鸡白痢沙门氏菌直接-多重PCR检测体系的建立

鸡白痢沙门氏菌直接-多重PCR检测体系的建立

论文摘要

通过对鸡白痢沙门氏菌毒力质粒pSPUV上入侵质粒抗原J蛋白和质粒共转移调控因子的编码基因ipaJ和traJ的序列分析,在特异区域设计PCR引物,经沙门氏菌属不同种及常见肠道致病菌的交叉验证,筛选出三对鸡白痢沙门氏菌特异检测引物ipaJ-417、traJ-387、traJ-476.并且调试出一种利用两种DNA聚合酶的直接三重PCR检测体系:invA-211/traJ-387/16S-495,可以对鸡白痢沙门氏菌进行快速准确的鉴定.

论文目录

  • 1 引 言
  • 2 材料和方法
  •   2.1 材 料
  •     2.1.1 菌株
  •     2.1.2 沙门氏菌感染鸡群
  •     2.1.3 试剂
  •     2.1.4 引物合成
  •   2.2 方 法
  •     2.2.1 鸡白痢沙门氏菌特异靶标引物设计
  •     2.2.2 特异引物验证
  •     2.2.3 DNA聚合酶共用反应
  •     2.2.4 三重PCR引物筛选
  •     2.2.5 三重PCR体系设置
  •     2.2.6 三重PCR体系灵敏度检测
  •     2.2.7 养殖场鸡群的PCR检测
  • 3 结 果
  •   3.1 特异引物设计及验证
  •     3.1.1 pSPUV序列分析及特异引物设计
  •     3.1.2 鸡白痢引物特异性验证
  •   3.2 多重PCR体系的设置
  •     3.2.1 混合酶共用PCR
  •     3.2.2 三重PCR
  •     3.2.3 三重PCR
  •     3.2.4 养殖场鸡群测试结果
  • 4 讨 论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 程玲玲,严伟,侯若彤,帅培强,张彪,白林含

    关键词: 鸡白痢沙门氏菌,毒力质粒,特异检测引物,聚合酶共用反应缓冲液,直接三重检测体系

    来源: 四川大学学报(自然科学版) 2019年01期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,农业科技

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 四川省出入境检验检疫局技术中心,四川大学生命科学学院动物疫病防控与食品安全四川省重点实验室,成都市食品药品检验研究院

    基金: 国家蛋鸡产业技术体系岗位科学家项目(CARS-41-K09)

    分类号: S852.61

    页码: 149-154

    总页数: 6

    文件大小: 714K

    下载量: 277

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