酶联免疫反应加速仪在输血前四项检测中的应用研究

酶联免疫反应加速仪在输血前四项检测中的应用研究

朱丽萍(河南开封市中医院475000)

【中图分类号】R446.1【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2012)15-0091-02

【摘要】目的探讨酶联免疫反应加速仪在输血前四项检测中的应用效果。方法用酶联免疫反应加速仪和常规方法同步检测卫生部临检中心输血前四项的质控品以及随机抽取的400例输血患者血清。结果输血前四项检测中的梅毒螺旋体抗体(TP)、人类免疫缺陷病毒抗体(HIV)和乙肝表面抗原(HbsAg)检测,常规方法37℃温箱孵育第一步反应需要60分钟,第二步反应需要3O分钟,采用酶联免疫反应加速仪第一步反应3O分钟,第二步反应15分钟已可达到与常规方法同样的校果;丙型肝炎(HCV)检测,常规方法37℃温箱孵育第一步反应需要30分钟,第二步反应需要30分钟,采用酶联免疫反应加速仪第一步反应10分钟,第二步反应10分钟已可达到与常规方法同样的效果,且特异性二种方法100%吻合。结论酶联免疫反应加速仪对输血前四项的检测在保证结果特异性、准确度的基础上,可大幅缩短检测时间,为临床抢救病人争取宝贵时间,值得在临床推广使用。

【关键词】酶联免疫反应加速仪输血前四项检测快速

NY/MMJ酶联免疫反应加速仪是一款广泛应用于酶联免疫反应检测的辅助仪器,其工作原理是利用电磁波加速生物分子振转,合理提供酶免反应所需能量,加速抗原抗体结合。同时采用先进的PTC热风加热、恒温技术和内置震荡,为酶联免疫反应提供最佳反应条件,从而达到缩短抗原抗体反应时间,提高检测灵敏度的效果。笔者将其应用到输血前的四项酶免反应中,并就其检测结果与传统方法进行了研究对比,结果如下。

1材料与方法

1.1试剂乙肝表面抗原试剂盒、丙型肝炎抗体试剂盒、梅毒螺旋体抗体试剂盒、人类免疫缺陷病毒抗体检测试剂盒均有上海科华公司生产。

1.2样本HbsAg、HCV、TP、HIV质控品均来源于卫生部临床中心;正常人血清(阴性标本);124例随机血清样本均来自我院2011年1~6月份手术患者。其中男性患者76例,女性48例,年龄22~72岁,平均年龄48岁。

1.3仪器NY/MMJ酶联免疫反应加速仪(上海复星长征医学科技有限公司)。全自动酶标仪(ThermoLabsystemsMK3)。

1.4使用上海科华生物技术有限公司生产的乙肝表面抗原试剂盒、丙型肝炎抗体试剂盒、梅毒螺旋体抗体试剂盒、人类免疫缺陷病毒抗体检测试剂盒。分两组对样本进行检测,传统检测方法:具体操作方法按《全国临床检验操作规程》及试剂盒说明书进行。采用酶联免疫反应加速仪组与传统检测方法操作的不同之处为:梅毒螺旋体抗体(TP)、人类免疫缺陷病毒抗体(HIV)和乙肝表面抗原(HbsAg)检测,常规方法37℃温箱孵育第一步反应需要60分钟,第二步反应需要30分钟,采用酶联免疫反应加速仪第一步反应30分钟,第二步反应15分钟;丙型肝炎(HCV)检测,常规方法37℃温箱孵育第一步反应需要30分钟,第二步反应需要30分钟,采用酶联免疫反应加速仪第一步反应10分钟,第二步反应10分钟。

2结果

2.1线性试验

4个项目的待测样品均为卫生部临检中心质控品,其浓度分别为:HbsAg:4IU/ml,TP:2NCU/ml,HCV:2NCU/ml,HIV:2NCU/ml。使用阴性血清对4种质控品进行稀释,采用两种方法对稀释样本进行检测,重复次数为5次,检测结果如下

表1两种方法对HbsAg测定线性结果比较

表4两种方法对HIV测定线性结果比较

从表1~表4可以看出,两种方法的测试结果线性均非常良好(r>0.99),对10倍稀释处于临界浓度的样本检测,采用酶联免疫加速仪检测方法的吸光度优于常规方法,在一定程度上提高了检测试剂的灵敏度。

2.2临床标本对照试验

对124份临床随机样本进行常规方法和酶联免疫加速仪方法的检测结果进行比对,结果如下

表5两种方法临床标本检测结果对照表

从表5可以看出,使用酶联免疫加速仪方法检测的临床结果与常规检测方法测得的结果完全一致,但前者的工作效率明显提高。

3讨论

酶联免疫反应是指以酶作为标记物,以抗原和抗体间免疫结合反应为基础的固相吸附测定方法[1]。抗原搞体的特异性结合是基于抗原决定簇与抗体分子超变区分子间的结构互补性与亲和性,同时抗原表位与抗体高变区必须有足够的紧密接触时间,才能保证两者的完全结合[2]。新药典强调酶联免疫试剂采用两步法检测就是为了保证酶联免疫反应中抗原抗体的接触时间,从而最大程度的减少免联免疫反应中出现的“钩状效应”问题。

酶联免疫加速仪是利用电磁波加速生物分子振转,合理提供酶免反应所需能量,加速抗原抗体结合。同时采用先进的PTC热风加热、恒温技术和内置震荡,为酶联免疫反应提供最佳反应条件,从而达到缩短抗原抗体反应时间而不影响反应结果的效果。早在2007年蒋永清[3]、杨曙梅[4]等对此就有报道。而本文实验结果也表明使用酶联免疫加速仪在缩短检测时间的前提下,仍可达到良好的检测线性和保证结果的确准确性与检测试剂的灵敏度。是一款值得临床应用和推广的辅助检测设备。

参考文献

[1]李金明,主编.临床免疫测定技术[M].第一版,北京人民军医出版社,2005:168.

[2]王兰兰,主编.临床免疫学和免疫学检验[M].第二版,北京人民卫生出版社,2003:14.

[3]蒋永清,张晓梅,等.应用酶联免疫反应加速仪测定乙肝三对的检测结果分析与评价[J].江西医学检验,2007,25(2):147-148.

[4]杨曙酶,俞娟,王惠民.酶联免疫反应加速仪在检测乙肝表面抗原中的作用[J].中国实验诊断学,2009,13(12):153-154.

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