几种蔷薇科观赏植物试管苗工厂化生产技术及相关研究

几种蔷薇科观赏植物试管苗工厂化生产技术及相关研究

李毅丹[1]2004年在《几种蔷薇科观赏植物试管苗工厂化生产技术及相关研究》文中提出本研究采用植物组织培养技术,对几种蔷薇科观赏植物种苗的工厂化生产技术及其中的有关问题进行了探索。还涉及了规模化生产林木试管苗过程中的两个问题即:外植体的幼嫩程度和采集季节对建立培养系的影响;充气培养对几种蔷薇科植物生长过程中出现的玻璃化、生根率低等现象的影响。 在探索规模化生产几个蔷薇科植物试管苗的过程中,主要采用了腋芽(侧芽)诱导法建立了培养系,解决了试管苗初代培养系的建立,继代和生根培养基的优化及生产过程的玻璃化、弱化、低生根率等问题。在继代周期、继代时间和移栽等方面也做了系统试验。提出了通过腋芽诱导规模化生产试管苗的一般性可行性程序。实验中发现,几个品种在继代生长过程中存在差异,体现出了自身的遗传特异性;同时在不定芽产量高这一共性方面也体现出了同科植物之间的相似性。在试验的基础上,确定了几个供试品种的各种培养基的最佳激素配比范围,为其他蔷薇科品种试管苗的规模化生产提供了依据。移栽实验的结果表明:几个品种的移栽都比较容易,在珍珠岩:草炭土为1:1的基质上正常温室条件下,移栽成活率均可达到90%左右。 由于大部分林木本身的特性,其外植体的采集季节和幼嫩程度都能影响组培系的建立。通过对两种金老梅(大花金老梅 Potentilla fruticosa “Katherine Dykes”和红花金老梅 Potentilla fruticosa “Red Robin”)、红叶李(Prunus ceracifera “Nigra”)和红海棠(Malus speclabilis “Hopa”)等四种材料,进行不同部位的外植体取材比较,结果表明,半木质化的外植体材料更适合于生产。 针对几种供试材料在继代培养过程中均有不同程度玻璃化现象这一问题,进行了培养基调整及通气培养等实验。结果证明,适当调整培养基中的激素种类,降低激素用量,增加蔗糖和琼脂含量及通气培养等方法均具有一定的效果。根据试验分析,进一步确认了玻璃化现象的主要原因是,培养瓶内的生长环境恶化、通气状况不良。实验结果也表明:通气培养可使试管苗玻璃化现象明显下降,生长健壮、污染率降低、生根率增高。经投入产出比分析,通气培养对于试管苗的工业化生产完全可行。

荣冬青[2]2008年在《野生早樱组织培养及扦插繁殖技术研究》文中提出野生早樱(Cerasus subhirtella var. ascendens)隶属蔷薇科(Rosaceae)樱属(Cerasus),为高大落叶乔木,花淡粉红色,具有观赏价值高、适应性强、抗性强的优点,是极具开发价值的野生樱属资源。本论文开展了野生早樱组织培养和扦插繁殖技术研究,以期摸索出提高野生早樱繁殖数量和质量的有效途径,为苗木产业化生产、优良种质保存提供理论和技术支撑。采用嫩枝扦插法,研究了不同生长调节物质、不同扦插基质等对嫩枝插穗生根的促进效应。研究结果如下:以NAA1000mg/L+IBA500mg/L+BA100mg/L等比例组合处理插穗基部1/2h,扦插于蛭石上,平均生根率最高为78.2%,平均根数为7.5条,平均根长为5.6cm,综合以上技术组合,野生早樱嫩枝扦插生根率可达78.2%,移栽成活率达50%,本研究成果进一步完善了野生早樱扦插繁殖技术体系,在生产中具有较高的实用价值。采用组培技术手段,探讨了从无菌体系的建立、启动培养、增殖培养、壮苗培养到试管苗生根移栽的整个过程,主要结论如下:1以带腋芽茎段为外植体,最佳消毒方式为:70%酒精浸泡30s,2.5%NaClO消毒15min,0.1%HgCl2消毒6min,污染率和死亡率最低,分别为16.5%和10.4%。最佳的取材时间为4月中旬。2启动培养采用L934正交试验设计,培养基类型对启动培养影响最大,其次是BA,NAA的影响作用最小,最佳启动培养基为:MS+BA1.2mg/L+NAA0.3mg/L,启动率高达84.5%。3增殖培养阶段的最佳培养基为MS+BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+35g/L蔗糖,增殖系数为4.5。适宜浓度(1mg/L)多效唑具有促进增殖和抑制增高的效应。为了保持一定的增殖系数,继代次数以6次为宜。4壮苗培养采用L934正交试验设计,大量元素对壮苗培养的影响最大,其次为NAA,BA的影响作用最小,最佳壮苗培养基为:3/4MS+BA0.2mg/L+NAA 0.01mg/L,大量元素适当降低及低水平的细胞分裂素和生长素配比,有利于壮苗培养。5生根培养阶段,最适培养基为:1/2MS+NAA0.1mg/L+IBA1.0mg/L,生根率达92.5%,根条数达8条,根长6.3cm。黑暗处理14d,有利于试管苗生根。6选择健壮的组培苗,先闭瓶炼苗3d,然后开瓶炼苗5d,移栽到蛭石+河沙(1:1)基质中,移栽成活率高达90%。试验中各项指标已达到快速繁育苗木的要求,其技术措施可以满足苗木组培生产的需要。

孙艳妮[3]2010年在《茉莉离体快繁体系的建立》文中指出茉莉[Jasminum sambac (L.) Aiton]是木樨科茉莉属常绿小灌木,原产波斯湾一带,是我国香料工业的主要原料之一,主要用来窨制茶叶、提取精油等。其花色洁白,香气宜人,近年来被广泛应用于家庭摆设和庭园观赏,深受国人喜欢。茉莉作为一种具有极高的观赏和经济价值的花卉,其生产、开发和综合利用前景广阔。本文以茉莉萌动腋芽为外植体,研究了基本培养基、生长素、细胞分裂素等因素对其试管苗启动、增殖、生根等的影响,初步建立了茉莉的离体快繁体系。主要结果如下:启动培养:研究了不同灭菌时间、培养基种类(MS、M1、WPM)、不同细胞分裂素(TDZ、6-BA、KT)与生长素(NAA、IBA)组合以及不同光温条件对茉莉腋芽启动培养的影响。结果表明:0.1%升汞处理8 min灭菌效果最好。WPM+6-BA2.0mg/L+IBA 0.1 mg/L是最佳的启动培养基,诱导率为96.75%、平均芽数为1.97、平均芽长为3.80 cm、增殖系数为2.79。最适合培养条件为温度35℃,光照强度6000 lx。试验也发现枝条基部外植体诱导获得的试管苗生长状况最好,5-9月份均适宜取材。增殖培养:研究了不同基本培养基、碳源、温度及不同生长素、细胞分裂素、GA3浓度对茉莉试管苗增殖培养的影响。结果表明:WPM+3%蔗糖为最佳基本培养基。35℃下6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L组合对试管苗的增殖效果最好,增殖系数为5.31,平均芽数为1.32、平均芽长为4.87 cm,生长量为6.43 cm。GA3和CH对试管苗的增殖培养有抑制作用。0.2 mmol/L铁盐和镁盐可以提高试管苗叶绿素含量,降低试管苗黄化现象。生根培养:以茉莉继代试管苗为试材,研究了不同培养基(MS、1/2MS、WPM和1/2WPM)、不同生长素(IBA和NAA)、生根方式(一步生根和两步生根)、不同继代次数(1-6次继代培养)以及培养基支持物(琼脂、珍珠岩、石英砂和蛭石)对茉莉生根的影响。结果表明:最佳生根培养基为1/2WPM,最佳生根培养方式为1/2WPM+NAA 1.0 mg/L处理7d后转入空白培养基进行两步法生根,生根率为98.41%;经1-4次继代的试管苗生根效果好于5或6次继代的试管苗;以蛭石为培养基支持物诱导生根效果最好,生根率达到100%,移栽成活率97.14%,根系活力、POD和SOD活性也均高于其他培养基支持物。

朱志国[4]2006年在《金叶日本冬青组织培养研究》文中研究表明金叶日本冬青(Ilex crenata)是优良的园林绿化彩叶树种,是普通冬青的园艺变种。金叶日本冬青目前主要通过扦插进行繁殖,但扦插生根困难,繁殖系数低,难以满足生产和应用需要。为了建立金叶日本冬青的高效繁育体系,本文以新梢茎段为外植体,研究了各种因素对其离体培养的影响,研究结果如下:1、采用不同基本培养基及外源激素配比进行组织培养,研究其对茎段愈伤组织诱导和分化的影响。结果表明:外植体最好选取新梢中上部刚萌发的顶芽;用75%乙醇处理40秒、0.1%升汞消毒3min时愈伤组织诱导率、分化率均较高;MS+KT1.0mg·L~(-1)+NAA0.2mg·L~(-1)培养基加入30克蔗糖时愈伤组织诱导率最高。2、利用不同的激素组合、琼脂用量、PH值及光照条件在MS培养基中对金叶日本冬青进行继代增殖培养。结果表明:MS+6-BA 1.0mg·L~(-1)+NAA 0.5mg·L~(-1)+0.2%琼脂,在pH6.0,自然光1500lx条件下增殖效果和生长状况较好。3、将继代增殖后的无根苗转入到生根培养基上,通过观察、记载发根量、根系粗度、根系长度等,分析不同种类及浓度的生长素、不同E物质浓度、不同基本培养基对金叶日本冬青生根的影响。结果表明:1/2MS+NAA0.3mg·L~(-1)对金叶日本冬青不定根诱导效果较好;同时添加0.1%活性炭对金叶日本冬青生根促进作用不明显。4、以金叶日本冬青组培苗为试材,对不同基质配比、不同炼苗处理对幼苗的影响及不同栽培基质对金叶日本冬青组培苗生长状况进行了研究。结果表明:金叶日本冬青炼苗基质以草炭:砻糠灰:珍珠岩比例为5:1:4最佳;在生产中常用的栽培基质蛭石+珍珠岩、泥炭土+珍珠岩上植株成活率较高;以河沙作为栽培基质具有成本低的优点,但其栽培成活率、株高指标与最佳处理的差异显着。

白伟琴[5]2011年在《波叶红果树(Stranvaesia davidiana var. undulata)离体培养再生体系建立及试管开花研究》文中研究表明本文利用无菌播种方式获得无菌苗,取其带腋芽茎段为外植体,对波叶红果树(Stranvaesia davidiana var. undulata)进行离体培养与试管开花研究。在增殖培养、生根培养、花芽诱导阶段,研究植物激素、碳源、基本培养基、活性炭等因素对其影响,筛选出各阶段最佳培养基,建立波叶红果树离体培养再生体系,探索花芽诱导机制。此外,对波叶红果树的园林应用进行了探讨。本研究对野生木本植物资源的高效繁育提供理论和试验依据。主要研究结果如下:1离体培养再生体系的建立。用0.1 %HgCl2对成熟种胚进行消毒处理,时间为15 min,成活率达90 %。选取6-BA在0.5~2.0 mg·L~(-1)范围内有利于不定芽的产生,以1.0 mg·L~(-1)增殖效果最佳,增殖系数达3.94。TDZ在0.05~0.20 mg·L~(-1)范围内有利于不定芽的产生,0.20 mg·L~(-1)最适,增殖系数可高达6.68,但植株生长状况相对6-BA较差。蔗糖为最佳增殖碳源,浓度30 g·L~(-1)为宜。生根培养基以1/2MS + 0.10 mg·L~(-1)NAA、1/2MS + 0.20 mg·L~(-1)IAA为佳,生根率分别为88.33 %、86.67 %,平均生根数分别为10.28条、7.81条,平均根长分别为0.32 cm、0.83 cm,MS + 0.20 mg·L~(-1)NAA、1/2MS + 0.10 mg·L~(-1)IAA可作备选。培养基中添加活性炭对波叶红果树平均根长有促进作用。移栽前试管苗需开瓶炼苗,时间以10 d最佳,移栽基质以珍珠岩︰蛭石︰泥炭(1︰1︰1)成活率最高,为90 %。2花芽诱导机制的探索。波叶红果树自然状态下播种3年后可正常开花,而经过无菌播种在试管内生长3个月或无菌材料经激素诱导处理1个月后可形成花芽。不同细胞分裂素种类及浓度对诱导成花具有重要作用,浓度过高或过低都不利于花芽的形成,其中以6-BA 1.0 mg·L~(-1)、TDZ 2.0 mg·L~(-1)效果最佳,花芽诱导率分别为10.0 %、5.0 %,而细胞分裂素与生长素共同使用则不利于花芽的形成。碳源种类对花芽诱导起着重要作用,蔗糖为最佳碳源,30 g·L~(-1)蔗糖浓度较其他浓度利于花芽的形成,花芽诱导率为10.0 %。此外,不同氮磷比对花芽诱导无明显作用。3园林应用的探讨。波叶红果树集观叶、观花、观果于一身,极具园林观赏价值。在园林中可开发用作地被植物;彩叶植物;绿篱、花篱、果篱;造型植物等。

张秀丽[6]2007年在《欧李组织培养体系试验研究》文中研究表明本试验研究目的在于探索欧李(Prunus humilis(Bge).Sok)离体快繁的有效途径,采用其带腋芽的茎段来诱导愈伤组织,通过愈伤组织分化来增殖;同时以茎尖为外植体直接诱导不定芽,继而进行增殖培养。试验以单因素和复因素设计为主,对结果作方差分析及多重比较,确定了欧李组织培养的一系列技术参数组合,为其工厂化生产提供了一定的理论基础和技术支持,研究结果表明:1.欧李离体培养适宜的外植体为新枝的中部带腋芽的茎段,其污染率低、分化出芽较快。2.欧李采样的最佳时期为4月中旬,其萌芽率高,污染率低,无菌苗生长快:同时不同消毒时间对欧李初代培养有一定的影响,消毒时间8分钟的处理无论在污染率、死亡率、萌芽率上都好于其它两个处理,萌芽率可以达到93.3%。3.欧李诱导愈伤的适宜激素组合为NAA和BA,培养基组成:1/2MS+BA2.5mg/L+NAA0.8 mg/L,其愈伤块绿色,组织致密,量多。4.诱导欧李茎尖分化的适宜培养基为MS+BA0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L,其茎粗,分化好,叶片生长正常,植株较健壮,大部分植株一次性成苗。5.MS培养基是继代增殖培养的最适培养基。6.欧李增殖生长阶段适宜的生长素和细胞分裂素为NAA和BA,两者的浓度配比为NAA0.06 mg/L+BA1.0 mg/L。此外,针对欧李组培苗生长缓慢,为了保持一定的增殖系数,继代周期以45 d为宜。7.欧李对pH的适应范围很广,在pH5.8~6.2的环境中都能生长,但在pH5.8时,增殖系数和平均茎伸长量都达到最大值。8.欧李组织培养增殖生长需要NH_4~+和NO_3~-的配合使用。在MS培养基基础上,维持较高浓度的NO_3~-能促进欧李组织培养的增殖生长,且NH_4~+/NO_3~-比例为1/2时增殖效果最好。9.优级白砂糖作为碳源对欧李增殖生长的效果与分析纯蔗糖相比没有明显差异,从而可以大大降低组培成本。10.针对欧李试管苗生根慢,接种的无菌苗高度一般在2 cm左右,带2片叶片,长势好的材料生根效果好些;生长素IBA比较适合诱导欧李试管苗生根,同时,1/2MS+IBA0.05 mg/L的处理,根的长度适中,侧根多,根的粗度适中并且有较高的生根率,比较适合生根培养。11.欧李炼苗天数以7~10 d为宜,初期移栽基质的选择,以通透性强的基质为适合基质,全蛭石的基质为最适合的移栽基质。

陈莉[7]2006年在《牡丹组织培养技术的初步研究》文中研究表明本文以牡丹不同品种的鳞芽和带有腋芽的茎段为外植体,探讨了不同的消毒方式及消毒时间对外植体消毒的影响;研究不同的基本培养基、不同的植物生长调剂物质、不同的附加物质和不同的环境因子在腋芽的诱导、增殖以及壮苗生长过程中的作用,分析了不同培养过程中主要影响因子及其有效浓度使用范围;同时以健壮的无菌试管苗为材料,探讨了愈伤组织诱导和增殖过程中主要的影响因子及其有效的浓度范围;同时又以花药为外植体,探讨了愈伤组织诱导过程中主要的影响因子及其有效的浓度范围。实验结果如下: 1、在外植体的消毒试验中,以0.1%HgCl_2为消毒剂进行消毒处理,结果表明:牡丹鳞芽适合的消毒方式为二次消毒,适合的时间为6min/6min,带有腋芽的茎段消毒时间较鳞芽短,时间以6min为宜。 2、以‘乌龙捧盛’、‘洛阳红’、‘鲁荷红’、‘肉芙蓉’和‘赵粉’5个牡丹品种的鳞芽为外植体进行诱导培养,结果表明:品种以‘乌龙捧盛’和‘鲁荷红’表现较好,采集时间以1~2月份为宜,其诱导率分别为88%和82%。 3、以‘乌龙捧盛’和‘鲁荷红’为材料进行增殖培养,结果表明:2品种的无菌试管苗在增殖过程中,适宜的基本培养基为改良MS,适宜的细胞分裂素为TDZ,浓度以0.1mg·L~(-1)时效果较好;继代3次时2个品种无菌试管苗增殖系数最高,分别为5.2和5.3;光质比例可调节的LED光源对牡丹无菌试管苗的增殖和生长状况均无明显的促进作用;普通荧光灯,当光照强度为30001x时,能明显的促进试管苗的生长,出现黄化现象的叶片较少,叶片颜色较低光强下深,植株较低光强下高、健壮;CO_2施肥和不同浓度的蔗糖对牡丹无菌试管苗的增殖无促进作用,但当CO_2为3000ppm、蔗糖浓度为20g·L~(-1)时,试管苗的生长状况良好,新出叶片颜色浓绿,植株较高,只有外围叶片出现黄化。 4、以‘乌龙捧盛’和‘鲁荷红’为材料进行壮苗培养,试验结果表明:水解乳蛋白、酪蛋白和亚精胺对这2个品种无菌试管苗的生长无明显的促进作用,而PP333能够有效的减少无菌试管苗生长过程中黄叶的出现,浓度以1.0mg·L~(-1)效果较好,但植株较矮,植株呈现深绿色。 5、以‘乌龙捧盛’的无菌试管苗为材料进行愈伤组织诱导,试验结果表明:薄细胞层的厚度对愈伤组织诱导影响最大,最佳培养基为:MS+6-BA3.0mg·L~(-1)+NAA0.05mg·L~(-1)+TDZ0.05mg·L~(-1)+2,4-D5.0mg·L~(-1)AgNO_30.2mg·L~(-1),片层厚度为0.5~0.8mm效果最佳。 6、在愈伤组织的继代培养中,试验结果表明:活性炭能有效的抑止褐化现象的产生,用量为0.1%效果较好,蔗糖和多胺对愈伤组织的生长没有明显的促进作用,随着蔗糖和多胺浓度的增加,愈伤组织出现自然死亡现象。 7、以‘洛阳红’的花药为外植体进行愈伤组织诱导,试验结果表明:花药诱导愈伤组织诱导的最佳培养基为:MS+6-BA0.5mg·L~(-1)+NAA3.0mg·L~(-1)+2,4-D1.0mg·L~(-1)+TDZ0.05mg·L~(-1),消毒时间以3min为宜。

王强[8]2007年在《Tulameen树莓工厂化高效育苗技术研究》文中认为树莓为蔷薇科(Rosaceae)悬钩子属(Rubus)植物,果实为聚合浆果,营养成分丰富,富含人体可吸收的植物SOD(超氧化物歧化酶)、天然抗致癌物质(鞣化酸)、天然阿斯匹林(水杨酸)及大量天然减肥物质(覆盆子酮),被称为“第叁代水果”。本试验是以Tulameen(又称托拉米、图拉名)红树莓为试材,通过组培快繁研究技术,建立Tulameen树莓的再生体系,探索出一套成本低、效率高的工厂化育苗技术,实现大规模快速提供优质树莓苗木的目的。主要结果如下:(1)诱导培养基以MS+6-BA1.0 mg/l +NAA0.1 mg/l培养基为最好。(2)增殖培养基以MS+6-BA0.5mg/l+NAA0.1mg/l配方为最好。(3)壮苗培养基以MS+IAA0.1mg/l +GA30.5mg/l培养基配方为合适的配方。(4)生根培养基以1/2MS+IBA0.4mg/l+NAA0.4mg/l培养基配方为最佳。(5)育苗容器由叁角瓶换成果酱瓶后,苗木生长仍然健壮良好,而生产成本大大降低。(6)将培养基配制过程中的琼脂粉用新型材料冷凝脂替代,对苗木生长的影响差异不显着,因冷凝脂使用时不需加热,节省了时间和能源消耗,降低了生产成本。(7)将培养基配制过程中的蔗糖改用绵白糖替代,因绵白糖价格相对便宜,大大降低了生产成本。(8)瓶苗移栽时,首先要经过7天的炼苗期,随后转入平均温度20℃,平均湿度70-80%的温室中移栽,以蛭石加草炭土移栽成活率最高。

何斌琼[9]2009年在《转反义NR基因四倍体金鱼草(Antirrhinum majus)的培育》文中研究指明植物体内乙烯生理作用的发挥是通过乙烯生物合成途径及乙烯信号转导途径来实现的。NR基因是与ETR1基因同源的乙烯受体蛋白基因,它对乙烯的接收和信号的转导直接影响着植株的生理利生长,影响着植物的抗逆性。NR基因不仅调控果实的成熟,而且还与植株的其他生理代谢,生长发育有密切的关系。通过转反义NR基因植株的获得,可以研究NR基因与植株的生理代谢,植株生长、发育和果实成熟等之间的关系,鉴定NR基因的作用;还能获得可用于生产实践的耐贮藏、抗性强的新品种或育种材料。金鱼草(Antirrhinum majus)为玄参科多年生草本花卉。其品种多,花色丰富而艳丽,花期长,是花坛、花境及切花的常用素材。近年来,金鱼草已成为遗传学利分子生物学、特别是转座子、花色素发育与调控和花型发育研究的重要经典材料。金鱼草基因转化报道还较少,由于金鱼草的无菌苗生长势极弱,从而导致以下胚轴为外植体进行农杆菌Ti质粒介导法进行基因转化时,因下胚轴太小太细,再加上农杆菌的侵染作用,外植体在共培养阶段几乎全部死亡,从而使再生率和转化率大大下降,为金鱼草的基因转化工作增加难度。本研究结合了多倍体诱导和转基因工程两种技术,在基因转化前采用培养基中加秋水仙素法进行金鱼草多倍体的诱导,得到直径粗于金鱼草种子苗下胚轴几倍的四倍体再生苗;外源基因的转化采用根癌农杆菌携带反义NR基因与金鱼草四倍体再生苗的茎段共培养,将反义NR外源基因导入金鱼草细胞的染色体组,并通过不定芽进行抗性标记的筛选,对部分转基因四倍体进行PCR、Southern和Northern检测,成功获得抗卡那霉素的四倍体金鱼草植株。论文的研究结果如下:1、以市场所售的二倍体(2n=2x=16)切花金鱼草品种为材料,获得金鱼草的壮曲培养基的配方为1/2MS+BA1 mg/L+IAA0.2 mg/L;幼嫩茎段的分化培养基为MS+BA2.0mg/L+NAA0.1 mg/L;生根培养基的配方为:1/2MS+IBA0.5 mg/L。2、金鱼草四倍体的诱导采用培养基中加秋水仙素法,诱导浓度和时间分别是0.1%、4 d;对部分突变体进行PCR检测和染色体倍性鉴定,表明四倍体金鱼草诱导成功。经反复继代筛选,分离出同质的四倍体金鱼草。3、首次将反义NR基因导入四倍体金鱼草,并获得了部分转基因突变体。其转化体系如下:以四倍体金鱼草的幼嫩茎段为外植体,用OD_(550)值为0.4的农杆菌浸染,转入不含卡那霉素压力再生培养基上黑暗共培养2 d后,再转入含卡那霉素压力的筛选培养基(MS+BA2.0mg/L+NAA0.1 mg/L+卡那霉素50 mg/L+羧苄青霉素500 mg/L),通过压力筛选获得的抗性株为转基因四倍体金鱼草植株。4、对转化苗进行PCR检测,扩增出一条特异的电泳带,该片段为35S启动子的保守序列,由此表明外源基因已经整合到金鱼草细胞中;Southern检测了部分转基因四倍体,35S启动子DNA和转化植株DNA均有杂交信号,而未转化植株的DNA无杂交信号,证明NR基因已被成功转入到金鱼草细胞中;Northern检测了部分转基因四倍体,转化株的mRNA比非转基因植株的表达量弱,证明反义NR基因在转基因植株中与植株得到有效表达。5、对转化株与非转化株的花期进行统计,非转基因植株的花期为15-20 d,瓶插保鲜期为5-6 d,转基因植株花期为25-30 d,瓶插保鲜期为10-12d,表明反义NR基因的转入能够延长金鱼草的鲜花保鲜期。

孟梁[10]2009年在《伞树种子催芽和组织培养的研究》文中认为伞树(Acacia saligna(Labill.)H.L.Wendl.)是含羞草科(Mimosaceae)金合欢属(Acacia)的乔木树种,从非洲埃塞俄比亚引入我国。本研究以伞树种子、实生苗的嫩叶和茎段为试材,研究了伞树种子的催芽方法和伞树组织培养两大方面的问题,其主要结果如下:伞树种子催芽的研究采用3种不同方法即浓硫酸酸蚀、无水乙醇浸种、热水浸种对伞树种子处理后进行发芽试验,结果表明,浓硫酸酸蚀、无水乙醇浸种、热水浸种对伞树种子的吸胀率、发芽势、发芽率有不同程度的影响。热水浸种后伞树的吸胀率最高,3个处理水平都达100%。发芽率以热水80℃浸种40min为最好,种子发芽率达90%,发芽势达72.15%。无水乙醇浸种效果与98%浓硫酸酸蚀效果不明显。方差分析和多重比较表明,热水80℃浸种40min与其他所有处理的种子平均发芽率有极显着性差异,是最佳处理方法。伞树组织培养的研究结果表明:(1)对于伞树茎段来说,最佳灭菌时间为75%酒精15s和0.1%HgCl210min,而对于伞树嫩叶来说,最佳灭菌时间为75%酒精10s和0.1%HgCl2 5 min(2)综合伞树愈伤组织的出愈率、愈伤生长情况等筛选出MS为最佳愈伤诱导基本培养基。(3)伞树嫩叶和不带腋芽的茎段诱导愈伤组织,嫩叶诱导的愈伤组织出愈率93.33%,高于茎段的出愈率81.25%,且愈伤组织的颜色、质地等均好于茎段诱导的愈伤组织,筛选出嫩叶为诱导愈伤组织最佳的外植体。(4)2,4-D浓度为1.0 mg/L和2.0 mg/L时,愈伤组织的出愈率最高,达100%,愈伤组织颜色、质地好,但2,4-D对伞树愈伤组织分化丛生芽有抑制作用,在愈伤组织诱导中可不使用。(5)在6-BA与NAA的组合中,6-BA 2.0mg/L+NAA 0.5 mg/L愈伤组织诱导率最高,可达100%,因此对伞树愈伤诱导选择MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L培养基较好。(6)在腋芽诱导中,MS诱导的腋芽萌发率最高,达88.77%,为最佳的诱导腋芽萌发的基本培养基。6-BA对腋芽的萌发效果最好,6-BA0.4 mg/L+NAA 0.2 mg/L为最佳的诱导腋芽萌发的激素组合。将萌发的腋芽继代在不同浓度的KT培养上,当KT为0.5 mg/L时腋芽伸长效果最好。

参考文献:

[1]. 几种蔷薇科观赏植物试管苗工厂化生产技术及相关研究[D]. 李毅丹. 东北师范大学. 2004

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[3]. 茉莉离体快繁体系的建立[D]. 孙艳妮. 南京农业大学. 2010

[4]. 金叶日本冬青组织培养研究[D]. 朱志国. 南京农业大学. 2006

[5]. 波叶红果树(Stranvaesia davidiana var. undulata)离体培养再生体系建立及试管开花研究[D]. 白伟琴. 浙江农林大学. 2011

[6]. 欧李组织培养体系试验研究[D]. 张秀丽. 河北农业大学. 2007

[7]. 牡丹组织培养技术的初步研究[D]. 陈莉. 河南农业大学. 2006

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几种蔷薇科观赏植物试管苗工厂化生产技术及相关研究
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