四川省江油市人民医院检验科四川江油621700
【摘要】目的探讨实时荧光定量PCR在肝炎检测中的有效利用。方法选取我院2015年1月~2017年1月收治的180例乙肝患者患者，均采用经酶联免疫吸附试验检测血清，根据血清学标志分为A组、B组、C组各60例，并进行血清实时荧光定量PCR检测。结果A组、B组、C组的血清实时荧光定量PCR检测阳性率差异显著（P＜0.05）。结论采取实时荧光定量PCR检测有利于协助诊断乙肝，值得在临床进一步探讨和推广。
【关键词】慢性乙型肝炎；实时荧光定量；PCR
慢性乙型肝炎是指经乙肝病毒检测结果为阳性，且病程超过6个月伴有慢性肝炎症状者。患者的主要表现有恶心、腹胀、乏力、食欲减退、肝大、肝性面容等。据报道世界大约有4亿人感染乙型肝炎，目前我国的肝炎感染者超过1亿人[1]。若肝炎未得到有效控制，可进一步发展为肝硬化、肝癌等。因此准确有效的诊断和治疗十分必要。HBVDNA定量检测能够使医生准确的了解患者体内HBV的数量，为临床的合理用药和治疗提供依据。目前临床常用的是实时荧光定量PCR检测技术，其可既能够检测病毒的传染性，也可有效的反映乙肝病毒复制水平，协助临床诊断。故为了探讨实时荧光定量PCR在肝炎检测中的效果，笔者特选取180例病例研究，分析报道见下文。
1资料与方法
1.1一般资料
选取我院2015年1月~2017年1月收治的180例乙肝患者患者，男性100例，女性80例；年龄25~54岁，平均（39.44±1.20）岁。采取酶联免疫吸附试验检测血清，并根据血清标志分成三组各60例，A组：HBeAg、HBsAg和抗HBc阳性；B组：HBsAg、抗HBe、抗HBc阳性；C组：HBsAg、抗HBc阳性。三组患者一般资料比较，差异不显著（P＞0.05），具有可比性。所有患者已签署知情同意书，本研究经我院伦理委员会批准实施。
1.2方法
所有患者均采取荧光定量PCR检测方法，采取HBVDNA定量检测试剂盒和荧光定量PCR分析仪检测，采集患者的静脉血1.5ml，将其注入到无菌离心管，常温放置2小时并在低温下（4℃）静置1个小时，并进行8000r/min离心5分钟，抽取200ul血清放置到另外一个无菌离心管当中，提取DNA，作PCR分析。阳性值：每毫升拷贝≥5.0×102。
1.3统计学分析
数据以统计学软件SPSS20.0处理。计数资料以（n、%）表示，采用Fisher确切概率法或检验：理论频数T＞5时用检验，理论频数T＜1时确切率检验。P＜0.05为差异有显著差异性。
2.结果
比较三组的HBVDNA含量和阳性率
A组、B组、C组的血清实时荧光定量PCR检测阳性率差异显著（P＜0.05）。具体内容见表1。
3讨论
乙肝主要通过血制品、母婴、性接触等途径传播，是常见的传染性肝病，威胁患者的健康。有效的诊断和治疗有助于控制症状，延缓肝病进展。血HBVDNA定量检测具有重要的临床价值，有助于了解乙肝病毒复制状况、HBV携带状况，且可帮助医生确定是否需要抗病毒治疗和选取药物提供临床依据[2]。实时荧光定量PCR灵敏度和特异度高，具有无污染、实时、准确等特点，在临床广泛应用于病原体检测、基因表达分析等方面的研究中，能够准确的定性病毒，且还可以了解在治疗过程中病毒的数量，也能够评估治疗的疗效和耐药性等[3]。HBVDNA意味着存在病毒复制，和乙肝的活动与传染性密切相关。A组、B组、C组的血清实时荧光定量PCR检测阳性率差异显著（P＜0.05）。在本次研究中，A组的阳性率明显高出B组和C组，且有39例（65.00%）超过5.0×104拷贝/ml，说明乙肝病毒处于复制活跃期。虽然B组多的复制数据显著低于A组、C组，但仍然存在7例（11.66%）超过5.0×104拷贝/ml，这表明病毒DNA复制未停止。C组的患者主要为HBsAg病毒携带者，阳性率低于A组，但是高于B组。B组、C组阳性率低于A组是乙肝病毒复制并非为活跃期。实时荧光定量可以有效的反映病毒携带情况、传染情况等，有助于协助乙肝的诊断，但本次研究可见，A组的阳性率为93.33%，尚未达到100%，说明采取实时荧光定量不能够完全的替代血清标志物的检测。但本次研究仍然不失为一次有效的探索综上所述，采取实时荧光定量PCR检测有利于协助诊断乙肝，值得在临床进一步探讨和推广。
参考文献：
[1]陈占国，周武，王忠永，等.实时荧光定量PCR检测血HBVDNA的疑难结果分析及其对策[J].中华检验医学杂志，2013，36（3）：217-221.
[2]夏吉荣，杨双双，罗志鑫.多参数在实时荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒DNA室内质控中的应用[J].激光杂志，2013，10（4）：123-124.
[3]夏吉荣，曹炬，杨双双.实时荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒DNA性能验证的临床应用[J].激光杂志，2014，7（10）：131-133.