山西医科大学段志辉030000
【摘要】目的：通过对527例非小细胞肺癌P63、TTF-1、Napsin-A表达的分析，探讨这三个免疫组化指标在非小细胞肺癌中表达的意义。方法：采用SPSS17.0统计软件包进行分析，P63、TTF-1、Napsin-A在非小细胞肺癌中的表达情况采用X?检验，以P<0.05为标准来说明差异具有统计学意义。结果：P63在肺鳞癌中阳性表达率为98.5%，在肺腺癌中阳性表达率为16.5%，X2=365.889，P=0.000差异显著；TTF-1在肺鳞癌中阳性表达率为1.3%，在肺腺癌中阳性表达为率92.9%，X2=443.710，P=0.000，差异显著；Napsin-A在肺鳞癌中阳性表达率为1.3%，在肺腺癌中阳性表达为率86.3%，X2=287.312，P=0.000，差异显著。结论：P63、TTF-1、Napsin-A在非小细胞肺癌中对于鳞癌和腺癌的鉴别诊断具有很高的临床价值。
【关键词】P63，TTF-1，Napsin-A，非小细胞肺癌，鉴别
1材料和方法
1.1材料
527例非小细胞肺癌患者中男417例，女110例；年龄为20~83岁，中位年龄61岁；肺鳞癌的272例，肺腺癌的为255例。
1.2方法
1.2.1主要试剂
(1)I抗：NapsinA：LEICA；P63：迈新，TTF-1：迈新
(2)II抗：鼠抗体napsinA单克隆抗体（ARP，AmericanResearchProducts，Inc）
鼠抗体TTF-1单克隆抗体（北京中山技术有限公司）
(3)通用型SP试剂盒（北京中山技术有限公司）
(4)DAB显色剂：罗氏
1.2.2实验过程
福尔马林固定，石蜡包埋的病理组织块切成4um厚切片，每个蜡块各做4张切片。第一张用HE染色，第二张用0.01%PBS代替一抗作为阴性对照，第三，四张分别进行抗-napsinA，抗-TTF-1免疫组织化学SP法染色。入ROCH-VENTANABENCHMARK-XT型机中实验。结果判定阳性细胞数＜10%为“－”，阳性细胞数≥10%为“+”。
1.3统计学分析
采用SPSS17.0统计软件包进行分析，临床分类资料比较采用X?检验，以P<0.05为标准来说明差异具有统计学意义。
2结果
2.1P63在非小细胞肺癌中鳞癌和腺癌的表达情况
P63在肺鳞癌患者中有268例显示阳性，阳性表达率为98.5%(268/272)，在肺腺癌患者中有42例显示阳性，阳性表达率为16.5%(42/255)，卡方检验结果显示，X2=365.889，P=0.000＜0.05，P63在鳞癌中的阳性表达率明显大于在腺癌中的阳性表达。
2.2TTF-1在非小细胞肺癌中鳞癌和腺癌的表达情况
TTF-1在肺鳞癌患者中有4例显示阳性，阳性表达率为1.3%(4/310)，在肺腺癌患者中有237例显示阳性，阳性表达为率92.9%(237/255)，卡方检验结果显示，X2=443.710，P=0.000＜0.05，TTF-1在鳞癌中的阳性表达率明显小于在腺癌中的阳性表达。
2.3Napsin-A在非小细胞肺癌中鳞癌和腺癌的表达情况
Napsin-A在肺鳞癌患者中有4例显示阳性，阳性表达率为1.3%(4/310)，在肺腺癌患者中有220例显示阳性，阳性表达为率86.3%(220/255)，卡方检验结果显示，X2=287.312，P=0.000＜0.05，Napsin-A在鳞癌中的阳性表达率明显小于在腺癌中的阳性表达。
3讨论
肺癌是原发于支气管-肺的肿瘤，是当前世界人类最常见的恶性肿瘤之一，约占所有恶性肿瘤的16%，约占全部癌症死亡的25%-30%。通常，肺癌分为小细胞肺癌(small-celllungcancer，SCLC)和非小细胞肺癌(non-small-celllungcancer，NSCLC)两大类，其中非小细胞肺癌约占全部肺癌的80%-85%，患者5年生存率低于15%[1]。如今，借助于分子标志物区分肺鳞癌和肺腺癌已成为趋势。随着靶向药物的开发及对肿瘤分子机制的深入研究，已发现肺癌的肿瘤标志物有CEA(癌胚抗原)，CA125，NSE(神经烯醇酶)，LDH-5，LDH-3等虽有一定的临床参考价值，却缺乏特异性。寻找特异性的肿瘤标记物成为肺癌治疗中的热点环节。正常肺组织中，P63表达于支气管储备细胞，参与P53介导的细胞信号转导途径[2]，从而抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡。P63基因由于其在结构和功能上与P53具有很高的相似性，因此有人认为它可能是一种肿瘤抑癌基因[3]。BokhovenH及HibiK的研究提示，P63与肿瘤的发生、发展具有显著的相关性[4]。刘君[5]等人的实验结果发现，P63在非小细胞肺癌中呈高表达，提示P63与非小细胞肺癌的发生、发展有密切的相关性，P63在鳞癌中的表达显著高于腺癌，有助于鉴别诊断鳞癌与腺癌，这与本研究的结果相同。本研究527肺癌患者中，P63在肺鳞癌中阳性表达率为98.5%，在肺腺癌中阳性表达率16.5%，X2=365.889，P=0.000。Wang[6]等研究P63在肺鳞癌中的表达发现，P63对肺鳞癌的诊断的灵敏度高达100%，在小细胞肺癌中不表达。周春辉[7]等对肺癌中四个指标表达的研究结果同样表明，P63在肺鳞癌组织中的阳性率达100%，在其他类型的肺癌中的表达率很低，他们认为，P63可以作为肺鳞癌的肿瘤标志物。TTF-1的基因位于人染色体14q13[8]，是由371个氨基酸组成的多肽，含有3个外显子及1个内含子，在胚胎期和发育成熟期的甲状腺、肺上皮细胞中表达，选择性地表达于肺Ⅱ型上皮细胞和支气管细胞的一个亚型中。
参考文献：
[1]徐从高,张茂宏,杨兴泰等,癌-肿瘤学原理和实践(第五版),山东科学技术出版社,2001:887-888.
[2]张超,代红艳,卿晋,等.P63基因的研究进展[J].皮肤病与性病,2012，34(3):142-144.
[3]YangA,KaghadM,WangY,etal.p63,ap53homologat3q27-29,encodesmult-ipleproductswithtransactivating,death-inducing,anddominant-negativeactivities.MolCell,1998,2(3):305~316.
[4]vanBokhovenH，BrunnerHG.SplittingP63[J].AmJHunGenet，2007，71(1):1-13.
[5]WangBY,GilJ,KaufmanD,etal.P63inpulmonaryepithelium,pulmonarysquamousneoplasms,andotherpulmonarytumors[J].HumPathol,2002,33(9):921-926.
[6]周春辉,王华新,李晓楠,等.肺癌中P63与P53、E-cadherin、Ki-67表达的比较[J].临床与实验病理学,2004,20(4):432-435.
[7]GuzziS,PriceM,DeFeliceM,etal.Thyroidnuclearfactor1(TTF-1)containsahomeodomainanddisplaysanovelDNAbindingspecificity.EMBOJ,1990,9:3631-3639.
[8]MukhopadhyayS,KatzensteinAL.Subclassificationofnon-smallcelllungcarcinomaslackingmorphologicdifferentiationonbiopsyspecimen:utilityofanimmunohistochemicalpanelcontainingTTF-1,napsinA,p63,andCK5/6[J].AmJSurgPathol,2011,35(1):15-25.