导读:本文包含了非同位素原位杂交论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:原位,同位素,黑皮,病毒,垂体,肝炎,内分泌腺。
非同位素原位杂交论文文献综述
何建国[1]（2002）在《喉癌组织HPV16/18DNA非同位素原位杂交半定量研究》一文中研究指出研究发现HPVs与人类多种癌发生相关，特别是HPV16、18型，有学者将之称为“高危型”肿瘤病毒。目前，除宫颈癌外，HPVs与喉癌的关系也已受到重视。 多种实验手段研究证实，HPV16／18-DNA可在喉癌组织检出，但是HPV16／18感染在喉癌发生机制中的作用仍未阐明，本文采用非同位素原位杂交和显微图像分析技术，对喉癌组织HPV16／18-DNA杂交信号进行形态学定位和量化，结合免疫组化染色和图像分析测得的增殖细胞核抗原(PCNA)和突变型p53蛋白表达水平，进行相关性分析，讨论HPV感染与喉癌组织的增殖活性和恶性程度的量化关系。 一、材料和方法 收集63例喉癌手术切除石蜡包埋标本，另取声带息肉标本42例作为对照，所有标本均经病理学诊断证实。l）将石蜡包埋标本sw连续切片，每例切取4片，分别作非同位素原位l 杂交、阴性对照、以及p53和 PCNA免疫组化实验。 l、原位杂交：（ISH） 石蜡切片 73℃烤片过夜，脱蜡后，加入 0℃新鲜配制的 IX蛋白酶 K 和DNAjRNA酶稀释缓冲液消化，然后加入HPV16／18生物素核酸探针在 95℃水中变性 10分钟，放入冰水中防止复性 15分钟，之后置入 sthe甲酷 胺湿盒 37℃温箱中杂交过夜，杂交过夜的玻片分次滴加 IX和 ZX封闭蛋白 液5分钟，然后加入生物素抗体及BCIPWBT显色。 2、免疫组化SI方法 切片脱蜡后依次滴加过氧化酶阻断剂、Ich非免疫血清、P53－Ah－2 pCNA－pC10鼠单克隆抗体、生物素标记的第二抗体、链霉素蛋白一过氧化 酶溶液，最后加新鲜配置的DAB溶液显色。 3、所有标本均行显微图像分析 二、结 果 显微镜下 HPV 6／l非同位素原位杂交阳性信号位于细胞核内，为深蓝 色，呈斑块状分布。喉癌组织HPV16／18－DNA杂交阳性率明显高于声带息 肉组织，见表1。经卡方检验，有统计学卜显着性差异（f叫4m，p＜0阴1）。 表IHPV16／18DNA原位杂交阳性率 组织标本 例数 阳性例数 阳性率 喉 癌 63 23 3650O／ 声带息肉42 2 476％ 63例喉癌中，病理分化程度不同的标本阳性率、阳性细胞数和阳性面 2 积见表 2。高分化喉癌组 HPV 6／l－DNA阳性细胞数和面积均高于中低分 化喉癌组（。25750，尸＜0001；u＝25700，尸＜0001）。 表2 HPV16／18－DNA阳性细胞数和面积与喉癌分化程度－，、，，一—＿．．＿HPV阳性 细胞数 面积’分化程度 例数“二二、二’广—— ～‘－’——…一 例数（％）中位数 四分位数 中位数 四分位数 高分化 35 2叮57）2640 00O－9720 050 000－326 中、低分化28 3（107） 000 000－000 00 000－000 HPV16／18－DNA阳性组的PCNA阳性细胞数和阳性面积均明显高于 HPV16／18－DNA阴性组（u＝27300 p＜001；。，25750 p＜00OI），见 表3。 表3 喉癌组织HPV16／8－DNA和PCNA半定量 PCNA阳性细胞数PCNA阳性面积 原位杂交 例数—— 中位数 四分位数 中位数 四分位数 HP＼’阳性23 9320 2320－12200 330 067－504 HPV阴性 4O 3 760 000－7570 098 00－2．81 HP＼’阳性组的p53阳性细胞数和阳性面积均高于WhV16／18－DNA阴性 组…，2门m 厂＜0m1；I，刀05o p＜0皿1），见表4。 3 表4 喉癌组织HPV16／18－DNA和p53半定量 p53阳性细胞数p53阳性面积 原位杂交 例数—— 中位数 四分位数 中位数 四分位数 HPV阳性 23 126．80 0．00－168．00 3．82 0．0－5．75 HI，V阴性 40 15．20 0．00－65．40 0．37 0．o(本文来源于《浙江大学》期刊2002-05-01）
易静[2]（1996）在《电子显微镜水平非同位素原位杂交技术的现状与问题》一文中研究指出本文介绍原位杂交(非同位素方法)这一由分子生物学与组织学技术结合而成的新技术在电子显微镜水平的发展历史、目前的研究状况和存在的问题。本文结合作者应用电镜原位杂交技术探测肾脏内胶原mRNA分子的工作,报道了自己对包埋后电镜原位杂交技术的改良所作的探索,并阐述了对这一技术的灵敏度、"嗓音"干扰和分辨率等所存在问题的见解。(本文来源于《电子显微学报》期刊1996年Z1期）
邓辉南,陈清轩,魏庆信,陈永福[3]（1996）在《转基因猪外源生长激素基因的定位研究——非同位素标记染色体原位杂交技术》一文中研究指出近几年来发展起来的染色体原位杂交技术是进行基因定位研究的重要手段。它为进一步进行基因定点整合研究提供依据。本文采用非同位素标记染色体原位杂交技术对经显微注射得到的转基因猪进行了内源和外源猪生长激素(PGH)基因在染色体上定位的研究。 用BhlI对pSMTPGH注射基因(本室制备)进行单酶切,选取3.5kb片段以Dig进行标记。为了提高灵敏度,我们采用了胶体金标记抗体技术并结合使用银增加试剂。利用染色体的组型分析,对杂交点的分布进行了统计学分析,发现内源PGH基因位于12p~(11),与国外Thomsen,P.D.等报道的一致。插入的外源PGH基因呈随机分布,但对某一转基因猪来说,外源基因的插入是集中在某一染色体上。这一结果的发现为进行转基因猪外源基因定点整合提供了依据,也为研究外源基因整合位点和转基因猪表观性状的关系准备了条件。(本文来源于《生物工程学报》期刊1996年01期）
王福生,韩凤连,王松山,雷周云,王林杰[4]（1995）在《应用非同位素原位杂交检测肝组织中丙型肝炎病毒基因的分布》一文中研究指出为了研究丙型肝炎患者肝组织中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）基因的分布，我们应用地高辛标记的ＨＣＶ基因５＇端非翻译区的探针（长度为３２个寡核苷酸），对２４例急、慢性丙型肝炎患者活检的肝组织石蜡包埋切片进行了原位核酸杂交检测。结果显示：ＨＣＶ基因阳性的肝组织标本有１１例，检出率是４５．８％（１１／２４）。ＨＣＶ基因主要分布于肝细胞浆，偶见于肝细胞核内。此外在肝血窦的ｋｕｐｆｆｅｒ细胞、小血管内皮细胞和汇管区附近均有明显的ＨＣＶ基因阳性染色，而对照组均未发现ＨＣＶ基因阳性信号。(本文来源于《中华实验和临床病毒学杂志》期刊1995年04期）
向正华[5]（1994）在《用非同位素原位杂交组化在光镜和电镜水平观察前阿黑皮素mRNA在垂体的分布》一文中研究指出用非同位素原位杂交组化在光镜和电镜水平观察前阿黑皮素ｍＲＮＡ在垂体的分布向正华，等。解剖学杂志，１９９４；１７（２）：１３５用地高辛标记反意前阿黑皮素（Ｐｒｏ－ｏｐｉｏｍｅｌａｎｏｃｏｒｔｉｎ，ＰＯＭＣ）ｃＲＮＡ探针原位杂交组化在光镜和电镜水平观察了...(本文来源于《第二军医大学学报》期刊1994年06期）
张晋平,魏铜有,牛香兰,张旭东,王秋荣[6]（1994）在《非同位素EGF-反义mRNA探针的制备及其与组织切片的原位杂交》一文中研究指出本实验将含大鼠ＥＧＦ基因的ｐＧＥＭ４质粒扩增后制备出ＤＮＡ模板，体外转录合成非同位素反义ｍＲＮＡ探针，并与大鼠领下腺组织切片进行原位杂交。结果显示颗粒曲管细胞内杂交信号清晰可见，表明非同位素探针与同位素探针相比不仅具有敏感性和特异性，而且安全、简便、可靠。此外本实验对建立可靠易行的原位杂交方法进行了摸索。(本文来源于《长治医学院学报》期刊1994年03期）
游绍进,许锦阶,沈健[7]（1994）在《一种简便的非同位素原位杂交方法》一文中研究指出介绍一种简便的原位杂交方法。该方法操作简便、易行，在检测多拷贝基因组时具有一定的敏感性，同时兼有组织形态保持较好、背景干净的优点，比较适合于临床病毒病原体的检测。(本文来源于《汕头大学医学院学报》期刊1994年02期）
孟昭鹏[8]（1994）在《原位杂交非同位素法检测肝组织中丙型肝炎病毒RNA基因组》一文中研究指出本文作者介绍了利用原位杂交非同位素快速检测肝组织切片中的丙型肝炎病毒RNA。由10例丙型肝炎病毒抗体和丙型肝炎病毒RNA阳性的患者中,只有3名患者肝细胞中可(本文来源于《传染病信息》期刊1994年02期）
向正华,刘淑琴,孟璘,王代学,钱国桢[9]（1994）在《用非同位素原位杂交组化在光镜和电镜水平观察前阿黑皮素mRNA在垂体的分布》一文中研究指出用地高辛标记反意前阿黑皮素(pro-opiomelanocortin,POMC)cRNA探针原位杂交组化在光镜和电镜水平观察了POMC mRNA在大鼠垂体的分布,并比较了碱性磷酸酶(AKP)显色系统和辣根过氧化酶(HRP)显色系统在光镜水平上的敏感性.结果:POMC mRNA广泛地分布于垂体的中间叶和前叶.中间叶全部细胞均为POMC mRNA阳性.前叶中除前叶的腹侧缘和前叶与中间叶交界处阳性细胞较少外,都有较多的POMC mRNA阳性细胞分布.AKP显色系统比HRP显色系统敏感.在电镜水平,POMC mRNA主要分布于粗面内质网,少数分泌颗粒可能呈阳性反应,胞核未见阳性反应沉淀.文内还就阳性分泌颗粒在调节细胞合成功能方面可能起的作用进行了讨论.(本文来源于《解剖学杂志》期刊1994年02期）
顾桂宝,鞠躬[10]（1989）在《原位杂交细胞化学技术的特异性及非同位素标记途径》一文中研究指出已有不少利用原位杂交细胞化学技术(Hybridocytochemistry)显示机体组织特别是神经系统内特定序列核酸的报道。研究可以在细胞水平,也可以在染色体水平进行。此技术于1969年由Pardue和Gall、John最早建立,最初由于分子克隆技术的限制,只限用于用常规生化手段能够分离、提纯的序列如小鼠卫星DNA、病毒DNA及核糖体RNA,并且同位素是主要的核酸标记物,因当时技术方法落后,敏感性差。因此,在(本文来源于《神经解剖学杂志》期刊1989年01期）
非同位素原位杂交论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文介绍原位杂交(非同位素方法)这一由分子生物学与组织学技术结合而成的新技术在电子显微镜水平的发展历史、目前的研究状况和存在的问题。本文结合作者应用电镜原位杂交技术探测肾脏内胶原mRNA分子的工作,报道了自己对包埋后电镜原位杂交技术的改良所作的探索,并阐述了对这一技术的灵敏度、"嗓音"干扰和分辨率等所存在问题的见解。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
非同位素原位杂交论文参考文献
[1].何建国.喉癌组织HPV16/18DNA非同位素原位杂交半定量研究[D].浙江大学.2002
[2].易静.电子显微镜水平非同位素原位杂交技术的现状与问题[J].电子显微学报.1996
[3].邓辉南,陈清轩,魏庆信,陈永福.转基因猪外源生长激素基因的定位研究——非同位素标记染色体原位杂交技术[J].生物工程学报.1996
[4].王福生,韩凤连,王松山,雷周云,王林杰.应用非同位素原位杂交检测肝组织中丙型肝炎病毒基因的分布[J].中华实验和临床病毒学杂志.1995
[5].向正华.用非同位素原位杂交组化在光镜和电镜水平观察前阿黑皮素mRNA在垂体的分布[J].第二军医大学学报.1994
[6].张晋平,魏铜有,牛香兰,张旭东,王秋荣.非同位素EGF-反义mRNA探针的制备及其与组织切片的原位杂交[J].长治医学院学报.1994
[7].游绍进,许锦阶,沈健.一种简便的非同位素原位杂交方法[J].汕头大学医学院学报.1994
[8].孟昭鹏.原位杂交非同位素法检测肝组织中丙型肝炎病毒RNA基因组[J].传染病信息.1994
[9].向正华,刘淑琴,孟璘,王代学,钱国桢.用非同位素原位杂交组化在光镜和电镜水平观察前阿黑皮素mRNA在垂体的分布[J].解剖学杂志.1994
[10].顾桂宝,鞠躬.原位杂交细胞化学技术的特异性及非同位素标记途径[J].神经解剖学杂志.1989
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