基于CRISPR/Cas9系统构建大鼠Kcnk2敲除载体的研究

基于CRISPR/Cas9系统构建大鼠Kcnk2敲除载体的研究

论文摘要

指出了Kcnk2在多种疾病的发生机制中有着重要的地位,为了研究Kcnk2在相关疾病中的作用,利用所属CRISPR/Cas9系统的pL-CRISPR.EFS.GFP质粒,使用CRISPR设计工具设计敲除靶点,通过质粒酶切、引物退火、连接重组质粒,成功构建了Kcnk2的敲除载体,并通过DNA测序确定了插入序列。

论文目录

  • 1 引言
  • 2 实验部分
  •   2.1 实验材料
  •   2.2 实验方法
  •     2.2.1 质粒提取
  •     2.2.2 基因敲除靶点及寡核苷酸设计
  •     2.2.3 酶切与回收
  •     2.2.4 退火
  •     2.2.5 连接
  •     2.2.6 Stbl3感受态细胞制备 (Inoue 法)
  •     2.2.7 转化
  •     2.2.8 重组克隆的鉴定与测序
  • 3 结果与分析
  •   3.1 质粒提取和质粒酶切的结果
  •   3.2 重组质粒的测序结果
  • 4 结论与展望
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 艾慧婷,刘欣煜,雷维琼,陈恒玲

    关键词: 基因编辑

    来源: 绿色科技 2019年08期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学

    单位: 中南民族大学生物医学工程学院医学信息分析及肿瘤诊疗湖北省重点实验室,武汉市第四中学

    分类号: Q78

    DOI: 10.16663/j.cnki.lskj.2019.08.085

    页码: 237-239+246

    总页数: 4

    文件大小: 586K

    下载量: 163

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