鸭源H7N9亚型流感病毒HA蛋白的真核表达及其免疫保护效力分析

论文摘要

为进行鸭源H7N9亚型流感病毒HA蛋白表达纯化及其免疫保护效力分析,本研究以鸭源流感病毒A/Duck/Fujian/S4170/2014 （H7N9）HA基因为模板,PCR扩增后将HA片段克隆至昆虫细胞表达载体p Fast Bac1中。将构建的重组质粒p FBacH7HA转化DH10Bac感受态细胞,提取PCR鉴定为阳性的重组杆粒Bacmid-H7HA,转染SF9昆虫细胞。结果显示重组Bacmid-H7HA表达HA蛋白,并装配成重组杆状病毒,将该病毒感染High Five细胞,大量表达H7-HA蛋白。免疫荧光试验、SDS-PAGE及western blot分析结果表明H7-HA蛋白正确表达且纯度达90%以上,血凝试验表明表达蛋白具有良好的生物活性。利用纯化的H7-HA蛋白免疫SPF鸡后进行攻毒保护试验,评价该蛋白作为免疫原对SPF鸡的免疫保护效力,结果显示HA蛋白免疫组鸡只得到100%保护。以上结果表明本研究表达纯化的H7-HA蛋白可以作为防控H7亚型禽流感的候选亚单位疫苗。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 周陈陈,梁立滨,赵青青,黄山雨,李奇兵,王广文,李俊平,赵玉辉,曾显营,施建忠,李呈军,陈化兰,姜丽

关键词: 蛋白,杆状病毒表达,免疫保护

来源: 中国预防兽医学报 2019年01期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

基金: 国家自然科学基金(31672582,31521005)

分类号: S852.65

页码: 58-62

总页数: 5

文件大小: 348K

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标签：蛋白论文;  杆状病毒表达论文;  免疫保护论文;