磷酸化应激诱导蛋白论文_齐兴柱,汪军,刘磊

导读:本文包含了磷酸化应激诱导蛋白论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:磷酸化,诱导,蛋白,古巴,镰刀,中华,蜜蜂。

磷酸化应激诱导蛋白论文文献综述

齐兴柱,汪军,刘磊[1](2019)在《尖孢镰刀菌古巴专化型4号生理小种的磷酸化应激诱导蛋白1(FoSTIP1)基因的克隆及表达分析》一文中研究指出本研究克隆了尖孢镰刀菌古巴专化型4号生理小种(Fusariumoxysporumf.sp.cubenserace4,Foc4)转录因子FoS kn7一个候选的下游基因,结果表明该基因cDNA编码序列全长1737 nt,编码一个含578个氨基酸残基的蛋白质。对其编码的蛋白进行了结构域和进化分析,结果表明该蛋白质含有胁迫诱导蛋白(stress-in-ducible protein-1, STI1)结构域和多个叁角形4肽重复序列结构域(tetratricopeptiderepeat,TPR)。该蛋白质与尖孢镰刀菌番茄专化型的磷酸化应激诱导蛋白1(STIP1)亲缘关系最近,因此初步将其确定为Foc4的磷酸化应激诱导蛋白并命名为FoS TIP1。采用相对荧光定量PCR方法分析了该基因在野生型B2菌株入侵香蕉苗根部及在外源H_2O_2诱导情况下的表达变化,也分析了FoSKN7基因缺失突变体中该基因在外源H_2O_2诱导情况下的表达。结果表明在入侵香蕉苗根部及在外源H_2O_2诱导情况下,B2菌株中的FoSTIP1表达均有上调,而FoSKN7基因缺失突变体中FoSTIP1即使有H_2O_2诱导,其表达也远低于B2菌株中的FoSTIP1。推测FoSTIP1可能是FoS kn7的靶基因并参与了Foc4抗外源氧化胁迫。(本文来源于《热带作物学报》期刊2019年02期)

翟娜[2](2018)在《中华蜜蜂磷酸化应激诱导蛋白1基因(AccSTIP1)的生物学功能分析》一文中研究指出中华蜜蜂(Apis cerana cerana)是我国重要的蜜蜂品种,具有很多优于其他蜜蜂的优点,如适应能力强、抗螨抗病能力强、耐寒抗热和善于利用零星蜜源植物等。作为一种开花植物的主要传粉者之一,中华蜜蜂对区域生态和农业发展的平衡做出了巨大贡献。不过由于环境情况恶化,滥用农药等因素使中华蜜蜂的存活环境变得愈来愈严峻。因此,保护中华蜜蜂这一我国所特有的蜜蜂资源变得愈来愈紧迫。当中华蜜蜂面临各种各样的环境胁迫时,如热休克、重金属、紫外线(UV)辐射和不同农药,其会诱导细胞氧化应激反应。热休克蛋白(heat shock protein,Hsps)作为分子伴侣,通常用于调节细胞氧化应激反应。到目前为止,磷酸化应激诱导蛋白1(stress-induced-phosphoprotein1,STIP1)是研究最为广泛的辅助伴侣分子之一,其功能是作为Hsp70和Hsp90的连接体分子并可以直接参与两者之间的相互作用,后将Hsp90导向Hsp70-client蛋白复合物上。文献报道,STIP1基因在应激防御反应中发挥着重要的作用。迄今为止,STIP1在中华蜜蜂中的生物学功能研究却没有报道。在本研究中,从中华蜜蜂中分离获得了AccSTIP1基因,并对其进行了序列分析、表达特性分析和功能分析。本研究的主要结果如下所示:(1)从中华蜜蜂中分离获得了STIP1基因,并命名为AccSTIP1。AccSTIP1的开放阅读框长度为1623bp,其编码一个由540个氨基酸组成的蛋白质,通过DNAman预测其蛋白分子量和等电点分别约为61kDa和6.8。通过氨基酸序列比对分析,我们发现AccSTIP1基因与其它蜜蜂的STIP1基因具有高度的同源性。通过进化树分析,我们发现中华蜜蜂AccSTIP1与意大利蜜蜂AmSTIP1的同源性最高,进化关系最为亲近。(2)通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法对AccSTIP1基因在不同发育时期的表达特性进行了分析。结果发现,AccSTIP1基因在6日龄幼虫期的表达水平最高。在幼虫期,5日龄幼虫的表达水平比4日龄幼虫的高。在蛹期,白眼蛹的表达水平高于其它蛹期(粉眼蛹、褐眼蛹和黑眼蛹),而褐眼蛹的表达水平是最低的。在成虫期,1日龄成虫的表达水平高于15日龄和30日龄成虫。(3)通过qRT-PCR方法对AccSTIP1基因在不同组织部位的表达特性进行了分析。结果发现,AccSTIP1基因在肌肉中表达水平最高,其次是胸部,在中肠中表达水平最低。(4)通过qRT-PCR方法对AccSTIP1基因在不同非生物胁迫下的表达特性进行了分析。结果发现,AccSTIP1基因的表达水平明显受高温(42℃)、HgCl_2、H_2O_2、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐、噻虫嗪、噻螨酮和百草枯的诱导。然而,CdCl_2、紫外线(UV)辐射和醚菌酯抑制了AccSTIP1基因的表达。这些结果表明AccSTIP1基因参与非生物胁迫的氧化应激反应。(5)通过Western blot方法对AccSTIP1基因在不同非生物胁迫下的蛋白表达特性进行了分析。结果发现,高温(42℃)、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐、噻虫嗪和噻螨酮诱导了AccSTIP1的蛋白表达。然而,CdCl_2、紫外线(UV)辐射和醚菌酯抑制了AccSTIP1的蛋白表达。这些结果表明AccSTIP1的蛋白水平与转录水平的表达趋势是一致的,进一步表明AccSTIP1基因在非生物胁迫的氧化应激中起到重要的作用。(6)通过纸片扩散方法和混合功能氧化(MFO)系统方法对重组AccSTIP1蛋白的功能进行了分析。结果发现,重组AccSTIP1蛋白可以降低百草枯和HgCl_2导致的氧化损伤,并保护质粒DNA免受羟自由基的剪切。这些结果表明AccSTIP1基因在氧化应激中具有保护效应。(7)通过RNA干涉方法在中华蜜蜂体内沉默AccSTIP1基因,沉默后检测了抗氧化相关标记基因的转录水平。结果发现,与对照组相比,沉默组中抗氧化相关标记基因的转录水平明显降低。这些结果表明该基因在防御氧化应激过程中发挥着重要作用。(本文来源于《山东农业大学》期刊2018-05-10)

李岩,李建远[3](2011)在《磷酸化应激诱导蛋白的研究进展》一文中研究指出当生物面临各种病理及环境压力胁迫时,细胞内的分子伴侣能够辅助蛋白质的正确折迭。近年来的研究表明,分子伴侣如Hsp70和Hsp90的生物功能的发挥受到各种辅助伴侣分子的调控。磷酸化应激诱导蛋白(stress-inducible protein 1,stip1)是迄今为止研究最为广泛的辅助伴侣分子,它能够直接与Hsp70和Hsp90相结合,并且作为连接体分子,把细胞质中的Hsp70-client蛋白复合物转运到Hsp90上。更为重要的是,stip1与多种癌症、衰老及雄性生殖关系密切,它可能参与了生物体内复杂的信号调控通路。本文将对stip1的发现、结构特点及生物学功能做一概述。(本文来源于《中外医学研究》期刊2011年12期)

李续建[4](2002)在《磷酸化应激诱导蛋白基因全长cDNA序列的克隆、表达、定位和功能研究》一文中研究指出人类基因组草图和基因组甲基化扫描提示人类11号染色体上有一个与白血病发病相关的甲基化位点,其下游部位存在磷酸化应激诱导蛋白(Stress Induced Phosphoprotein Ⅰ,STIP1)基因,磷酸化应激诱导蛋白是一个重要的伴侣分子,含有由叁十四个氨基酸组成的重复序列(tetratricopiptide repeats,TPR),人体内某些蛋白质如蛋白磷酸酶5(PP5)、免疫亲和素(FKBP51、FKBP52和Cyp40)、细胞周期蛋白(cdc基因)、热应激蛋白70和90(Hsp70、Hsp90)等也含有类似序列的结构域;磷酸化应激诱导蛋白的两端分别与Hsp70和Hsp90相连,可能对于肿瘤细胞发生、应激反应、甾体激素作用和细胞增殖分化等均具有重要的调节作用。 为克隆磷酸化应激诱导蛋白的全长序列,采用了cDNA末端扩增方法和长距离聚合酶链反应,分别扩增该基因的5’末端、3’末端和中间部分的序列,经产物纯化、与载体连接、阳性克隆筛选、测序证实,克隆了该基因的全长cDNA序列。通过生物信息学方法与已知的磷酸化应激诱导蛋白序列基本区域匹配(BLAST)分析发现,测序证实我们克隆到的该基因序列,不仅包含有原有序列,而且将其5’端的序列进一步延伸,此延伸序列恰恰是该基因的一个外显子,可以用于该基因mRNA转录本表达的研究;该基因全长序列的克隆为在培养细胞系中研究磷酸化应激诱导蛋白表达、定位和功能研究,奠定了可靠的基础。 为研究磷酸化应激诱导蛋白的表达、定位和功能,采用了长距离聚合酶链反应扩增含有开放阅读框架的靶片段,经产物纯化、与载体连接,分别构建了STIP1基因的原核表达载体和真核表达载体;IPTG诱导原核表达载体,变性聚丙酰胺凝胶电泳与染色后,可见相应大小的蛋白质表达;STIP1基因的真核表达载体转染细胞系后,共聚焦显微镜下观察STIP1蛋白主要分布于细胞核内;用药物 解放军总医院军医进修学院 博士学位论文 筛选STIPI基困转染的细胞后,流式细胞仪检测细胞周期,可见G。-G;期和G;- M期的细胞明显脓,S期细胞明显增多。磷酸化应激诱导蛋白作为姊wR结 构域的一个核蛋白,是一个重要的分子伴侣蛋白,可能与体内椭类似结构鞭 功能各异的蛋白质相互作用,STIPI原核表达载体的构建,为研究该蛋白质与其 它蛋白质之间的相互作用提供了前提条件。磷酸化应激诱导蛋白可以使增殖期的 细胞明显增多,可能和肿瘤细胞的发生或恶性变有一定的关系,值得进一步研 究。 为研究原代白血病细胞磷酸化应激诱导蛋白基困转录本的表达,采用了逆 转录触…方法。贩,STIPI基固原有序列的12个外显子与X染色体 上的一段ON人序列完全匹配,不利于设计引物扩增所需要的片段。我们用生物信 息学方法,坝申盯1N基困的5’端序列,该序列为盯In基困的一个外显子, 且与x染色体上的mA序列不匹配,没计引物扩增,相应的靶片段,克隆测序证 实该序列与组装的序列一致;同时,STIPI基困5’CDNA末端扩增的实验结果, 也发现了相同的STIPI基固外显子。原代白血病细胞STIPI基困InRNA的表达存 在明显差异,复发组白血病患者较初友未用药者STIPI基困InRNA表驭达量明 显增高;初发未用药急性淋巴细胞白血病者的InRNA表达量较初发未用药急性髓 细胞白血病者明显增高;原代白血病细胞和部分肿瘤细胞系STIPI基困的mRNA 表达量较正常人的外周血单个核细胞、骨髓细胞和动员后的外周血干细胞均增 高。提示,原代白血病细胞和部分肿瘤细胞系STIPI基困MNA的过度表达,可 能和肿瘤的发生或恶性变有一定关系;磷跳应激诱导蛋白,不仅参与调节热应 激蛋白70和90的功能,而且与体内的多种蛋白质相互作用,可能是体内的一个 重要靶点,有可能用于某些疾病的干预治疗。 总之,抑究克隆了磷酬应俯导蛋白基因切A的金长序列,首次发现5 该基困的一个外显子,结合生物信息学的方法,用于检测STIPI基因InRNA转录 本的表达;通过构建STIPI原核细胞和真核细胞的表达载体,表湖@应大小的蛋 5 解放军总医院军医进修学院 博士学位论文 白质,亚细胞定位破定该蛋白质是一个核蛋白,且可以明显增加转染细胞S期的 细胞数量;在原代白血病细胞中STIPI基固转录本的表达量存在明显差异。磷酸 化应激诱导蛋白作为调节体内多种蛋白质功能的伴侣分子,可能是疾病治疗的一 个重要的靶点,值得进一步研究。(本文来源于《中国人民解放军军医进修学院》期刊2002-04-01)

磷酸化应激诱导蛋白论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

中华蜜蜂(Apis cerana cerana)是我国重要的蜜蜂品种,具有很多优于其他蜜蜂的优点,如适应能力强、抗螨抗病能力强、耐寒抗热和善于利用零星蜜源植物等。作为一种开花植物的主要传粉者之一,中华蜜蜂对区域生态和农业发展的平衡做出了巨大贡献。不过由于环境情况恶化,滥用农药等因素使中华蜜蜂的存活环境变得愈来愈严峻。因此,保护中华蜜蜂这一我国所特有的蜜蜂资源变得愈来愈紧迫。当中华蜜蜂面临各种各样的环境胁迫时,如热休克、重金属、紫外线(UV)辐射和不同农药,其会诱导细胞氧化应激反应。热休克蛋白(heat shock protein,Hsps)作为分子伴侣,通常用于调节细胞氧化应激反应。到目前为止,磷酸化应激诱导蛋白1(stress-induced-phosphoprotein1,STIP1)是研究最为广泛的辅助伴侣分子之一,其功能是作为Hsp70和Hsp90的连接体分子并可以直接参与两者之间的相互作用,后将Hsp90导向Hsp70-client蛋白复合物上。文献报道,STIP1基因在应激防御反应中发挥着重要的作用。迄今为止,STIP1在中华蜜蜂中的生物学功能研究却没有报道。在本研究中,从中华蜜蜂中分离获得了AccSTIP1基因,并对其进行了序列分析、表达特性分析和功能分析。本研究的主要结果如下所示:(1)从中华蜜蜂中分离获得了STIP1基因,并命名为AccSTIP1。AccSTIP1的开放阅读框长度为1623bp,其编码一个由540个氨基酸组成的蛋白质,通过DNAman预测其蛋白分子量和等电点分别约为61kDa和6.8。通过氨基酸序列比对分析,我们发现AccSTIP1基因与其它蜜蜂的STIP1基因具有高度的同源性。通过进化树分析,我们发现中华蜜蜂AccSTIP1与意大利蜜蜂AmSTIP1的同源性最高,进化关系最为亲近。(2)通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法对AccSTIP1基因在不同发育时期的表达特性进行了分析。结果发现,AccSTIP1基因在6日龄幼虫期的表达水平最高。在幼虫期,5日龄幼虫的表达水平比4日龄幼虫的高。在蛹期,白眼蛹的表达水平高于其它蛹期(粉眼蛹、褐眼蛹和黑眼蛹),而褐眼蛹的表达水平是最低的。在成虫期,1日龄成虫的表达水平高于15日龄和30日龄成虫。(3)通过qRT-PCR方法对AccSTIP1基因在不同组织部位的表达特性进行了分析。结果发现,AccSTIP1基因在肌肉中表达水平最高,其次是胸部,在中肠中表达水平最低。(4)通过qRT-PCR方法对AccSTIP1基因在不同非生物胁迫下的表达特性进行了分析。结果发现,AccSTIP1基因的表达水平明显受高温(42℃)、HgCl_2、H_2O_2、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐、噻虫嗪、噻螨酮和百草枯的诱导。然而,CdCl_2、紫外线(UV)辐射和醚菌酯抑制了AccSTIP1基因的表达。这些结果表明AccSTIP1基因参与非生物胁迫的氧化应激反应。(5)通过Western blot方法对AccSTIP1基因在不同非生物胁迫下的蛋白表达特性进行了分析。结果发现,高温(42℃)、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐、噻虫嗪和噻螨酮诱导了AccSTIP1的蛋白表达。然而,CdCl_2、紫外线(UV)辐射和醚菌酯抑制了AccSTIP1的蛋白表达。这些结果表明AccSTIP1的蛋白水平与转录水平的表达趋势是一致的,进一步表明AccSTIP1基因在非生物胁迫的氧化应激中起到重要的作用。(6)通过纸片扩散方法和混合功能氧化(MFO)系统方法对重组AccSTIP1蛋白的功能进行了分析。结果发现,重组AccSTIP1蛋白可以降低百草枯和HgCl_2导致的氧化损伤,并保护质粒DNA免受羟自由基的剪切。这些结果表明AccSTIP1基因在氧化应激中具有保护效应。(7)通过RNA干涉方法在中华蜜蜂体内沉默AccSTIP1基因,沉默后检测了抗氧化相关标记基因的转录水平。结果发现,与对照组相比,沉默组中抗氧化相关标记基因的转录水平明显降低。这些结果表明该基因在防御氧化应激过程中发挥着重要作用。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

磷酸化应激诱导蛋白论文参考文献

[1].齐兴柱,汪军,刘磊.尖孢镰刀菌古巴专化型4号生理小种的磷酸化应激诱导蛋白1(FoSTIP1)基因的克隆及表达分析[J].热带作物学报.2019

[2].翟娜.中华蜜蜂磷酸化应激诱导蛋白1基因(AccSTIP1)的生物学功能分析[D].山东农业大学.2018

[3].李岩,李建远.磷酸化应激诱导蛋白的研究进展[J].中外医学研究.2011

[4].李续建.磷酸化应激诱导蛋白基因全长cDNA序列的克隆、表达、定位和功能研究[D].中国人民解放军军医进修学院.2002

论文知识图

磷酸化应激诱导蛋白(stip1)的二级...良性骨肿瘤2-DE图谱骨肉瘤2-DE图谱抗氧化剂NAC对锰诱导的PC12细胞凋亡的...对锰诱导的PC12细胞骨架改变的影响...探针Mito-diNO2定量分析细胞中内源性...

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