导读:本文包含了酶谱法论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:蛋白酶,基质,金属,食管癌,原位,转染,食管。
酶谱法论文文献综述
王春萌[1](2019)在《酶谱法研究牙本质粘结中MMP-2和MMP-9在抑制剂作用下的表达》一文中研究指出目的:探讨牙本质在酸蚀-冲洗和自酸蚀两种粘结体系中MMP-2和MMP-9在抑制剂作用下的表达情况,应用酶谱法分析二者在即刻和老化粘结中的活性水平,为临床应用基质金属蛋白酶抑制剂提高粘结效果提供实验性依据。方法:收集20颗成人新鲜离体第叁磨牙,液氮冷却下将其研磨为牙本质粉。模拟口内条件,将牙本质粉进行自酸蚀粘结(Single Bond Universal)和酸蚀-冲洗粘结35%磷酸凝胶+ Adpter Single Bond 2)处理。以不进行任何处理的牙本质粉为阴性对照组;以只进行酸蚀处理的牙本质粉为阳性对照组;以只进行粘结处理的牙本质粉为空白对照组;在粘结过程中使用基质金属蛋白酶抑制剂氯己定(clorhexidine,CHX)和米诺环素(minocyline,MI)预处理作为实验组,将其标记为CHX预处理组和MI预处理组。在以上条件基础上使用10%次氯酸钠进行牙本质老化,并分别标记为空白老化对照组、CHX预处理组和MI预处理老化组。采用明胶酶谱法进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,孵育染色脱色后,用凝胶图像分析系统分析条带,以阴性对照组条带相对灰度值为1,将相对应条带灰度值比值作为评价指标。结果:在酸蚀-冲洗粘结条件下,与空白对照组比较,CHX预处理组和MI预处理组牙本质粉中MMP-2水平降低(P<0.05);与空白老化对照组比较,CHX预处理老化组与MI预处理老化组牙本质粉中MMP-2水平降低(P<0.05),且CHX预处理组与MI预处理组二者表达水平无统计学差异。在自酸蚀粘结条件下,与空白对照组比较,CHX预处理组牙本质粉中MMP-2和MMP-9的表达水平降低(P<0.05),MI预处理组牙本质粉中MMP-2和MMP-9的表达水平降低(P<0.05);与空白老化对照组比较,CHX预处理老化组牙本质粉中MMP-2和MMP-9的表达水平降低(P<0.05),MI预处理老化组牙本质粉中MMP-2和MMP-9的表达水平降低(P<0.05),MI预处理老化组MMP-2表达水平低于CHX预处理老化组(P<0.05)。在酸蚀-冲洗粘结条件下,CHX与MI对于MMP-2的两种形式在即刻粘结条件与老化粘结条件下的抑制作用无统计学差异(P>0.05);在自酸蚀粘结老化条件下,MI对于MMP-2表达水平的抑制作用优于CHX(P<0.05)。结论:1.自酸蚀粘结和酸蚀-冲洗粘结两种粘结方式都会不同程度激活牙本质中MMP-2和MMP-9,从而降低粘结强度。2.在两种粘结方式中,CHX和MI两种基质金属蛋白酶抑制剂能够在即刻粘结和老化粘结条件下抑制MMP-2和MMP-9的活性,达到提高粘结强度和粘结耐久性的目的。(本文来源于《吉林大学》期刊2019-05-01)
李炳蔚,苑晓晨,王冰,秦伟伟,李宏伟[2](2013)在《优化明胶酶谱法检测自发性高血压大鼠血浆MMP-2和MMP-9活性》一文中研究指出目的以优化明胶酶谱法检测自发性高血压大鼠(SHR)血浆基质金属蛋白酶-2(MMP-2)与-9(MMP-9)的活性。方法以含明胶的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳酶谱法为基础,改变孵育时间、工作液成份,采用不同pH值的孵育液及不同冻融次数的样品,观察对基质金属蛋白酶(MMPs)活性的影响。并以优化的酶谱法检测Wistar及自发性高血压大鼠血浆MMPs的相对活性。结果凝胶孵育时间由42 h缩短为17 h不影响酶谱法检测结果。省略漂洗步骤及洗脱液仅使用2.5%Triton X-100、孵育液中去除NaN3及NaCl且电泳后步骤将去离子水更换为蒸馏水也不影响实验结果。孵育液pH值在7.2~8.8范围内均可用于酶谱法。血浆样品反复冻融多达6次不影响酶谱法检测结果。用优化的酶谱法检测结果显示,与Wistar大鼠相比,SHR大鼠血浆MMP-2与MMP-9活性显着增高。结论优化酶谱法与常规方法相比更为简便经济,检测大鼠血浆MMP-2与MMP-9活性所得结果一致。(本文来源于《基础医学与临床》期刊2013年07期)
金曙光,Shin,JUNG,石清泉,沈浩员[3](2012)在《原位明胶酶谱法检测胶质瘤18例基质金属蛋白酶活性》一文中研究指出胶质瘤是常见脑肿瘤之一,具有肿瘤早期就能侵袭周边正常脑组织的特性,尤其是胶质母细胞瘤,恶性度高。基质金属蛋白酶(MMPs)是一组锌依赖性内肽酶,与肿瘤细胞侵袭、转移相关的细胞外基质(ECM)降解过程密切相关[1],目前已知有26种,其中对MMP-2和MMP-9的(本文来源于《中国乡村医药》期刊2012年05期)
金曙光,石清泉,王良,洪雷[4](2011)在《原位明胶酶谱法评估胶质瘤基质金属蛋白酶活性》一文中研究指出目的应用原位明胶酶谱法了解胶质母细胞瘤和少枝胶质细胞瘤有无表达基质金属蛋白酶的活性、具体表达部位以及与恶性度的关系方法术中获取胶质瘤组织,每块组织均含有肿瘤以及相延续的正常脑组织部分,根据术后病理分为胶质母细胞瘤组与少枝胶质细胞瘤组。原位明胶酶谱法判定组织有无基质金属蛋白酶活性,把MMPs活性部位分为:(1)肿瘤中心;(2)交界部;(3)阴性。结果胶质母细胞瘤组基质金属蛋白酶活性表达率为77%,少枝胶质细胞瘤组中只有一例由少枝胶质细胞瘤恶变为间变少枝胶质细胞瘤的样品表达交界部形式的基质金属蛋白酶活性。而正常脑组织未表达有基质金属蛋白酶活性。结论恶性度高的胶质母细胞瘤基质金属蛋白酶活性的表达率高,以交界部形式多见。初步判断基质金属蛋白酶由肿瘤细胞分泌,利用基质金属蛋白酶抑制剂来治疗胶质瘤或许也是可行的方法之一。(本文来源于《2011年浙江省神经外科学学术年会论文汇编》期刊2011-09-16)
韩溟,黄铿,崔华中,蔡新琦[5](2011)在《样品保存方式对酶谱法检测食管癌组织MMP-9和MMP-2活性的影响》一文中研究指出目的研究样品保存方式及上样量对酶谱法检测食管癌组织MMP-9(matrixmetal loproteinase-9)和MMP-2(ma-trixmetalloproteinase-2)活性的影响。方法采用酶谱法(zymography)检测食管癌组织中MMP-9和MMP-2蛋白的活性。结果酶谱法检测食管癌组织MMP-9和MMP-2活性适宜的蛋白上样量是10μg。统计学分析表明样品的反复冻融和-20℃长期保存并没有引起MMP-9和MMP-2活性的明显降低(P0.05)。结论酶谱法检测食管癌组织MMP-9和MMP-2的活性所需组织标本用量少,并且不受保存方式的影响,可广泛应用于食管癌活检组织检测和回顾性调查研究。(本文来源于《第17届世界灾难及急救医学学术会议暨第14次全国急诊医学学术年会论文汇编》期刊2011-05-31)
王晓丹,时晓明,曲显俊,程艳娜,史桂云[6](2010)在《酶谱法测定肝星状细胞合成的明胶酶活性》一文中研究指出目的建立检测肝星状细胞(HSC)合成的明胶酶(MMP-2,MMP-9)活性的方法。方法用含SDS-明胶的聚丙烯酰胺凝胶电泳为基础的酶谱法,检测体外培养的HSC所合成的明胶酶活性。结果酶谱法能灵敏地检测到HSC分泌到培养基中的MMP-2和MMP-9,培养基中MMP-2活性高于MMP-9,并观察到药物作用以后酶活性的改变。结论酶谱法是研究HSC调节肝纤维化过程中细胞外基质(ECM)代谢的有效手段。(本文来源于《泰山医学院学报》期刊2010年07期)
韩溟,黄铿,崔华中,蔡新琦[7](2008)在《样品保存方式对酶谱法检测食管癌组织MMP-9和MMP-2活性的影响》一文中研究指出目的研究样品保存方式及上样量对酶谱法检测食管癌组织MMP-9(matrix metalloproteinase-9)和MMP-2(ma-trix metalloproteinase-2)活性的影响。方法采用酶谱法(zymography)检测食管癌组织中MMP-9和MMP-2蛋白的活性。结果酶谱法检测食管癌组织MMP-9和MMP-2活性适宜的蛋白上样量是10μg。统计学分析表明,样品的反复冻融和-20℃长期保存并没有引起MMP-9和MMP-2活性的明显降低(P>0.05)。结论酶谱法检测食管癌组织MMP-9和MMP-2的活性所需组织标本用量少,并且不受保存方式的影响,可广泛应用于食管癌活检组织检测和回顾性调查研究。(本文来源于《现代检验医学杂志》期刊2008年04期)
陈倩,沈丽,何琦麟,陶艳艳,刘成海[8](2008)在《荧光原位明胶酶谱法对肝组织明胶酶活性的检测》一文中研究指出目的:建立荧光原位明胶酶谱法,观察纤维化和急性损伤肝组织明胶酶活性表达特点.方法:复制二甲基亚硝胺大鼠肝纤维化模型与N-乙酰半乳糖胺/脂多糖急性肝损伤模型,取其肝组织冰冻切片,将绿色荧光明胶底物附着于肝组织冰冻切片上,置于酶反应缓冲液中避光孵育8-24h;再以Hoechst液复染细胞核,在荧光显微镜下分别以蓝光激发拍摄明胶酶绿色荧光和紫光激发拍摄细胞核蓝色荧光,并将图像重迭.结果:成功建立荧光原位明胶酶谱法.正常大鼠肝组织仅在肝窦周围少量明胶酶表达,纤维化及急性肝损伤肝组织肝窦处明胶酶活性增强,纤维化肝组织纤维间隔处明胶酶活性也较强.结论:荧光原位明胶酶谱法具有灵敏,直观,简便的优点,可较好分析肝组织明胶酶活性水平与表达位置,对研究肝脏病理与药理具有重要意义.(本文来源于《世界华人消化杂志》期刊2008年15期)
骆建民,王俐[9](2007)在《不同种属来源明胶及其他因素对明胶酶谱法检测金属蛋白酶的影响》一文中研究指出金属蛋白酶-2(MMP-2,明胶酶 A)与金属蛋白酶-9(MMP-9,明胶酶 B)在多种生理过程中起作用,病理状态下如肿瘤、心血管疾病和呼吸系统疾病,则这些酶的表达和活性增加。明胶酶谱法多用于检测血浆、细胞培养上清及组织中的金属蛋白酶-2和9的活性,我们先前的实验发现不同来源的明胶直接影响明胶酶谱法结果,不同方式处理样本对酶的活性检测有影响,本研究就明胶的来源(自猪、牛皮肤提取)是否影响金属蛋白酶活性的检测,以及不同样本量、样本储存温度、反复冻融等因素对明胶酶谱法检测金属蛋白酶活性的影响进行探讨。(本文来源于《中华检验医学杂志》期刊2007年12期)
钟理,何国祥,李德,冉擘力,景涛[10](2004)在《逆向酶谱法检测TIMP-4抑制MMPs酶解活性》一文中研究指出目的用逆向酶谱法来检测TIMPs的活性,国内尚无报道。本实验利用逆向酶谱法检测了重组腺病毒载体Ad.TIMP-4转染大鼠VSMC后,过表达的TIMP-4抑制MMPs的酶解活性。方法构建重组腺病毒载体Ad.TIMP-4,转染至原代培养的大鼠VSMC。在分离胶中提前加入一定量的明胶,灌制积层胶和分离胶,将转染0.5d、1d、2d、4d、6d后浓缩的细胞培养液上样,电泳后置于TritonX-100溶液中,再置于100ml的含标准品MMP-2的酶孵育缓冲液中孵育,用考马斯亮兰R-250染色4h后,脱色,直到背景透明清晰为止。结果逆向酶谱法检测Ad.TIMP-4转染组可见一阳性条带,未转染组和Ad.LacZ转染组均未见阳性条带。结论用酶谱法可间接检测TIMPs的抑制活性,在酶谱法的基础上,人们又发展了可直接反应TIMPs抑制活性的逆向酶谱法。本实验采用逆向酶谱法证实了VSMC转染Ad.TIMP-4后分泌的TIMP-4具有抑制MMPs的生物学活性。我们在摸索、优化实验方法的过程总结了一些自己的经验。(本文来源于《中华医学会心血管病分会第八次全国心血管病学术会议汇编》期刊2004-06-30)
酶谱法论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
目的以优化明胶酶谱法检测自发性高血压大鼠(SHR)血浆基质金属蛋白酶-2(MMP-2)与-9(MMP-9)的活性。方法以含明胶的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳酶谱法为基础,改变孵育时间、工作液成份,采用不同pH值的孵育液及不同冻融次数的样品,观察对基质金属蛋白酶(MMPs)活性的影响。并以优化的酶谱法检测Wistar及自发性高血压大鼠血浆MMPs的相对活性。结果凝胶孵育时间由42 h缩短为17 h不影响酶谱法检测结果。省略漂洗步骤及洗脱液仅使用2.5%Triton X-100、孵育液中去除NaN3及NaCl且电泳后步骤将去离子水更换为蒸馏水也不影响实验结果。孵育液pH值在7.2~8.8范围内均可用于酶谱法。血浆样品反复冻融多达6次不影响酶谱法检测结果。用优化的酶谱法检测结果显示,与Wistar大鼠相比,SHR大鼠血浆MMP-2与MMP-9活性显着增高。结论优化酶谱法与常规方法相比更为简便经济,检测大鼠血浆MMP-2与MMP-9活性所得结果一致。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
酶谱法论文参考文献
[1].王春萌.酶谱法研究牙本质粘结中MMP-2和MMP-9在抑制剂作用下的表达[D].吉林大学.2019
[2].李炳蔚,苑晓晨,王冰,秦伟伟,李宏伟.优化明胶酶谱法检测自发性高血压大鼠血浆MMP-2和MMP-9活性[J].基础医学与临床.2013
[3].金曙光,Shin,JUNG,石清泉,沈浩员.原位明胶酶谱法检测胶质瘤18例基质金属蛋白酶活性[J].中国乡村医药.2012
[4].金曙光,石清泉,王良,洪雷.原位明胶酶谱法评估胶质瘤基质金属蛋白酶活性[C].2011年浙江省神经外科学学术年会论文汇编.2011
[5].韩溟,黄铿,崔华中,蔡新琦.样品保存方式对酶谱法检测食管癌组织MMP-9和MMP-2活性的影响[C].第17届世界灾难及急救医学学术会议暨第14次全国急诊医学学术年会论文汇编.2011
[6].王晓丹,时晓明,曲显俊,程艳娜,史桂云.酶谱法测定肝星状细胞合成的明胶酶活性[J].泰山医学院学报.2010
[7].韩溟,黄铿,崔华中,蔡新琦.样品保存方式对酶谱法检测食管癌组织MMP-9和MMP-2活性的影响[J].现代检验医学杂志.2008
[8].陈倩,沈丽,何琦麟,陶艳艳,刘成海.荧光原位明胶酶谱法对肝组织明胶酶活性的检测[J].世界华人消化杂志.2008
[9].骆建民,王俐.不同种属来源明胶及其他因素对明胶酶谱法检测金属蛋白酶的影响[J].中华检验医学杂志.2007
[10].钟理,何国祥,李德,冉擘力,景涛.逆向酶谱法检测TIMP-4抑制MMPs酶解活性[C].中华医学会心血管病分会第八次全国心血管病学术会议汇编.2004