抗肿瘤工程菌Escherichia coliNissle 1917发酵培养基优化及微胶囊制备

抗肿瘤工程菌Escherichia coliNissle 1917发酵培养基优化及微胶囊制备

论文摘要

为了获得高活力抗肿瘤工程菌Escherichia coli Nissle 1917(EcNA)微胶囊制剂,对EcNA进行发酵培养基优化和微胶囊制剂的制备。首先利用单因素试验考察甘油、酵母提取物、蛋白胨及玉米浆对EcNA菌体浓度的影响,在以Box-Behnken设计试验的基础上,分别建立响应面模型和BP人工神经网络结合遗传算法模型优化发酵培养基组分,最后采用挤压法以海藻酸钠和壳聚糖为复合壁材,将EcNA包埋在微胶囊中。结果显示,最佳优化配方为甘油7 g/L,蛋白胨28.75 g/L,酵母提取物86.25 g/L,玉米浆10 g/L,K2HPO416.43g/L,KH2PO4 2.3 g/L,发酵液菌体浓度OD600达到12.92,与未优化相比提高了3.86倍。通过正交试验得到最佳制备条件:海藻酸钠0.035 g/mL,壳聚糖0.004 g/mL,壁芯比2:2,氯化钙0.05 g/mL。结果表明,BP人工神经网络结合遗传算法在培养基优化中具有显著的优越性,制成的EcNA微胶囊有良好的耐酸性和肠溶性。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 菌种来源
  •     1.1.2 培养基 (g/L)
  •     1.1.3 试剂与仪器
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 种子复壮
  •     1.2.2 种子培养
  •     1.2.3 摇瓶发酵
  •     1.2.4 活菌微胶囊的制备
  •     1.2.5 微胶囊形态观察
  •     1.2.6 耐胃酸试验
  •     1.2.7 肠溶性试验
  •     1.2.8 微胶囊存活率的测定
  •     1.2.9 实验设计
  •     1.2.10 微胶囊制剂正交试验
  • 2 结果与分析
  •   2.1 碳源及氮源筛选结果
  •   2.2 玉米浆补加优化
  •   2.3 Box-Behnken 设计结果及回归分析
  •   2.4 BP人工神经网络模型的建立及遗传算法优化结果
  •   2.5 两种模型的对比
  •   2.6 工程菌EcNA活菌微胶囊的制备结果分析
  •     2.6.1 EcNA微胶囊正交试验及方差分析
  •     2.6.2 微胶囊形态观察
  •     2.6.3 胃耐受性试验
  •     2.6.4 肠溶性试验
  • 3 讨 论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 吴柳娟,李躺,莫相涛,胡益波,丁学知,夏立秋

    关键词: 抗肿瘤工程菌,人工神经网络,遗传算法,设计,微胶囊

    来源: 微生物学杂志 2019年03期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,工程科技Ⅰ辑,医药卫生科技

    专业: 有机化工,一般化学工业,药学

    单位: 湖南师范大学生命科学学院

    基金: 国家自然科学基金项目(31770106),国家基础研究计划(973计划)资助项目(2012CB722301),湖南省“生物发育工程及新产品研发协同创新中心”项目(20134486)

    分类号: R943;TQ920.6

    页码: 7-15

    总页数: 9

    文件大小: 1031K

    下载量: 145

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