白藜芦醇通过失活FoxO1及激活Sirt1在IL-1β处理的SW1353细胞中发挥抗骨关节炎效应

白藜芦醇通过失活FoxO1及激活Sirt1在IL-1β处理的SW1353细胞中发挥抗骨关节炎效应

论文摘要

目的探讨白藜芦醇(resveratrol,RES)抑制白介素1β(interleukin 1β, IL-1β)处理的SW1353细胞的炎症反应与叉头框转录因子O1(forkhead transcription factors O1,FoxO1)/细胞沉默信息调节子1(silent information regulator 1,Sirt1)信号之间的关系。方法采用SW1353软骨肉瘤细胞系,进行如下4个方面的处理及检测:给予10ng/ml IL-1β的同时,加入RES(12.5、50μmol/L)处理24 h,Western blot法检测Sirt1蛋白的表达;给予10ng/mL IL-1β的同时,加入RES(50μmol/L)处理30 min,免疫细胞化学技术检测FoxO1的定位,Western blot法检测FoxO1及p-FoxO1水平;FoxO1 siRNA进行转染,荧光显微镜下观察转染效率,Western blot法检测FoxO1的抑制效果及对Sirt1的影响;FoxO1siRNA转染后,Western blot法检测RES处理对Sirt1蛋白表达的影响,ELISA法检测细胞培养基上清IL-6的水平。结果单纯IL-1β处理对Sirt1的蛋白表达无明显影响,而给予RES(12.5、50μmol/L)处理后显著增加Sirt1水平。加入IL-1β/RES后,FoxO1主要定位于细胞质中;IL-1β处理显著上调p-FoxO1水平,而加入RES则进一步增加p-FoxO1水平;FoxO1水平保持不变。FoxO1基因沉默可有效抑制细胞FoxO1水平,同时Sirt1水平也被显著抑制。FoxO1基因沉默后抑制RES诱导的Sirt1水平,抑制IL-1β增加的IL-6水平,而RES处理则引起IL-6水平的进一步降低。结论在IL-1β处理的SW1353细胞中,RES可以通过失活FoxO1,增加Sirt1的水平发挥抗炎效应。

论文目录

  • 材料与方法
  •   1主要仪器和试剂
  •   2细胞培养
  •   3细胞分组及处理
  •   4 siRNA转染沉默细胞FoxO1基因
  •   5 ELISA法检测细胞培养上清中细胞因子IL-6的水平
  •   6 Western blot检测蛋白水平
  •   7免疫荧光检测FoxO1定位表达
  •   8数据分析
  • 结果
  •   1白藜芦醇上调IL-1β处理的SW1353细胞Sirt1水平
  •   2 IL-1β与白藜芦醇处理促进FoxO1由胞核向胞质转位
  •   3白藜芦醇增加IL-1β处理SW1353细胞内pFoxO1水平
  •   4 FoxO1siRNA有效抑制SW1353细胞FoxO1表达
  •   5沉默FoxO1下调SW1353细胞内Sirt1水平
  •   6 FoxO1基因沉默降低RES对SW1353细胞内Sirt1的上调
  •   7 RES和沉默FoxO1抑制IL-1β对SW1353细胞分泌IL-6的促进作用
  • 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 顾海伦,徐小磊,刘旭丹,刘莉

    关键词: 骨关节炎,白藜芦醇,叉头框转录因子,细胞沉默信息调节子,细胞

    来源: 中国组织化学与细胞化学杂志 2019年04期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,医药卫生科技

    专业: 中药学

    单位: 中国医科大学附属盛京医院骨科,中国医科大学公共卫生学院营养与食品卫生教研室

    基金: 国家自然科学基金(81372971),沈阳市科技计划项目(RC170476)

    分类号: R285.5

    DOI: 10.16705/j.cnki.1004-1850.2019.04.003

    页码: 311-317

    总页数: 7

    文件大小: 1195K

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