DTA的构建及功能验证》一文中研究指出引言白喉毒素(Diphtheria Toxin,DT)是由感染β噬菌体基因组的白喉棒状杆菌所产生的分子量为58 kD的外毒素,经胰蛋白酶水解分成193个氨基酸残基的A片段(diphtheria toxin A,DTA)和342个氨基酸残基的B片段(diphtheriatoxin B,DTB)。DTA分子量为22kD,位于白喉毒素氨基末端,是毒素活性基团,它在细胞内可以催化ADP-核糖基化,灭活真核细胞的延(本文来源于《中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十六届学术研讨会论文集》期刊2012-08-01）
姚娜,芮红兵[4]（2012）在《不同免疫球蛋白启动子控制的白喉毒素A链基因对淋巴瘤细胞的抑制作用》一文中研究指出目的比较免疫球蛋白κ轻链启动子/增强子和免疫球蛋白重链启动子/增强子控制的白喉毒素A链基因对淋巴瘤细胞生长抑制。方法将白喉毒素A链基因或细菌β半乳糖苷酶基因与免疫球蛋白启动子/增强子相连构建成白喉毒素A链真核表达载体pcDNA3IgκDTA、pcDNA3IgHDTA或细菌β半乳糖苷酶真核表达载体pcDNA3IgκLacZ、pcDNA3IgHLacZ。由脂质体介导将质粒转染至产或不产免疫球蛋白的真核细胞中,检测β半乳糖苷酶基因在不同细胞中的表达水平,并进一步检测白喉毒素A链基因的表达对转染细胞的生长抑制作用。结果由免疫球蛋白κ轻链启动子/增强子或免疫球蛋白重链启动子/增强子控制的β半乳糖苷酶基因只能在产免疫球蛋白(κ轻链型)细胞株CA46中表达。当β半乳糖苷酶基因与质粒pcDNA3IgκDTA或pcDNA3IgHDTA共转染时,β半乳糖苷酶基因的表达只在CA46细胞中被抑制。质粒pcDNA3IgκDTA、pcDNA3IgHDTA的表达均能明显抑制CA46细胞的生长,而对照质粒pcDNA3IgκLacZ或pcDNA3IgHLacZ对CA46细胞则无明显作用,并且pcDNA3IgκDTA的抑制作用较pcDNA3IgHDTA更强。结论由免疫球蛋白κ轻链启动子/增强子或免疫球蛋白重链启动子/增强子控制的白喉毒素A链基因的表达能特异性地杀伤产免疫球蛋白(κ轻链)的肿瘤细胞。并且免疫球蛋白κ轻链启动子/增强子较免疫球蛋白重链启动子/增强子有更强的启动转录活性。(本文来源于《中国实用医药》期刊2012年16期）
唐中伟[5]（2011）在《新型用于艾滋病基因治疗的结合白喉毒素突变体的慢病毒载体》一文中研究指出慢病毒载体作为基因治疗的工具之一备受关注,尤其是基于HIV-1构建的慢病毒载体。结合笔者的研究工作,对特异性识别HIV阳性细胞的非整合性依赖Rev并结合白喉毒素突变体的新型慢病毒载体构建以及抗白喉毒素细胞系的建立作了介绍。(本文来源于《激光生物学报》期刊2011年03期）
于芳,金宁一,李昌,刘玉生,佟敬山[6]（2007）在《抗HIV-1 gp120单链抗体和白喉毒素融合基因的构建及其在大肠杆菌中的表达》一文中研究指出目的构建人源抗HIV-1单链抗体和白喉毒素融合基因的原核表达质粒,并诱导其在大肠杆菌中表达重组蛋白。方法通过PCR扩增,获得目前应用较多的DAB389基因片段,将其克隆入原核表达载体pET-28a,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,经SDS-PAGE和Western blot方法分析鉴定。结果酶切及DNA序列测定鉴定正确。SDS-PAGE和West-ern Blot分析证实,重组质粒可表达出相对分子质量为75200的蛋白,与DT-hs120融合基因分子量一致,其表达量约占菌体总蛋白的21%,表达形式主要为包涵体。结论成功构建了DT-hS120表达载体,并获得了高效表达。(本文来源于《免疫学杂志》期刊2007年05期）
李玉光,张罗献,阎俊宇,马利军,马厚志[7]（2006）在《白喉毒素A基因转染对人肺腺癌细胞体内外生长的影响》一文中研究指出目的:探讨白喉毒素A(DTA)基因在肺腺癌基因治疗中的作用。方法:①体外细胞毒试验:对转染DTA基因的人肺腺癌细胞A549(A549/DTA)、转染空载体的人肺腺癌细胞A549(A549/DTA-)和野生型A549,采用MTT法测定四环素作用72h后的细胞存活率。②动物实验:将1.2×107的A549细胞接种于裸鼠皮下,当肿瘤长至约350mg时,随机分组:转DTA基因治疗组,荷瘤裸鼠每次给予含DTA基因的病毒上清0.4ml瘤体注射;空载体组给予0.4ml含空载体的病毒上清;对照组给予0.4ml生理盐水,均2d1次,连续3周;从开始注射病毒上清之日起,每周2次测量肿瘤大小,按公式计算肿瘤相对质量。3周后处死动物,瘤组织作病理分析。结果:①细胞存活率:转空载体的A549与野生型A549形态无明显改变,而转染DTA基因的A549细胞体积明显缩小,并有细胞碎片。②瘤体注射DTA基因的病毒上清可使皮下肿瘤显着缩小,从注射之日起至21d,肿瘤体积缩小,而空载体组、对照组在相同时间内肿瘤体积增加。转DTA基因治疗的瘤组织出现了细胞坏死和凋亡,而空载体组及对照组瘤组织无坏死及细胞凋亡征象。结论:四环素调控白喉毒素A基因对肺腺癌有一定的治疗作用。(本文来源于《郑州大学学报(医学版)》期刊2006年03期）
罗威[8]（2006）在《DF3/MUC1启动子转录调控序列调控下的白喉毒素A链基因对人乳腺癌细胞的特异性杀伤作用研究》一文中研究指出目的:构建含人乳腺癌DF3/MUC1启动子转录调控序列和白喉外毒素A链(DTA)基因的重组表达载体,同时探讨转入靶向DF3/MUC1的白喉毒素A链(DTA)基因对乳腺癌细胞生物学行为的影响。方法:利用PCR技术从人乳腺癌细胞MCF-7中扩增出DF3/MUC1启动子的转录调控序列并克隆入pGL3-Basic载体,构建重组质粒pGL3-DF3,将其瞬时转染DF3阳性的乳腺癌细胞株MCF-7和DF3阴性的乳腺癌细胞株MDA-MB-231,荧光素酶定量分析检测启动子的活性。从质粒pIBI30-DTA中切下DTA片断,以DTA基因替换重组质粒pGL3-DF3中的虫荧光素酶基因,构建重组质粒pGL3-DF3-DTA。将构建的pGL3-DF3-DTA真核表达质粒转染DF3阳性的乳腺癌细胞系,转染经RT-PCR证实目的基因已转入细胞内,24h后对转入基因的肿瘤细胞的生物学行为进行观察。结果:成功地构建了含人乳腺癌DF3/MUC1启动子转录调控序列和DTA的表达载体,酶切和测序结果与预期完全相符。体外实验证实转染阳性质粒pGL3-DF3-DTA的细胞生长速度明显减慢,细胞凋亡形态学观察到明显凋亡发生,流式细胞技术证实其凋亡率增加。结论:重组质粒pGL3-DF3-DTA构建成功。靶向DF3/MUC1的DTA可发挥其特异性的杀伤作用,抑制DF3阳性的乳腺癌细胞生长,对乳腺癌的基因治疗有潜在的应用价值。(本文来源于《华中科技大学》期刊2006-04-01）
罗威,黄文广,殷涛[9]（2005）在《含人乳癌DF3/MUC1启动子转录调控序列和白喉毒素A链基因表达载体的构建》一文中研究指出目的:构建含人乳癌DF3/MUC1启动子转录调控序列和白喉毒素A链(DTA)基因的重组表达载体。方法:利用PCR技术从人乳癌细胞MCF7中扩增出DF3/MUC1启动子的转录调控序列并克隆入pMD18T载体中,再从pMD18T-DF3重组质粒中切下DF3/MUC1启动子的转录调控序列并亚克隆入pGL3Basic载体,构建重组质粒pGL3-DF3。从质粒pIBI30DTA中切下DTA片断,以DTA基因替换重组质粒pGL3-DF3中的虫荧光素酶基因,构建重组质粒pGL3DF3DTA。结果:构建了含人乳癌DF3/MUC1启动子转录调控序列和DTA的表达载体,酶切和测序结果与预期完全相符。结论:重组质粒pGL3-DF3-DTA构建成功。(本文来源于《郑州大学学报(医学版)》期刊2005年03期）
李玉光,赵立军,高东田,张庆芝[10]（2003）在《转染白喉毒素基因对人肺腺癌细胞的影响》一文中研究指出目的 探讨白喉毒素A基因对人肺腺癌细胞 (A5 4 9)的影响。方法 对转染白喉毒素A基因的人肺腺癌细胞 (A5 4 9/DTA) ,转空载体的人肺腺癌细胞 (A5 4 9/DTA-)野生型A5 4 9细胞 ,采用MTT法测定四环素作用 72h后的细胞存活率。动物实验 :12只裸鼠随机分为转基因组、空载体组和对照组 ,每组 4只 ,将 1.2× 10 7A5 4 9/DTA细胞 ,A5 4 9/DTA-细胞及野生型A5 4 9细胞分别接种于相应的裸鼠皮下 ,给裸鼠饮含四环素(1μg/ml)的水 ,成瘤后 ,每周 2次测量瘤体大小 ,计算瘤体重量。 结果 A5 4 9/DTA细胞存活率较A5 4 9/DTA-细胞 ,A5 4 9细胞存活率明显下降 (P <0 .0 1) ,而A5 4 9/DTA-细胞与A5 4 9细胞存活率无差别 (P >0 .0 5 )。空载体组与对照组的裸鼠全部长出肿瘤 ,且肿瘤生长迅速 ,而转基因组有 1只裸鼠未长出肿瘤 ,肿瘤生长缓慢 ,前者瘤体的重量是后者的 3倍。结论 体外转染白喉毒素A基因可杀伤人肺腺癌细胞并降低人肺腺癌细胞的致瘤性。(本文来源于《中国现代医学杂志》期刊2003年22期）
白喉毒素基因论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的构建白喉毒素(Diphtheria toxin)无毒突变体CRM197(Cross-reacting materials 197)的原核表达载体,并在大肠杆菌中表达重组蛋白。方法以白喉杆菌(ATCC39255)基因组DNA为模版,采用聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction,PCR)扩增CRM197基因,插入表达载体pET11b中,构建重组原核表达质粒pET11b-CRM197。经双酶切及测序鉴定正确后,重组质粒被转化入大肠杆菌Rosetta 2(DE3)pLysS,IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE和Western blot进行鉴定。结果重组表达质粒经双酶切及测序鉴定,结果表明与预期一致;表达的重组蛋白相对分子质量约58 000,并可与鼠抗CRM197单克隆抗体特异性结合。结论已成功构建了重组原核表达载体pET11b-CRM197,重组的CRM197蛋白在大肠杆菌中得到了表达,为以该重组突变体作蛋白载体制备结合疫苗奠定了基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
白喉毒素基因论文参考文献
[1].程金章,杨景朴,仲炜,王海涛,赵胤.抗CD133单链抗体/白喉毒素DAB389融合蛋白的基因构建、表达、纯化及鉴定[J].中国实验诊断学.2018
[2].周宇,赵兆,袁涛,李晓容,李春阳.白喉毒素无毒突变体CRM197基因的克隆与表达[J].微生物学免疫学进展.2014
[3].张景锋,卫恒习,李莉,张守全.白喉毒素A基因表达载体pEGFP-N1-DTA的构建及功能验证[C].中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十六届学术研讨会论文集.2012
[4].姚娜,芮红兵.不同免疫球蛋白启动子控制的白喉毒素A链基因对淋巴瘤细胞的抑制作用[J].中国实用医药.2012
[5].唐中伟.新型用于艾滋病基因治疗的结合白喉毒素突变体的慢病毒载体[J].激光生物学报.2011
[6].于芳,金宁一,李昌,刘玉生,佟敬山.抗HIV-1gp120单链抗体和白喉毒素融合基因的构建及其在大肠杆菌中的表达[J].免疫学杂志.2007
[7].李玉光,张罗献,阎俊宇,马利军,马厚志.白喉毒素A基因转染对人肺腺癌细胞体内外生长的影响[J].郑州大学学报(医学版).2006
[8].罗威.DF3/MUC1启动子转录调控序列调控下的白喉毒素A链基因对人乳腺癌细胞的特异性杀伤作用研究[D].华中科技大学.2006
[9].罗威,黄文广,殷涛.含人乳癌DF3/MUC1启动子转录调控序列和白喉毒素A链基因表达载体的构建[J].郑州大学学报(医学版).2005
[10].李玉光,赵立军,高东田,张庆芝.转染白喉毒素基因对人肺腺癌细胞的影响[J].中国现代医学杂志.2003
论文知识图
